Laboratorio

1

• Laboratorio Área Tecnología de Producción,
  Ingeniero Carlos Cantera
• Centro de Investigación y Tecnología del Cuero ,
  CITEC
• Campus Tecnológico CIC- INTI cueros
• Camino Centenario y 505, MB Gonnet- La Plata

2
OBJETIVOS

• General Desarrollo de depilado enzimático
• Específico Vulnerar la epidermis del bovino
  para permitir la difusión de preparados
  enzimáticos comerciales.
• Los procesos difusivos, a través de los estratos
  de la epidermis, desempeñan un papel
  preponderante para que las enzimas alcancen más
  rápidamente sus sitios de acción y expresen su
  actividad depilatoria . La epidermis se presenta
  como una barrera a la que es necesario atravesar
  para que las enzimas lleguen a destino .
• Yates, J.R.Studies in depilation. IX. Effect of
  skin thickness and diffusion on the rate of
  depilation of sheepskins, J. Am.Leath.Chem.Ass,
  64, 71-81, 1969

3
Empleo de Microscopía Óptica, Microscopía
Electrónica de Transmisión y Espectroscopía
FT-Raman en el análisis de la epidermis bovina

• En este trabajo se analizaron a escala de
  laboratorio mediante Microscopía óptica,
  Microscopía Electrónica de Transmisión y
  Espectroscopía FT-Raman las modificaciones a
  nivel morfológico y molecular la epidermis del
  bovino luego de exponerla a tratamientos que
  intentan vulnerarla.

4
Reactivos utilizados para vulnerar la barrera
epidermis

• SO3Na2 (sulfitólisis) queratina
• Dodecilsulfato de sodio
• ( SDS) emulsifica lípidos
  intercelulares
• Ensayos preliminares a escala de laboratorio
  evidenciaron que SDSsulfito de sodio
• Tripsina, sobre sustrato epidermis , aumentaban
  la degradación del sustrato
• Cantera, C.S. Goya, L. Galarza , B.Hair saving
  unhairing process. Part 5-Characterization of
  enzymatic preparations applied in soaking and
  unhairing processes J.Soc.Leath.Tech.Chem.2003
  87 69-77.

5
epidermis
6
Foto 3
7
Foto 4
8
Foto 5
9
(No Transcript)
10
(No Transcript)
11
Microscopía Óptica 22 horas

• MICROSCOPÍA ÓPTICA
• SO3Na2 SDS 5 horas
• Preparado enzimático comercial derivado de
  proteasas animales ( tripsina)Proteasa alcalina
  17 horas
• Coloración Tricrómica
• Control

12
Microscopía Electrónica de Transmisión MET5
horas

• MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA DE TRANSMISIÓN
• SO3Na2 SDS

2 horas
Preparado enzimático comercial ( proteasa de
origen animal , tripsina )
3 horas
sulfito de sodio 1,23g/l Se encontró separación
entre lámina basal y capa basal del epitelio .
13
Corte semifino, Azul de toluidina Sulfito de
sodio 1,23g/l 2h preparado enzimático comercial
de origen pancreático 3h.
14
N
ML/13/06 SULFITO
M-
1
N
M-
N
N
1



LM
Estrato basal. 1- espacio intercelular N- núcleo.
M- melanosoma. LM- Lámi- na basal espacio
modificado
15
Espectroscopía FT- Raman

• Trozos de piel bovina de 10 cm x 10 cm se
  cubrieron durante 24 horas con
• Terpenos
• Emulsión acuosa a base de surfactantes y
  terpenos
• Buffer de bicarbonato (control)

16
Figura 9
17
Resultados FT- Raman

• los espectros obtenidos en la región entre 2800
  cm-1 a 3050 cm -1 corresponden al espectro
  vibracional de los enlaces C-H mayoritarios en
  la composición lipídica .
• Fue posible adaptar la técnica a pesar de las
  dificultades que presenta la piel del bovino,
  pelos gruesos, espesor del estrato corneo,
  distribución de lípidos intercelulares

18
Conclusiones

• CONCLUSIONES
• FT-Raman fue posible adaptar la técnica a pesar
  de las dificultades que presentaba la piel del
  bovino
• Manto de pelos gruesos
• Espesor del estrato corneo
• Distribución de lípidos intercelulares
• Microscopía Electrónica de Transmisión los
  resultados preliminares demostraron que es una
  herramienta útil para evaluar los pretratamientos
  y tratamientos utilizados para aflojar el pelo
  del bovino

19
(No Transcript)