Marcadores Bioqu

1
Marcadores Bioquímicos del Remodelamiento Oseo

• Rosa I Sierra Amor, MS PhD
• IFCC EB Member
• (México)

2
Metabolismo Oseo

• REMODELAMIENTO
• FORMACION
• RESORCION

3
Ciclo de Remodelamiento Oseo
4
Remodelamiento Oseo

• El hueso está en continuo remodelamiento
• Proceso de acoplamiento entre los osteoclastos y
  los osteoblastos.
• Los osteoclastos resorben hueso. Los osteoblastos
  forman hueso nuevo
• Desacoplamiento Osteopenia - Osteoporosis

5
Balance Oseo Resorción Formación
6
Balance Oseo Resorción ? Formación
7
Cambios en la Masa Osea con la Edad

• .

Men
1200
Calcium (g)
800
Women
Ideal point of detection
400
Current point of detection
0
15
25
35
45
55
65
75
85
Age in years
8
Contenido Mineral Oseo

• MEDICION DE LA DENSIDAD OSEA
• ESTUDIOS CON RADIOISOTOPOS
• HISTOMORFOMETRIA
• MARCADORES BIOQUIMICOS DEL REMODELAMIENTO OSEO

9
Marcadores de Resorción Osea

• OSTEOCLASTOS
• resorben hueso
• células multinucleadas
• receptores de membrana para hormonas y otras
  sustancias

10
Marcadores de Resorción Osea

• FUNCION OSTEOCLASTICA
• TRAP (Fosfatasa ácido tartrato resistente)
• MATRIZ OSEA. Productos de degradación y derivados
  del colageno tipo I
• Hidroxiprolina y Galactosamina
• Crosslinks ( Dpd, Pyd, NTx, Crosslaps, ICTP)

11
Marcadores de Formación Osea

• OSTEOBLASTOS
• formación de la matríz ósea
• osteocitos
• liberación de enzimas (isoenzimas)
• ciclo óseo

12
Marcadores de Formación Osea

• FUNCION OSTEOBLASTICA
• Fosfatasa alcalina (TAL)
• Isoenzima ósea de la Fosfatasa Alcalina (BAL)
• Osteocalcina o Proteína GLA (OC)
• Péptidos del procolageno tipo I (PICP, PINP)
• Sialoproteína ósea

13
Enfermedades Oseas Metabólicas

• Osteopenia
• Osteoporósis (Juvenil, Tipo 1, Tipo 2)
• Calcémias (paratiroides, tumorales)
• Enfermedad de Paget
• Renales (Osteodistrofia, IRA, IRC, Síndrome
  Nefrótico)
• Deficiencia o Exceso de Vitamina D
• Otras

14
Marcadores Bioquímicos del Remodelamiento Oseo
15
Pyridinium Crosslinkingin Bone Collagen

• .Bone Collagen

Pyridinium crosslink
C


C
helical region
telopeptide region

16
Sitios de Reconocimiento de los Inmunoensayos
Free pyridinium crosslinks Pyd Dpd (urine
serum)
N

• .

C
C
C
C
C
N
C-telopeptides CTx (urine)
Crosslinked N-telopeptides NTx(urine serum)

Crosslinked C-telopeptides CTx (serum)
Crosslinked C-telopeptides ICTP (serum)
17
Determinación de los Marcadores Oseos

• ORINA
• fDpd
• fPyd
• tDpd
• CTx
• NTx
• POCT NTx

• SUERO
• BAL
• OC
• Procollagen
• ICTP
• NTx
• Pyd/Dpd
• Clin Chem Lab Med 2000 38(11)1111-13

18
Manejo Optimo del Paciente (1)

• Pre-analítico
• 1. Receta médica
• 2. Toma de la muestra
• 3. Proceso de la muestra
• 4. Conservación de la muestra

19
Métodos de Análisis para Determinar los
Marcadores Oseos

• AUTOANALIZADORES
• RADIOINMUNOANALISIS (RIA)
• INMUNOANALISIS RADIOMETRICO (IRMA)
• ANALISIS INMUNOENZIMATICOS (ELISA)
• CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCION (HPLC)

20
Métodos de Análisis para Determinar los
Marcadores Oseos...

• BECKMAN COULTER
• BAYER
• DIASORIN
• DPC
• DSL
• ORTHO CLINICAL DIAGNOSTICS
• OSTEOMETER
• OSTEX INTERNATIONAL
• ROCHE DIAGNOSTICS
• QUIDEL CORPORATION (METRA BIOSYSTEMS)

21
Variación Diurna de la Resorción Osea
80

• La máxima excreción urinaria ocurre en la noche
• El controlar la recolección de la muestra es
  esencial
• La muestra óptima es la de la mañana (10 am)
• La recolección de la muestra de 24 horas es útil,
  pero la concentración es menor que en la
  determinación matutina

• Dpd.

Individual subject Mean
40
0
Change from 24 hr mean ()
-40
Ideal specimen collection time
-80
7
10
13
16
19
22
1
4
Hour of day
22
Alta Variabilidad de los Marcadores Oseos en Orina

• .

40
OC BAP PICP PINP ICTP TRAP Ca Hyp tDpd fPyd fDpd N
Tx CTx
30
20
Coefficient of variation ()
10
0
23
Variabilidad de los Marcadores de Formación Osea
JBoneMinerRes 199813(7)1124
24
Variabilidad de los Marcadores de Resorción Osea
JBoneMinerRes 199813(7)1124
25
Variabilidad de los Marcadores de Resorción
Osea...
JBoneMinerRes 199813(7)1124
26
Variabilidad de los Marcadores Oseos

• Los Marcadores Oseos son criticados por su alta
  variabilidad para usarse de manera individual
• Crítico es el tomar una decisión médica entre la
  variabilidad de la muestra y el cambio esperado
  por ejemplo debido al progreso de la enfermedad
  o a la intervención por el medicamento
• J Bone Miner Res 1998 131124-33

27
Manejo Optimo del Paciente (2)

• Pos-analítico
• 1. Tiempo de entrega
• 2. Reporte
• 3. Verificación
• 4. Nueva muestra

28
Uso de los Marcadores Oseos
29
Respuesta a la Terapia Antiresorsiva que Precede
a la Formación Osea

• Change from baseline,

BAP
DPD
OC
NTX
0
3
6
Months of Therapy
J Clin Endocrinol Metab 1994791693
30
Respuesta Individual a la Terapia con
Pamidronato Relativa al Cambio Mínimo
Significativo
BAP Oc Dpd NTx Pyd

• .

25
0
-25
-50
-75
-100
0 3 0 3 0 1 0 1 0 1
Months on therapy
Endocrine Society 1998 Endocrine Practice
20017(4)293-312
31
Respuesta a la Terapia mediada a través de
losMarcadores Oseos vs la Densitometría Osea
HRT BAP Spine Hip
DXA DXA
Alendronate BAP Spine Hip DXA
DXA

• .

100
100
80
80
60
60
40
40
20
20
0
0
3 6 12 36 12 36
12 12 36 12 36
Months on therapy
32
Alto Remodelamiento Oseo

• La pérdida de hueso predice el riesgo a fractura
  independientemente de la masa ósea
• Un alto remodelamiento óseo (resorción y
  formación ósea) está asociado con una pérdida
  rápida de hueso
• Un alto remodelamiento óseo también contribuye al
  deterioro de la microarquitectura del hueso
  debilitandole y finalmente perforando la
  trabecula
• Un alto remodelamiento óseo predice el riesgo a
  fractura independientemente de la masa ósea
• JBoneMinerRes 19992323-42

33
Alto Remodelamiento Oseo en la Mujer
Posmenopaúsica
80
80

• .

• .

BAP
60
60
Proportion with High Turnover ()
OC
Dpd
40
40
NTx
20
20
0
0
lt60 60-69 70-79 80 On HRT Age (years)
JBoneMinerRes 1997121083 CCLM 2002
40(2)143-1151
34
Utilidad Clínica de los Marcadores Oseos

• Pacientes con Osteoporosis y Terapía de Remplazo
  Hormonal (TRH)
• Identifica a los pacientes en riesgo de perder
  hueso en forma significativa
• Monitorea la terapia antirresorsiva
• Mejora la toma del medicamento por el paciente al
  demostrar los beneficios de la terapia
• Da seguimiento a la terapia de reemplazo hormonal

35
Utilidad Clínica de los Marcadores Oseos.

• OSTEOPOROSIS
• Utilies si se miden conjuntamente con la
  densitometría ósea para estimar el riesgo a
  osteoporósis
• ENFERMEDADES OSEAS METABOLICAS
• Endócrinas (tiroides, paratiroides, síndrome de
  Cushing)
• ENFERMEDAD DE PAGET
• METASTASIS OSEA
• OTRAS ENFERMEDADES RELACIONADAS

36
GRACIAS