Az immunv

1
2. Óra
Az immunválasz manipulálása az immunválasz
befolyásolásán alapuló terápia

• Antigén specifikus
• Immunstimuláció
• Immunszuppresszió

• Nem antigén specifikus
• Immunstimuláció
• Immunszuppresszió

• Immunmoduláció

2
Terápiás célpont az immunválasz elemei
citokinek, adhéziós molelulák, sejtmembrán
molekulák, receptorok, ellenanyagok Ellenanyago
k mint gyógyszerek specifitás ?
antigenicitás humanizált ellenanyagok,
targeting
3
Immunterápiás eljárások / az immunrendszer
muködésének módosítása
Immunszuppresszió
-autoimmun folyamatok gátlása -allergiás
folyamatok gátlása -transzplantációs tolerancia
létrehozása -az újszülöttkori hemolítikus
betegség kialakulásának megakadályozása
Immunmoduláció
-a TH1 / TH2 egyensúly eltolása autoimmun vagy
allergiás kórképekben -az ellenanyagválasz
izotípus megoszlásának megváltoztatása allergiás
kórképekben
4
A FERTOZÉSEKKEL SZEMBENI VÉDELEM

• a fertozést követoen ?
• hagyományos gyógyszeres (antibiotikumok, vírus
• 
  anyagcsere gátlók)
• passzív immunizálás (ellenanyagok, sejtek)
• aktív vakcinálás

a fertozést megelozoen ? vakcinálás ? 1) a
specifikus felismero készlet arányának növelése
2) specifikus
immunológiai memória létrehozása
5
IMMUN STIMULÁCIÓ -vakcináció
6
Karikatúra az E. Jenner által bevezetett himlo
oltás következményeirol
7
?. . . . ezen egészségtámogató eszközökkel
összhangzó egészségápolási szabályok teljesen
elegendok a himloragályozástól való megóvásra,
és azért is a mesterséges himlovel való beoltás
nemcsak fölöslegesnek tunik fel, hanem az
egyúttal a természet törvényeivel ellenkezo
kihágásnak tekintendo. Az emberi vagy állati
vérbol nyert genny beoltásával különbözo
betegségek csírái terjesztetnek széjjel, melyek
lényegesen hozzájárulnak az emberi nem
degenerátiójához   Van-e az oltásnak a
természet törvényei szerint létjogosultsága?
Isten ments ! Bilz F. E. A
természetes gyógymód, 1905
8
(No Transcript)
9

• Antigénspecifikus immunstimuláció
• Aktív immunizálás
• elölt kórokozó
• legyengített kórokozó
• keresztreaktív, nem patogén élo kórokozó, vagy
  ennek része
• nem toxikus, módosított forma (mikrobiális
  toxin)
• Eredmény
• ellenanyag termelés effektor T sejtek
• memória válasz
•  
• Adjuvánsok cél immunstimuláció elosegítése
• ag koncentrálása
• hosszú ideig fenntartása
• APC stimulálása

10

•  
• Passzív immunizálás hiperimmunizált állatból
  vagy emberbol
• IgG kész antigénspecifikus ellenanyag
• elonye gyors, de átmeneti
• hátránya nincs memória válasz,
• az ellenanyag eliminációja, neutralizáció,
  allergia,
• fajspecifikus immunválaszt válthat ki
•   alkalmazás tetanusz, kígyóharapás
• humán IgG ellenanyag defficiencia
• Adaptív immunitás immunkompetens sejtekkel
  történo terápia -gyermekkori immundeficienciák
  
• Kongenitális sejtes immundefficiencia
• forrás csontvelo (MHC kompatibilis), vagy
  fötális máj, timusz immunkompetens sejtjei
• -enzimhiányos betegségek adenozin deamináz,
• nukleozid foszforiláz
• szomatikus génterápia csontveloi ossejtbe
  bejuttatott virális vektor, mely a kívánt
• hiány-gént tartalmazza.

11
Vakcináció antigén specifikus
immunstimuláció Oltóanyag Kórokozó, vagy általa
termelt fehérje pl. toxin  ellen Élo,
legyengített vírus hatékonysága ? elölt
vírusé  (effektor mechanizmusok, CD8T sejt szám
?) de veszélyek!  ? Új technikák Rekombináns
DNS technológia Immunizálás dendritikus sejtek
segítségével új típusú vakcinák- a jövo

• Kórokozó legyengítése
• sejttenyészetben szaporított vírus, ahol
  eredetileg nem no (majom)
• ? mutációk ? vírus szaporodása ? emberi
  sejtekben nem szaporodik ? - oltóanyag

• In vitro mutagenezis virus gén megváltoztatása
  visszafordíthatatlanul
• pl. influenza- évente más - antigén shift
• tervezett mutagenezis

12
Vírusok legyengítése nem emberi sejtekben való
tenyésztéssel
13
Influenzavírus felszíni antigének változásának
mechanizmusa az antigén-drift és az
antigén-shift
Antigen drift antigén-összetételében végbemeno
állandó, folyamatos és általában kismértéku
változásokat antigén-drift-nek nevezzük Antigen
shift két vírustörzs keveredik egy gazdasejtben
úgy, hogy a gének, melyek új vírusrészecskékbe és
megfelelo fehérjéikbe vannak csomagolva, részben
az egyik, részben a másik törzsbol származnak
14

Patogén vírus Virulencia gén izolálása Virulen
cia gén mutációja vagy eltávolítása
15

• Nem patogén mutánsok kifejlesztése
• Vírusok polio, mumps, rubella, kanyaró, stb. -
  a virulenciához szükséges gén eltávolítása
  vagy mutációja
• Baktérium Salmonella typhy nem fertozo
  mutánsok szelekciója
• - UDP galactóz epimeráz enzim mutációja - LPS
  szintézishez szükséges, mutánsban az LPS
  csökken
•   -Targeting enzim ? Tyr, Phe szintézishez,
  nincs ?
• ezért cssak lassú szaporodás a bélrendszerben ?
  vakcináció
•   Csirke salmonella állatok oltása fontos

• Konjugátum vakcina
• B és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris
  komplexben levo epitópokat kell felismerniük
• Haemophilus influenzae B
• Tsejt-független B sejt válasz poliszaharid a
  baktérium kapszulára
• tetanusz toxoid poliszaharid konjugátum - T
  sejtektol függo, hatékony
• válasz 2 év alatt is
• Tetanusz toxoid specifikus T sejtek citokineket
  termelnek B sejt válasz a bakteriális
  poliszaharid ellen

16
Haemophilus influenzae type B vaccine

• Konjugátum vakcina
• B és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris
  komplexben levo epitópokat kell felismerniük

17

• Reverz immunogenetika
• T sejt epitópok meghatározására

Pl Maláriára jellemzo, a HLAB53 véd a fatális
cerebrális malária ellen. HLAB53hoz kötodo
peptidek azonosítása a 2. helyen Pro tartalmú
saját nonapeptid azonosítás patogénnel
fertozött sejtbol.-gt Plasmodium falciparum
fehérjében Eros cytotoxikus T sejt választ vált
ki.
T sejtek proliferációja
Peptid -gt terápia
18

• Legyengített élo mikroorganizmus, mint vektor
•  
• más gének beépítése kombinált vaccina
• pl. Salmonella tetanusz toxoid ag,
  Listeria monocytogenezis
• Leishmania
• Yersinia pestis
• Schistosoma mansoni gének
• vírus nem patogén, többféle gén beépítése
  (növényi vírusok)
•  
• kórokozó mint hordozó antigén beépítve, több
  ag egyszerre
• nem ismételheto
• heterológ vakcinák

• Szintetikus peptidek
•  
• T sejt epitóp azonositása, ? peptid szintézis
• Hátrány sokfélesség
•  
•   ISCOM immune stimulatory complex
• liposzómába zárt peptid sejtbe bejut
•  

19
Immunstimuláló komplex peptiddel
Fúzió
Peptid transzport az ER -be
Peptid bemutatása az MHCI-en keresztül a T sejtek
számára
20
Sikeres vakcinációs kampányok

SSPE stands for subacute sclerosing
panencephalitis, a brain disease that is a late
consequence of measles infection in a few
patients.
21
(No Transcript)
22
(No Transcript)
23
(No Transcript)
24
(No Transcript)
25
(No Transcript)
26

Diseases for which effective vaccines are still
needed. The number of people infected is
estimated at 200 million, of which 20 million
have severe disease. Current measles vaccines
are effective but heat-sensitive, which makes
their use difficult in tropical countries.
Estimated mortality data for 1999 from World
Health Report 2000 (World Health Organization).
27
A vírus fertozések típusai
polio, influenza, mumpsz, sárgaláz
herpes, varicella, EBV
HIV, hepatitis B, hepatitis C
28
Az immunválasz kialakulása a vírus fertozést
követoen
29
Az ellenanyagválasz kinetikája
30
A vírus-specifikus ellenanyagok célpontjai
31
PROBLÉMÁK
Az ellenanyagválasz nem megfelelo specificitású,
izotípusú illetve lokalizációjú
Az ellenanyagválasz nem ad kielégíto védelmet
A patogén adaptációs mechanizmusai gátolják a
hatékony immunválasz kialakulását
32
Ellenanyag termelés citotoxikus T sejtek
megjelenése védelem a vírus ellen
DNS targeting         megfelelo
ligandum,       internalizáció és
endoszóma-irányítás       fúzió
lizoszómákkal       lizoszomális enzimek
degradálják   Szintetikus virus    
33
Intranasalis, intrarectális, intravaginális
immunizálás CTL indukálása Peyer plakkokban,
lamina propriában történik Adjuvánsok pl.
kolera toxin B cAMP indukció, IL-12
termelés különösen alkalmas nyálkahártya
immunizálásra DNS alapú vakcináció Bejuttatás
In vivo elektroporácó, génpisztoly
intramuszkulárisan Teljes Protein gén, vagy
peptid epitóp MHCI, MHCII prezentáció Virális
vektor (vaccinia, poxvirus) erosíti rec DNA
vakcina hatását
Nukleáris transzlokációs szignál
DNS plazmid
ligandum
Endoszomális lizis, vagy bypass
?
Szövetspecifikus regulálható promoter
Terápiás gén
34
VAKCINÁK /kísérleti szakaszban
35
(No Transcript)
36
Vakcina TERVEZÉS
37
A megfelelo epitópok kiválasztása
38
(No Transcript)
39

• Stratégia új generációs vakcinák fejlesztésére
• Vírusok nem fejeznek ki megfelelo T sejt
  epitópot (szelekció az evolúció során)
• Tumor a hatékony T sejtek delécióját segíti
  elo
• Immunogenitásának fokozása epitóp enhancement
• peptid- MHC kötodés affinitásának növelése,
  MHCII TH sejtek (pl. HIV), horgonyzó aminosavak
  javítása, kombinatórikus peptid könyvtár
• peptid-MHC komplex TCR-hez kötodés affinitásának
  növelése kis és nagy affinitású T sejtek
  aktiválása, vagy repertoár torzulás
• pl. tumor epitópot felimero T sejtek számának
  növelése
• TCR keresztreaktivitás növelése peptid kiméra
  különbözo vírus törzsek felismerése

40
A HLA-A2 és -B27 molekulák peptidkötése
1
1
8
9
8
6
7
7
3
5
3
6
4
4
5
2
2
9
L
V
R
HLA-A2
HLA-B27
A 9 aminosavból álló peptidek megkötésére
alkalmas peptid-köto árokban csak a horgonyzó
aminosavak illeszkednek a megfelelo peptid-köto
zsebekbe
41
A vakcina hatékonyságának fokozása a szekvencia
módosításával
42
VAKCINA TERVEZÉS
43
A különbözo vakcina típusok összehasonlítása
44
(No Transcript)
45
A hatékony vakcina - biztonságos
alkalmazható gyermekeknek, felnotteknek,
mindenkinek - Hatékony a fertozés ellen,
vagy a betegség ellen (kevésbé jó) - megfelelo,
tartós védettséget biztosít- memória (védettség
élethosszig) - neutralizáló ellenanyagot
indukál - T sejtes választ indukál - stabil,
olcsó, kevés mellékhatás - könnyen alkalmazható
(orális vakcina, egy alkalom az ideális-pl. Sabin
csepp) -elfogadható és alkalmazható mindenhol
(fejlodo világ).   Adjuváns alkalmazása nem
specifikus szignál- makrofágok stimulálása citok
in indukció, antigén-depó lassú
felszívódás alumínium hidroxid alap, vagy olaj
emulzió. Kevert oltásnál egyik adjuválhatja a
másikat (pl. Bordatella Pertussis
tetanusdiftéria) citokinek együttes
alkalmazása IL-12 - TH1 választ segiti Az
immunizálás módja Lényeges az antigén
szervezetbe jutásának helye Orális vakcinák
mucosa szerepe (MALT)
46
Dendritikus sejtek mint vakcina hordozók