Title: Praktikum - mikrobiologie
1Praktikum - mikrobiologie
2Úkol c.1 Pozorovánà kvasinek v tekutém živném
roztoku
- Materiál cerstvé droždÃ(kvasnice), cukr,
Lugoluv roztok - Pomucky potreby pro mikroskopovánÃ, kádinka,
podložnà a krycà sklÃcka,která musà být vždy
rádne omytá a odmaštená, bunicitá vata, kapátko - Postup práce Do kádinky nalijeme asi 50ml vlažné
vody a pridáme cajovou lžicku cukru a nadrobÃme
malé množstvà kvasnic. VÅ¡e zamÃcháme a necháme
stát pri pokojové teplote asi 15 min. po této
dobe odebereme vzorek suspenze kapátkem,
preneseme jej na podložnà sklÃcko, prikryjeme
krycÃm sklÃckem a pozorujeme preparát objektivy o
postupne zvyÅ¡ujeme zvetÅ¡enà 20x, 40x prÃpadne 60x.
3Definice mikroorganismu
- Mikroorganismy jsou velká a rozruznená skupina
organismu žijÃcÃch samostatne jako jednotlivé
bunky nebo shluky nediferencovaných bunek.
4Mouchy se lÃhnou pouze z much(Larvy much
nevznikajà z masa)
5Nicolas Appert (1810) objev konzervace potravin
na základe Spallanzaniho poznatku
6Systém-3 základnà nadrÃÅ¡e
- Archaebakterie
- Eubakterie
- bakterie
- sinice
- Eukaryota
- houby plÃsne a kvasinky
- rostliny
- živocichové
7Archaebakterie
- extrémnà podmÃnky
- napr. horké sirné prameny, solná jezera,
- nejsou patogennÃ
8Eubakterie
9Živné pudy
- studium mikroorganismu celé populace
- mnohé bakterie auxotrofnà organismy
- agar z ruduchy u JV pobrežà Asie a J Kalifornie
- (panà Hessová, Koch)
- tuhne pri teplote 45
- Šikmé agary živné roztoky na
Petriho miskách
10Bakterie rostou v médiu o vhodném složenÃ
11Požadavky na médium ideálnà médium nejlépe
vyhovujÃcà danému kmeni bakterie
Zdroj energie Zdroj uhlÃku Zdroj
biogennÃch prvku Voda Rustové faktory
12Typy médiÃ
- Minimálnà - chemicky definovaná (bez biologických
extraktu) - Minerálnà - minimálnà médium, pouze z
anorganických komponent a organického zdroje
uhlÃku nebo bez nej (CO2) - Komplexnà - médium obsahujÃcà chemicky presne
nedefinovaný extrakt z biologických materiálu - (napr. silný hovezà vývar pro bakterie)
13Ruzné typy ockovánà na Petriho misky
14Metoda mikrobiologie
Aseptická práce Cisté kultury Sterilizace
15Izolace redenà cisté kultury na misce
Schéma izolace cisté kultury
16Voda z bazénu
17AerobnÃ, anaerobnÃ, fakultativnÃ, mikroaerofilnÃ,
aerotolerantnà organismy
18Rust bakteriálnà bunky
19Nestejnomerné delenà bakteriálnÃch bunek
20Doba zdvojenà organismu (hod)
21Velikost bunek prokaryot a eukaryot
22Tvary bakteriálnÃch bunek
23Tvary bunek ve svetelném mikroskopu
24Tvary bakteriálnÃch kolonÃ
25Dalšà delenà bakterià G a G-(podle typu
bunecné steny)
Grampozitivnà bakteriie
- kolem cytoplazmatické membrány majà jednobunecnou
stenu z peptidoglykanu - Gramovo barvenà modrofialová barva
- Gramnegativnà bakterie
- nad peptidoglykanovou bunecnou stenou majà dalÅ¡Ã
membránovou strukturu - Gramovo barvenà cervená barva
26Diferenciálnà Gramovo barvenÃG(modré) a G-
bunky (ružové) pro srovnánà v jednom preparátu
27Grampozitivnà bakterie
28Gramnegativnà bakterie
29Cetnost bakterià v ruzných prostredÃch
30- Hodnocenà Kvasinková bunka je snadno
pozorovatelná pod mikroskopem. Pri dostatecném
zvetÅ¡enà uvidÃme jednotlivé bunky kulovitého nebo
oválného tvaru i jejich shluky. Pokud je droždÃ
cerstvé mužeme pozorovat i delenà bunek pucenÃm - DalÅ¡Ã pozorovánÃU kvasinek mužeme pozorovat
struktury uvnitr bunky glykogen- zásobnÃ
polysacharid, který nám posloužà k urcenÃ
fyziologického stavu bunky. Preparát si
pripravÃme tak, že na mÃrne zaschlou suspenzi
kvasinek na podložnÃm skle kápneme primerené
množstvà Lugolova roztoku, prikryjeme krycÃm
sklÃckem a pozorujeme. V jednotlivých kvasinkách
uvidÃme zretelne odliÅ¡ené cervenohnedé cásti
obsahujÃcà glykogen a prÃtomné bÃlkoviny budou
zbarveny žlute. Kvasinky v dobrém fyziologickém
stavu-tedy mladé bunky obsahujà vÃce bÃlkovin-
uvidÃme je tedy žlute. StarÅ¡Ã kvasinky majÃ
naopak vÃce glykogenu a proto jsou uvnitr
hnedocervené
31Kvasinky saccharomyces cerevisae
32Tvary kolonià kvasinek
33Úkol c.2. Pozorovánà bakterià trvalé preparáty
- Pomucky mikroskop, pomucky k mikroskopovanÃ, TP
- Postup práce Pod mikroskopem pozorujte ruzné
tvary bakterià a zakreslete do sešitu. - Dále pozorujte G a G- bakterie.