Enzimas de Diagn

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Enzimas de Diagnóstico

• Maria Luiza Gliesch
• Disciplina de Bioquímica
• FFFCMPA

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• O que são
• Enzimas???

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Tipos de enzimas plasmáticas

• Específicas, com papel funcional no plasma e
  presentes em concentrações elevadas. Ex. enzimas
  da coagulação sangüínea (trombina).
• Não específicas, sem papel funcional no plasma e
  presentes em concentrações muito baixas. São
  enzimas intracelulares.

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• Alteração da concentração enzimática no plasma,
  urina ou outros fluidos

Pode ser conseqüência de dano tecidual Por quê?
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(No Transcript)
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• A medida da atividade dessas enzimas é muito
  importante para o diagnóstico e tratamento de
  diversas doenças.

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Como medir?Utilizar propriedades
ópticas do NAD,NADP e FAD. De acordo com a
absorçãoe não absorção de luz em
determinadocomprimento de onda.

• Unidades
• U ou U.I - unidade catalítica internacional.
  enzima que catalisa a conversão 1 ? mol de
  substrato por min. (U/L ou mU/L)
• Katal - enzima que catalisa a conversão de 1
  mol de substrato por segundo (mol/s)

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Desvantagens

• Enzimas têm pouca especificidade para determinado
  tipo de tecido ou de célula.
• Enzimas presentes em um ou poucos tecidos ?
  diagnóstico específico Enzimas em distribuição
  ampla ? diagnóstico limitado
• Considerar o momento em que a amostra é
  analisada. Muito cedo ou muito tarde pode não
  haver alteração na concentração.

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Creatina Quinase - CK

• Catalisa a reação que transfere um fosfato do ATP
  para a creatina, formando creatina fosfato, uma
  forma mais estável de estocar energia.

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Creatina Quinase - CK

• Músculo esquelético e cardíaco, principalmente.
• A molécula é um dímero com dois monômeros, M e B,
  formando três isoenzimas
• BB - cérebro (CK1)
• MB - coração (CK2) (20)
• MM - músculo esquelético (CK3) (99)

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Creatina Quinase - CK

• Atividade normal da CK no plasma lt 90 IU/L
• Primeira enzima a aparecer no plasma em altas
  concentrações após um infarto do miocárdio e a
  primeira a retornar a níveis normais (se não
  ocorrerem danos subseqüentes).
• A ausência de uma alteração nos níveis de CK e de
  CK -MB durante os primeiros 2 dias de dor
  torácica exclui praticamente o diagnóstico de
  infarto do miocárdio.

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Creatina Quinase - CK
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Outras causas de aumento da atividade plasmática
da CK

• Insuficiência coronária sem IM
• Trauma, distrofia muscular, injeção
  intramuscular, exercício intenso
• Lesão cerebral com lesão da BHE
• Hipotiroidismo
• Em neonatos - fisiológico

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Lactato Desidrogenase - LD

• Catalisa a oxidação de lactato em piruvato,
  transferindo um hidrogênio do lactato para o
  cofator NAD.

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Lactato Desidrogenase - LD

• Ampla distribuição em tecidos, principalmente no
  fígado, músculo cardíaco e esquelético, rim e
  hemácias.
• Atividade normal da LD no plasma 125 - 290 U/L

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Lactato Desidrogenase - LD

• A molécula é um tetrâmero com dois monômeros H e
  M, formando 5 isoenzimas conhecidas
• HHHH (LD1) músculo cardíaco, hemácias e rim.
• MHHH (LD2) músculo cardíaco
• MMHH (LD3) pulmão e outros tecidos
• MMMH (LD4) vários tecidos
• MMMM (LD5) músculo esquelético e fígado

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Lactato Desidrogenase - LD

• Baixa especificidade nos tecidos
• Atividade plasmática aumenta em diversas
  patologias.

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Lactato Desidrogenase - LD

• No IM a atividade de LD aumenta após a CK e se
  mantém elevada por 7 a 10 dias. LD1 e LD2 são as
  mais rápidas (24 - 48h) a aumentarem.
• A combinação de CKMB elevada e a taxa de
  isoenzimas da LD alterada em um paciente com
  suspeita de ter sofrido um IM confirma o
  diagnóstico.

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Outras causas de aumento da atividade plasmática
da LD

• Doenças do fígado e rins
• Danos no músculo esquelético
• Infarto pulmonar
• Em pacientes com linfoma (tumor maligno do tecido
  linfático), uma alta atividade plasmática de LD
  indica um prognóstico ruim
• Etc...

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Transaminases

• TGO TGP
• Catalisam reações com papel central tanto na
  síntese quanto na degradação de aminoácidos.
• Ponte entre o metabolismo de aminoácidos e
  glicídios.

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Transaminase glutâmico-oxaloacética TGO (AST -
aspartato aminotransferase)

• Após cirurgia ou trauma
• Transfere um grupo amino do aspartato para o
  alfa-cetoglutarato, formando glutamato e
  oxaloacetato.

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TGO

• Presente em praticamente todos tecidos,
  principalmente no fígado e músculo cardíaco.
• Concentração normal da TGO no plasma6-25 U/L

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Causas de aumento da atividade plasmática da TGO

• Doenças hepáticas (dano nos hepatócitos),
  principalmente.
• Infarto do miocárdio
• Pancreatite
• Hemólise
• Neonatos - fisiológico

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(No Transcript)
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Transaminase glutâmico-pirúvica TGP (ALT -
alanina aminotransferase)

• Transfere um grupo amino da alanina para o
  alfa-cetoglutarato, formando glutamato e
  piruvato.

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TGP
Presente principalmente no fígado e sua
concentração nos tecidos não é tão alta quanto a
TGO. Concentração normal da TGP no plasma 3-30
U/L Transaminase mais específica para o fígado e
está elevada na presença de necrose hepatocelular
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Valores de TGO e TGP em doenças hepáticas
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Gama Glutamil transferase (GGT)

• Enzima de membrana
• Transporta aminoácidos do meio extra para o
  intracelular
• Catalisa a reação entre o glutatião e um
  aminoácido, formando gama-glutamil aminoácido e
  cisteína glicina.

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GGT

• Presente em altas concentrações no fígado, rins e
  pâncreas.
• Seu aumento no plasma não indica,
  necessariamente, dano celular, mas um aumento na
  sua síntese dentro das células com extravasamento
  para o plasma durante a renovação celular.
• Ajuda a determinar se uma fosfatase alcalina
  elevada vem do fígado ou dos ossos

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Causas de aumento da atividade plasmática da GGT

• Doenças hepatobiliar, principalmente em doenças
  obstrutivas.
• Fígado alcoólico, mas também em indíviduos com
  uso excessivo de álcool, sem danos no fígado,
  devido à indução de sua síntese.
• Uso de drogas que induzem sua síntese
  (anticonvulsivos, rifampicinatuberculose).
• Pancreatite.

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Ornitina Carbamoiltransferase (OCT)

• Fisiologicamente é encontrada somente no fígado,
  participando no ciclo da uréia.
• ORNITINA CITRULINA
• OCT
• carbamoil - fosfato Pi
• Muito específica para testar funções do fígado.
• Não é muito utilizada.

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Fosfatase Alcalina

• Catalisa hidrólise de fosfato a partir de ésteres
  fosfóricos.
• RO-PO3² H2O ROH HO- PO3²
• Presente principalmente nos ossos, fígado,
  placenta e epitélio intestinal
• Nos ossos essa enzima é secretada pelos
  osteoblastos, portanto seu aumento no plasma
  reflete o aumento da atividade dos osteoblastos.

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Fosfatase alcalina

• Valores normais
• Adultos 20 - 105 U/L
• 0 - 3 meses 70 - 220 U/L
• 3 meses - 10 anos 50 - 256 U/L
• 10 anos - puberdade 60 - 295 U/L
• Observa-se que fisiologicamente a atividade dessa
  enzima aumenta na infância pelo crescimento dos
  ossos.
• Durante a gravidez esse fato também ocorre, pois
  ela está presente na placenta.

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Causas patológicas do aumento da atividade
plasmática da Fosfatase Alcalina

• Osteomalácia e Raquitismo (defeito na
  mineralização da matriz óssea vit.D).
• Doença de Paget (desorganização óssea)
• Colestase
• Cirrose
• Tumor ósseo
• Fraturas

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Fosfatase Ácida

• Catalisa a mesma reação que a fosfatase alcalina,
  mas atua em pH ácido.
• Encontrada na próstata e está elevada no plasma
  em alguns pacientes com metástase de câncer de
  próstata.
• Também está elevada em alguns casos de prostatite
  e hipertrofia prostática benigna

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Fosfatase ácida

• Também está presente nas hemácias, plaquetas,
  ossos,fígado e baço.
• Fosfatase ácida não prostática aumenta em
• doenças ósseas
• Trombocitopenia
• Doença de Gaucher (depósito de lipídios)

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Amilase

• Catalisa a hidrólise do amido e glicogênio.
• Encontrada nas glândulas salivares e pâncreas
  exócrino.
• Utilizada no diagnóstico de pancreatite aguda.

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Causas de aumento da atividade plasmática da
amilase

• Pancreatite aguda
• Úlcera duodenal
• Obstrução intestinal
• Alterações nas glândulas salivares
  (infla-caxumba)
• Outros

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Lipase

• Catalisam a hidrólise dos triglicerídeos.
• Pâncreas é o principal órgão secretor.
• Também é encontrada na mucosa gástrica, células
  intestinais e leucócitos.
• Utilizada no diagnóstico de pancreatite aguda
  (mais específica).

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Visão Geral

• Diagnóstico de Infarto do Miocárdio
• CK, CKMB (na prática), TGO, LD, LD1, LD2
• Diagnóstico de Doenças Hepáticas
• TGO, TGP, GGT, OCT, Fosfatase Alcalina
• Diagnóstico de Osteopatologias
• Fosfatase Alcalina (imagens na prática)

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• Diagnóstico de desordens musculares
• CK, TGO
• Diagnóstico de Pancreatite Aguda
• Amilase, Lipase
• Diagnóstico de Câncer de Próstata Metastático
• Fosfatase ácida

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• ?

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Bibliografia

• Clinical Chemistry A.Kaplan 1995
• Clinical Chemistry W.J.Marshal 1995
• Devlin
• Robbins Patologia Estrutural e Funcional Cotran,
  Kumar, Collins 2000
• Internet