TIROSIN CHINASI CITOPLASMATICHE

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TIROSIN CHINASI CITOPLASMATICHE
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TIROSIN CHINASI CITOPLASMATICHE
Focal adhesion targeting (paxillin binding)
(FERM)
Src (Blk, Lck, Lyn, Fyn, Fgr, Hck, Yes)
Ac. miristico/palmitico
Abl/Arg
Ac. miristico
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(No Transcript)
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G. Steven Martin  THE HUNTING OF THE SRC, Nature
Reviews Molecular Cell Biology 2, 467-475 (2001)
 
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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Integrine
Src
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FAK e membri della famiglia del Src costituiscono
ununità di trasduzione del segnale da parte di
molecole adesive definite INTEGRINE
SH3
SH3
SH2
YP397
Src
FAK
Src
SH2
SH1
SH1
FAK
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Outside-in signaling
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FAK
F1
F2
F3
11
Anche FAK come Src viene attivata in seguito alla
rottura di interazioni intermolecolari che la
mantengono in uno stato inibito.
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(No Transcript)
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Il distacco da proteine della matrice
extracellulare induce una forma di apoptosi
(chiamata anoikis) che determina il fenomeno
della cosiddetta crescita dipendente
dallancoraggio
SH3
SH2
YP397
Src
FAK
PI3K
AKT
PY
PROLIFERAZIONE E SOPRAVVIVENZA
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Fosfatidilinositolo 4,5 fosfato
Fosfatidilinositolo 3,4,5 fosfato
P
P
P
SH3
P
P
P
P
P
P
P
PH
SH2
PI3-chinasi
YP397
Src
PIP5-chinasi g
IP3
FAK
GEFs
PLCg
SH1
PY
Cas
paxillina
PY
YP925
PY
Rac, Cdc42
Crk
Dock180
Grb2
Sos
Rac
Interazione con altre Proteine cito- scheletriche
e segna- lanti
Ras
PAK
Polimerizzazione dell actina e protrusione del
lamellopodio
Raf MAPK MAPK (ERK1/2)
JNK
Movimento cellulare
TRASCRIZIONE GENICA
Proliferazione e sopravvivenza cellulare
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FAK, Src e altre chinasi vengono inibite da
tirosin fosfatasi che sono sensibili allazione
inibitoria di ROIs
FAK, Src, GF-Rs, MAP chinasi (JNK, ERKs) attive
FAK, Src, GF-Rs, MAP chinasi (JNK, ERKs) inattive
Protein fosfatasi inattiva
Protein fosfatasi attiva
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La transizione epitelio-mesenchimale rappresenta
una modificazione tipica dei tumori
epiteliali metastatici
An epithelial-mesenchymal transition (EMT) is a
biologic process that allows a polarized
epithelial cell, which normally interacts with
basement membrane via its basal surface, to
undergo multiple biochemical changes that enable
it to assume a mesenchymal cell phenotype, which
includes enhanced migratory capacity,
invasiveness, elevated resistance to apoptosis,
and greatly increased production of ECM
components . The completion of an EMT is
signaled by the degradation of underlying
basement membrane and the formation of a
mesenchymal cell that can migrate away from the
epithelial layer in which it originated. (Kalluri
and Weinberg, J. Clin. Invest. 1191420, 2009)
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EPITHELIAL-MESENCHIMAL TRANSITION
MESENCHIMAL-EPITHELIAL TRANSITION
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(No Transcript)
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giunzioni serrate (tight junction)
F-actina
microtubuli
p120 cat.
Previene endocitosi e de- gradazione E- caderina
giunzioni aderenti (adherens junctions)
E-caderina
p120 cat.
E-caderina
Rac
F-actina
Rho
Movimento
Migrazione nel nucleo e trascrizione geni
implicati nella proliferazione cellulare
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Laumentata stimolazione con fattori di crescita
altera funzioni di E-caderine In diversi modi
Recettori per fattori di crescita TGFbRI e II,
IGF-1R, EGFR, c-Met
giunzioni serrate (tight junction)
F-actina
giunzioni aderenti (adherens junctions)
p120 cat.
E-caderina
F-actina
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Laumentata stimolazione con fattori di crescita
altera funzioni di E-caderine In diversi modi

• Il promotore del gene per le E-caderine viene
  represso da repressori trascrizionali
• (Snail, Twist, Slug e altri) indotti da
  Recettori per GF e altre vie attivate nel corso
  di progressione
• tumorale (compreso Nf-kB).

2. Tirosin chinasi recettoriali (EGFR, IGF-1R,
c-Met, FGF) e non recettoriali (c-Src) inducono
fosforilazione e successiva ubiquitinilazione di
E-caderine e catenina con conseguente
degradazione nel proteosoma. La fosforilazione
di E-caderina comporta anche il distacco di a e b
catenine.
3. Proteasi (metallo-proteasi MMP)
proteolizzano E-caderine alterando contatti
cellula-cellula.
4. Gli stessi segnali che down-regolano
espressione di E-caderine aumentano espressione
di N-caderine (il cosiddetto caderin-switch),
che sono espresse da cellule mesenchimali e
regolano positivamente il movimento cellulare.
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movimento
Sress fibers, focal adhesion
Cdc42
Rac
Rho
p120 cat.
E-caderina
F-actina
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Inibizione di GSK da parte di GF-Rs o altri
stimoli favorisce la progressione neoplastica
P
Snail
GSK-3
P
E-caderina
Repressione sintesi E-caderine
Trascrizione geni implicati in proliferazione e
progressione
DEGRADAZIONE
NUCLEO
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Un meccanismo aggiuntivo di regolazione della
funzione di bcatenica è rappresentato da un suo
aumento di espressione in cellule stimolate con
proteine wnt (ampia famiglia di fattori di
crescita poco caratterizzati)
Gene onco-soppressore, la cui mutazione in
cellule della linea germinale determina
la Poliposi Adenomatosa Famigliare del Colon
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a In the absence of WNT signalling, -catenin
levels in the cytoplasm and nucleus are low as a
result of continuous phosphorylation by the
serine/threonine kinases CK1 (casein kinase 1)
and GSK3 (glycogen synthase kinase 3), leading to
binding of -transducin-repeat-containing protein
(TRCP) and to ubiquitylation and degradation by
the proteasome. The destruction complex is
composed of CK1 and GSK3, as well as the anchor
proteins AXIN1 (axis inhibition protein 1 ) and
APC (adenomatous polyposis coli). In the nucleus,
TCF (T-cell factor) molecules are bound by
co-repressors such as GRG/TLE (Groucho/transducin-
like enhancer) proteins that shut off expression
of WNT target genes. Other components of the
repressor complex include CTbP (C-terminal
binding protein) and HDACs (histone
deacetylases). -catenin in the nucleus is
inhibited from binding TCF by ICAT (cell
autonomous inhibitor of -catenin and TCF) . The
Frizzled receptor complex composed of Frizzled
and LRP5 (LDL-receptor-related protein 5) or LRP6
can also be actively inhibited by
receptor-bound soluble inhibitors such as DKK1
(Dickkopf homologue 1). b Upon binding of a
lipid-modified WNT protein to the receptor
complex, a signalling cascade is initiated. LRP
is phosphorylated by CK1 and GSK3, and AXIN1 is
recruited to the plasma membrane. The kinases in
the -catenin destruction complex are inactivated
and -catenin translocates to the nucleus to form
an active transcription factor complex with TCF,
leading to transcription of a large set of target
genes. In the nucleus, -catenin binds to TCF and
LEF factors and recruits co-factors such as
legless (LGS also known as BCL9) and Pygopus
(PYGO), CBP/p300, Brahma and MED12 to initiate
transcription99, 100, 101. DVL, mammalian
homologue of Drosophila Dishevelled PP2A,
protein phosphatase 2A.
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(No Transcript)
27
(No Transcript)
28
Dipartimento di Patologia Sezione di Patologia
Generale Università di Verona
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Granulocyte/macrophage progenitors
Megakaryocyte/erythrocyte progenitors
Common myeloid progenitors
Haematopoietic stem cell
Common lymphoid progenitors
Chronic myeloid leukemia-blast phase (70)
Chronic myeloid leukemia-blast phase (30)
Chronic myeloid leukemia-chronic phase
R. Ren, 5172-183
30
Weisberg et al. 7345, 2007
With the aid of several mediator proteins,
BCR-ABL associates with Ras and stimulates its
activation. The adaptor protein, growth factor
receptor-bound protein 2 (GRB2), interacts with
BCR-ABL through the proximal SRC homology 2
(SH2)-binding site that develops when the
tyrosine 177 (Y177) residue of BCR-ABL is
autophosphorylated. GRB2, when bound to BCR-ABL,
interacts with the son of sevenless (SOS)
protein. The resulting BCRABLGRB2SOS protein
complex activates Ras. The adaptor proteins CRKL
(CRK-like) and SHC (SH2-containing protein) can
also mediate the BCR-ABL activation of Ras. Ras
and the mitogen activated protein kinase (MAPK)
pathway are coupled by Raf (a serine/threonine
kinase). Raf catalyses the phosphorylation of the
mitogen-activated and extracellular-signal
regulated kinase kinases 1 and 2 (MEK1 and MEK2)
this results in their activation. Through the
stimulation of the RasRaf pathway, BCR-ABL
increases growth factor-independent cell growth.
BCR-ABL also associates with and activates the
phosphatidylinositol-3 kinase (PI3K) pathway,
suppressing programmed cell death and increasing
cell survival. BCR-ABL is associated with
components of the focal adhesion(that is, actin,
paxillin and focal adhesion kinase, or FAK) the
activation of CRKLFAKPYK2 leads to a decrease
in cell adhesion. BCR-ABL also associates with
the Janus kinase and signal transducer and
activator of transcription (JAKSTAT) pathway.
Finally, BCR-ABL activates pathways that lead to
atypical responses to chemotactic factors, which
leads to an increase in cell migration. BCR-ABL
also associates with survival proteins that
interact with the mitochondrial-based BCL2
family. CAS, p130 CRK-associated substrate GAB2,
GRB2-associated binding protein 2 SHIP,
SH2-containing inositol-5-phosphatase
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(Imatinib mesilato)
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TRASDUZIONE DEL SEGNALE DA PARTE DI RECETTORI
IMMUNI
ITAM (Immunoreceptor tyrosine-based inhibitory
motif) DExxYxxL/I(x)6-7YxxL/I
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FcgRIIA
FcgRIIB
ITIM I/VxxYxxL/V
ITAM
Immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif
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TRASDUZIONE DEL SEGNALE DA PARTE DI RECETTORI
IMMUNI
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attivazione
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(No Transcript)
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C-type lectins
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Lyn/Hck/Fgr
Syk
Syk
Lyn
Syk
Lyn
Fyn/ Lck
Syk
ZAP70
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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Abl
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Lipide fosfatasi
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Protein fosfatasi
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ANCHE ALCUNE FAMIGLIE DI INTEGRINE (b2 E b3)
TRASDUCONO IL SEGNALE MEDIANTE UN MODULO BASATO
SU ADATTATORI CON SEQUENZA ITAM E SYK
?
SYK
SYK
ITAM
SFK