Croissance Bact

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Croissance Bactérienne

• En fonction de différents facteurs
  physico-chimiques du milieu.
• Bactéries du yaourt

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Protocole

• - Nous avons cherché à mettre des bactéries du
  yaourt en culture sur de lagar pour pouvoir
  séparer les deux types responsables de la
  création de celui-ciLactobacillus Bullgaricus
  (barres) et Streptococcus thermophilus (boules)

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Protocole
Log du nombre de bactéries

• On espérait de cette facon séparer les clones des
  bactéries pour les mettre dans un milieu de
  culture liquide et colorés de facon à voir
  lévolution de leur nombre en fonction du temps,
  de variations de la température, du PH et des
  nutriments grâce à un spectrophotomètre. On
  aurait trouvé une courbe de ce genre

Temps, Heures
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Courbe de croissance

• On décele facilement 4 phases distinctes
• La phase de latence les bactéries ne commencent
  pas à se reproduire immédiatement en fonction de
  leur temps de génération mais la population
  reste constante pendant une période supérieure au
  temps de génération. Pendant cette période les
  cellules individuelles métabolisent et croissent
  en taille. Cest après cette adaptation au
  nouveau milieu quelles se divisent.
• La phase de croissance durant cette phase les
  bactéries se divisent suivant leurs temps de
  génération. Théoriquement, cette phase décrit une
  progression logarithmique, la population se
  doublant à chaque génération. En théorie,
  également toutes les cellules évoluent de la même
  facon et se reproduisent en même temps.
• Phase stationaire Pendant un certain temps,
  dépendant des bactéries, leur croissance stagne.
  Parmi les facteurs responsables, on distingue la
  production de substances inhibitrices, le manque
  de nutriments et la mort de cellules.
• Phase de déclin Le taux de morts dans la
  population exède le taux de reproduction. Elles
  meurent souvent à cause de manque de nutriments
  et de variations trop élevées de pH dues aux
  déchèts des bactéries elles mêmes. Éventuellement
  toutes les cellules mourront.

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Coloration des bactéries

• Pour colorer les bactéries, on a trouvé sur un
  site web un protocole pour des indicateurs
  colorés.Celui qui promettait le plus était le
• 2-3-5-triphényl chlorure de Tetazolium (TTC) qui
  devient rouge lorsquil est réduit ou si le pH du
  milieu dépasse 6 ou 7.
• Cultures de Bochner. Ce milieu contient un
  buffer pour maintenir le pH constantdonc la
  couleur du colorant est déterminée uniquement par
  son état redox.
• Solution A 2g bacto-agar 7.2g K2HPO4, H2O
  2.4g KH2PO4 400ml H2O
• Solution B 12g bacto-agar 400 ml H2O
• Autoclaver les solutions A B séparement et
  permetre quelles refroidisent. Ajouter à la
  solution B 8ml de TTC à 0.25, 0.8mL de MgSO4 de
  1 mol/L et la source de carbonne. La
  concentration finale des deux solutions mélangées
  devrait se trouver entre 0.2 et 1

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Mathématiques de la croissance bactérienne

• En ce qui concerne laspect mathématique les
  bactéries se reproduisent de façon
  caractéristique par un processus asexué appelé
  fission binaire. Une cellule bactérienne
  individuelle, sous des conditions physiques
  optimales á la croissance, effectue des fonctions
  métaboliques incluent la synthèse de substances
  intracellulaires. La cellule sallonge, et on
  observe un pincement de sa membrane au centre
  finalement une membrane transverse sépare la
  cellule mère en deux cellules filles et le
  processus recommence. Le processus de
  reproduction multiplication progresse de façon
  géométrique une cellule en forme deux, deux en
  forment quatre, quatre en forment huit, huit en
  forment 16, 16 en forment 32 etc. on peut
  associer ceci a une suite géométrique de raison 2
  et de premier terme 1. On obtient ainsi le nombre
  de bactéries en fonction de la génération .
• Le temps requis par les populations pour doubler
  i.e. pour quune bactérie se divise en deux, est
  le temps de génération (G) il peut être calculé
  par la formule suivante
• Dans cette formule n est le nombre de générations
  et t est la durée de la phase exponentielle (cf.
  graphe).
• n peut être déterminé par la formule
  où B est le nombre de bactéries au
  début de lexpérience b est le nombre de
  bactéries á la fin de la phase exponentielle. G
  peut varier énormément en fonction de lespèce

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Croissance aérobie, anaérobie?

• On cherchait à savois si Lactobacillus
  Bullgaricus et Streptococcus thermophilus étaient
  des bactéries aérobies, anaérobies ou si elles
  pouvaient se servir des deux métabolismes et on
  avait mis en place un protocole pour leur étude
  en gélose profonde
• - Aérobies strictes se trouvent uniquement à la
  partie supérieure de la gélose au contact de
  lair.
• - Micro aérophiles se trouvent dans la partie
  supérieure du tube mais à distance de linterface
  de la gélose et de lair.
• - Anaérobies strictes se trouvent dans la
  profondeur du tube.
• - Aéro-anaérobies forment une culture homogène
  sur toute la surface du tube.
• Ceci na pas été fait à cause des raisons
  précédentes mais on a appris que les bactéries du
  yaourt possédaient un régime anaérobie strict

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Que font Lactobacillus Bullgaricus et
Streptococcus thermophilus?

• Lactobacillus Bullgaricus et Streptococcus
  thermophilus métabolisent le lactose ét rejettent
  lacide lactique et les autres molécules donnant
  la texture et le goût caractéristique du yaourt.

Acide lactique
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Autres molécules donnant le goût et la texture au
yaourt
Lactose dont sont dérivées les autres molécules
de cette fiche
Acide acétique
Diacétyl
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Conclusion

• Nous ne sommes pas très contents de notre TPE
  dans la mesure oú on na pas pu faire les
  expériences
• désirées mais on est quand même très contents
  davoir pu essayer de faire un projet que lon ne
  connaissait pas auparavant et que nous ayons pu
  voir de près tous les problêmes trouvés lors de
  mises en culture.
• De plus on a appris beaucoup sur les moisissures
  et les champignons. On sait maintenant la raison
  pour laquelle certains champignons se répandent
  de facon non homogène Les champignons, en se
  développant créent des spores quils libèrent
  autour deux et qui poussent à leur tour. Mais
  les spores libérées en direction de lorigine de
  la culture tombent sur dautres champignons et ne
  peuvent pas de développer, de cette facon on
  observe un disque quasi vide.
• Voir photo suivante.
• Salutations Olivier Burri et Simon Marques

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On observe distinctement des disques oú les
champignons ne sont pas développés. Cest car la
génération qui est tombée à cet endroit na pas
pu se développer à cause de la présence de la
génération précpedente
Olivier Burri Simon Marques