Title: Jako referencn
1Role Th17 bunek u plicní sarkoidózy Fillerová
R1, Kriegová E1, Žurková M2, Kolek V2, Petrek M1
1Laborator imunogenomiky a proteomiky, Ústav
imunologie LF UP Olomouc. 2Klinika respiracní
medicíny LF UP a FN Olomouc
Záver
Cíl Sledování expresních profilu vybraných
cytokinu produkovaných Th17 bunkami, vcetne
jejich aktivátoru a inhibitoru, u plicní
sarkoidózy.
- V BAL bunkách pacientu se sarkoidózou byla
zvýšená mRNA exprese cytokinu IL-21 ve
srovnání s kontrolami, exprese dalších cytokinu
IL-17A, IL-17F a IL-22 produkovaných Th17 bunkami
nebyla zvýšená mezi studovanými skupinami. - Detekovali jsme zvýšené množství transkriptu 4
aktivátoru Th17 bunek ( IL-6, TGF-ß, ROR?t a
IL-23) a 2 inhibitoru Th17 bunek ( IL-27, T-bet)
u sarkoidózy ve srovnání s kontrolními jedinci. - Naše pilotní výsledky naznacují, že Th17 bunky se
nepodílí na iniciaci a rozvoji zánetu u plicní
sarkoidózy. Budeme dále studovat jejich úlohu v
plicích pacientu se sarkoidózou.
Úvod
Výsledky
Plicní sarkoidóza
- Ze 4 sledovaných cytokinu produkovaných Th17
bunkami byla mRNA exprese v BAL bunkách zvýšena u
pacientu se sarkoidózou ve srovnání s kontrolami
pouze u cytokinu IL-21 (p0,001) (Obr.1) - Pri sledování profilu exprese aktivátoru Th17
bunek, byla mRNA exprese u pacientu ve srovnání
s kontrolami zvýšena u IL-6 (p0,0001), ROR?t
(p0,001) IL-23 (p0,0003) a TGF-ß (p0,02)
(Obr.2 a 3) - Dále pri sledování profilu exprese inhibitoru
Th17 bunek, byla mRNA exprese zvýšena u T-bet
(p0,00001) a IL-27 (p0,002) u pacientu ve
srovnání s kontrolami (Obr.4)
- Plicní sarkoidóza je zánetlivé granulomatózní
onemocnení, jehož etiologie je zatím stále
nejasná. - V patogenezi sarkoidózy hrají duležitou roli
CD4 T-lymfocyty, zejména pak bunky Th1 typu a
jejich produkty.
Cytokiny produkované Th17 bunkami
Inhibitory cytokinu produkované Th17 bunkami
Th17 bunky
- Th17 bunky vznikají také diferenciací CD4
T-lymfocytu a podílí se na rozvoji zánetu u rady
onemocnení produkcí specifických cytokinu, které
mohou indukovat expresi dalších molekul (napr.
CXCL9, CXCL10 a CXCL11). - Role Th17 bunek u sarkoidózy je zatím
neobjasnena.
Obr. 4 mRNA exprese inhibitoru cytokinu
produkovaných Th17 bunkami v BAL bunkách pacientu
se sarkoidózou (S) a kontrol (C). Data jsou
prezentována jako prumerné hodnoty relativní
exprese. p lt 0.05
Obr. 1 mRNA exprese cytokinu produkovaných Th17
bunkami v BAL bunkách pacientu se sarkoidózou (S)
a kontrol (C). Data jsou prezentována jako
prumerné hodnoty relativní exprese. p lt 0.05
Diferenciace Th17 bunek
Aktivátory cytokinu produkované Th17 bunkami I
Aktivátory cytokinu produkované Th17 bunkami II
Obr. 2 a 3 mRNA exprese aktivátoru cytokinu
produkovaných Th17 bunkami v BAL bunkách pacientu
se sarkoidózou (S) a kontrol (C). Data jsou
prezentována jako prumerné hodnoty relativní
exprese. p lt 0.05
Immunol Res. 200841(2)88
Merený soubor
Charakteristika merení
- Jako referencní gen byl použit PSMB2 gen
(Kriegova et al. BMC Mol Biol. 2008). - Použité Intron-spanning primery
Assays-on-Demand Gene Expression (Applied
Biosystems) nebo LNA primers/probes (Roche,
Universal Probe Library) - Relativní exprese byla vypocítána metodou druhé
derivace (RotorGene Software 6.1.71, Corbett
Research).
- Pacienti se sarkoidózou (S, n58), (klinické
projevy výskyt granulomu v biopsiích CD4
lymfocytární alveolitida) - Kontrolní jedinci (C, n20) (pacienti bez
infekce s normálním bronchoalveolárním bunecným
profilem)
Studované molekuly
- Cytokiny produkované Th17 bunkami IL-17A,
IL-17F, IL-21, IL-22 - Aktivátory produktu Th17 bunek IL-6, ROR?t,
IL-23, TGF-ß, STAT-3 - Inhibitory produktu Th17 bunek T-bet, IL-27
Metody
- Metodou kvantitativní RT-PCR (RotorGene 3000
system, Corbett Research) byla merena mRNA
exprese studovaných molekul v bunkách
bronchoalveolární laváže (BAL).
Grantová podpora IGA MZCR NR/9037-4,
MSM6198959205., IGA MZCR NS/10267-3.