Sin ttulo de diapositiva

1
(No Transcript)
2
(No Transcript)
3
(No Transcript)
4
Fig. 1 Espectros de dicroismo circular de los
péptidos ShB (A) y ShBL7E (B) tomados en H2O (1),
TFE (7) y en mezclas H2O/ TFE.
A
B
? 220
?M.R.M. x 10-3 (grado.cm2.dmol-1)
TFE
1
1
7
7
Longitud de onda (nm)
5
Fig. 2 Espectros de FTIR de los péptidos ShB y
ShBL7E tomados en distintos tampones acuosos
efecto de la fuerza iónica (A) y bandas
componentes (B).
A
B
1700
1650
1600
1700
1650
1600
Número de onda, cm-1
6
Fig. 4 Efecto del colato 5 mM (A) y 20 mM (B)
sobre la banda amida I del espectro de FTIR de
los péptidos ShB y ShBL7E. ShB presenta
componentes de estructura b, muy estables a la
temperatura (C).
A
C
100
90
1633/1643 cm-1 ()
1650
1600
1700
80
B
70
60
1650
1600
30
45
60
75
1700
Temperatura, ºC
Número de onda, cm-1
7
(No Transcript)
8
Fig. 6 Efecto de la tripsina sobre la banda
amida I del espectro de FTIR de los péptidos ShB
(A) y ShBL7E (B) en presencia de vesículas de PG
pérdida de los componentes de estructura b.
9
Fig. 7 Banda amida I del espectro de FTIR del
péptido ShB en presencia de vesículas de PG en
distintas situaciones experimentales gran
estabilidad de los componentes de estructura b.
2 n-octil-?- glucopiranósido
1 M NaCl
100 mM EDTA
Control
1700
1650
1600
Número de onda, cm-1
10
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11
(No Transcript)
12
(No Transcript)
13
Fig. 14 El péptido ShB estabiliza la forma
dianiónica del PA.
14
Fig. 15 Inserción del péptido ShB en vesículas
fosfolipídicas aniónicas.
A
6
ShBL7E
4
ShB
?H (Kcal/mol lípido)
DMPA
2
B
ShBL7E
6
4
ShB
DMPG
2
0.00
0.05
0.10
0.15
Razón molar (péptido/lípido)
.
1
0
C
0
8
.
?H/?H0
0
6
.
0
.
4
0
2
.
0
0
.
0
.
0
0
.
1
0
.
2
0
.
3
Razón molar (péptido/lípido)
15
Tabla II Secuencia de aminoácidos de derivados
del péptido ShB (con el extremo C-terminal
amidado) y sus análogos marcados con una sonda
fluorescente.

nombre del
grado de
secuencia del péptido
péptido
marcaje
1
5
10
15
20
1
ShB
M
A
A
V
A
G
L
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
2
ShBL7E
M
A
A
V
A
G
E
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
C
3
ShB-21C
M
A
A
V
A
G
L
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
C
4
ShBL7E-21C
M
A
A
V
A
G
E
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
C-NBD
5
ShB-21C-NBD
89
M
A
A
V
A
G
L
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
C-NBD
6
ShBL7E-21C-NBD
88
M
A
A
V
A
G
E
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
C-Rho
7
ShB-21C-Rho
76
M
A
A
V
A
G
L
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
C-Rho
8
ShBL7E-21C-Rho
73
M
A
A
V
A
G
E
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
C-Pyr
9
ShB-21C-Pyr
75
M
A
A
V
A
G
L
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
C-Pyr
10
ShBL7E-21C-Pyr
94
M
A
A
V
A
G
E
Y
G
L
G
E
D
R
Q
H
R
K
K
Q
16
Fig. 16 La inserción del péptido ShB en la
bicapa aniónica es dependiente del pH.
7
DMPA
6
DMPA ShBL7E
5
?H(Kcal/mol)
4
3
2
DMPA ShB
1
5.0
6.0
7.0
8.0
pH
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(No Transcript)
18
(No Transcript)
19
(No Transcript)
20
(No Transcript)
21
Tabla III Efecto de diferentes péptidos sobre el
curso temporal de la activación e inactivación de
corrientes de K en canales ShB?6-46. La
constante de activación (t1/2) se mide como el
tiempo necesario para alcanzar el 50 de la
amplitud máxima de la corriente a diferentes
potenciales. El valor de la constante de
inactivación (t) se estima ajustando el tramo de
disminución de la corriente a una función
exponencial de caida simple. Media ? desviación
estándar (n).
t1/2 activación (ms)
t1/2 inactivación (ms)
22
(No Transcript)
23
Fig. 33 El péptido ShBY8(P) no se inserta en
vesículas fosfolipídicas.
DMPG
DMPA
7
7
Péptido ShB-Y8(P)
6

6
Péptido ShB-Y8(P)
5
5
D H(Kcal/mol lípido)
D H(Kcal/mol lípido)
4
4
Péptido ShB
Péptido ShB
3
3

2
2
0
,
0
0
0
,
0
4
0
,
0
8
0
,
1
2
0
,
0
0
0
,
0
4
0
,
0
8
0
,
1
2
Razón molar (péptido/PLs)
Razón molar (péptido/PLs)
7
DMPC
Péptido ShB
6


5
D H(Kcal/mol lípido)
Péptido ShB-Y8(P)

4
3
2
0
,
0
0
0
,
0
4
0
,
0
8
0
,
1
2
Razón molar (péptido/PLs)
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