Prsentation PowerPoint

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Physiopathologie des syndromes myélodysplasiques
transformation leucémique et
apoptose Protocole multicentrique
MUL03009  Coordonnateur Michaëla
Fontenay Département dHématologie, INSERM
U567, Institut Cochin, Université René-Descartes
Paris V Service dHématologie Biologique,
AP-HP, Hôpital Cochin, Paris.
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Les Syndromes Myélodysplasiques
3
Hématopoïèse (érythropoïèse) inefficace Défaut
de croissance des progéniteurs immatures et
apoptose des précurseurs différenciés
CD34 CD38- Thy-1
BFU-E
CFU-E

• Anomalie intrinsèque de la CSH ?

4
Modèle dexpansion in vitro des précurseurs
érythroïdes de SMD à partir des cellules CD34
ASIA
5
Apoptose
40


30


Cellules annexine V ()
20
10
0
3
6
9
12
15
18
jours
Contrôles SMD
6
Sur-expression de Fas FasL
Fas
8


6



RFI

4
2
0
jours
0
3
6
9
12
15
Contrôles SMD
7
FasFc ou FADDdn (transfert lentiviral) inhibe
lapoptose sans bloquer la différenciation
érythroïde
8
FasL
Régulation dexpression de Fas et FasL ?
Fas
FADD/TRADD
Caspase-8
Bax
Cytochrome c
tBid
dATP
Caspase-9
Apaf-1
Implication de la voie mitochondriale ?
Mitochondrie
9
Projet MUL 03009 partie 1
Physiopathologie de lhématopoïèse inefficace
analyses des voies dapoptose
Erythropoïèse inefficace Voie Fas/FasL Voie
mitochondriale Dr. M. FONTENAY Pr. F. DREYFUS
(Cochin)
Granulopoïèse inefficace Méc. de linstabilité
génique Dr. G. KROEMER Pr. P. FENAUX
(IGR/Avicenne)
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Hématopoïèse (érythropoïèse) inefficace Défaut
de croissance des progéniteurs immatures et
apoptose des précurseurs différenciés
BFU-E
CFU-E

• Anomalie extrinsèque de la CSH
• Rôle des cellules accessoires NK, stroma ?

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Projet MUL 03009 partie 2
Biologie des cellules  accessoires 
Cellules NK Phénotype et fonction Dr. J-J.
KILADJIAN Dr. A. CAIGNARD (IGR/Avicenne)
La cellules souche mésenchymateuse Caractérisation
et fonction Dr. A. TURHAN (IGR)
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Transformation leucémique Augmentation du
potentiel prolifératif des progéniteurs immatures
et résistance à lapoptose

• 20 à 40 de mutations activatrices de N-ras
• Augmentation dexpression de Bcl-2

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Nras-V12
In vitro dans les CD34 humaines Dysérythropoïèse
sans leucémie
In vivo dans les progéniteurs murins
Syndrome myéloprolifératif sans transformation
en leucémie aiguë
McKenzie et al, Blood, 1999
Darley et al, J Exp Med, 1997
Détection des mutations activatrices (codons 12
et 61) de N-ras et autres
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Voies dActivation de Ras
RTK
Seconds Messagers DAG, Ca2
Grb 2
SOS
PI3K/Akt Ral GDS Raf-1
RasGDP
RasGTP
ERK1/2
AF-6
15
Activation de la protéine Ras (Ras-GTP)

• activation constitutive de la voie PI 3-K
• activation constitutive de la voie ERK1/2
• via Raf-1 et B-Raf (persistance du signal
  dactivation)
• autres cibles RalGDS et AF6

Fusion ALL1/AF6 t (611) Activation dAF6
cible de petites protéines G
In vivo LAM chez lHomme
Détection de Ras-GTP (Méthodes biochimiques)
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Projet MUL 03009 partie 3
Implication des protéines G de la famille Ras
dans la transformation leucémique des
SMD Études rétrospectives cas-témoin Etude
prospective inclusion de 145 patients suivis
pendant 18 mois Investigateur Dr. E. GYAN
(Cochin) Pr. C. PREUDHOMME (Lille) Collaboration
Dr. D. BOWEN (Dundee) Dr. F. PORTEU
(Cochin) Biostatistiques Pr. J. COSTE (Cochin)
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Co-investigateurs

• Centres du GFM
• Lille (B. Quesnel, C. Preudhomme)
• Limoges (D. Bordessoulles, J.Feuillard)
• IGR (V. Ribrag)
• Avicenne (P. Fenaux, F. Cymbalista)
• Cochin (F. Dreyfus, F. Picard)
• Hôtel-Dieu (N. Casadevall)
• Nice (S. Raynaud, L. Legros)

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Logistique

• Binôme clinicien/biologiste.
• ARC de site (recueil des consentements)
• Envoi des prélèvements médullaires (financé)
• Collecte des données clinico-biologiques dans le
  Registre des SMD