CITODIAGNSTICO

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CITODIAGNÓSTICO EN SÍNDROMES MIELODISPLÁSICOS
Mónica Romero Riquelme 5 de febrero de 2009
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Introducción

• Los SMD son una enfermedad clonal heterogénea
• Características displasia, citopenias,
  hemato-poyesis ineficaz, alto riesgo de evolución
  a leucemia aguda
• Edad media al diagnóstico 70 años
• Variada
• Importancia fundamental del citodiagnóstico

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Concepto de SMD
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Concepto de CRSI
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Indices pronósticos
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Indices pronósticos
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Indices pronósticos
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Indices pronósticos
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Criterios de respuesta
10
Criterios de respuesta
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Valoración de la displasia

• Fundamental para el diagnóstico
• Evaluar en cada línea celular
• Evaluar en SP y MO ( cuantitativa y cualitativa)
• Calidad de la muestra
• frotis sin anticoagulante. Si no es posibleEDTA
• realizar extensiones en máximo 2 horas

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Diseritropoyesis

• Valorar 100 eritroblastos
• Mayor o 10 eritroblastos dismórficos
  displasia eritroide OMS
• Sangre periférica anisocitosis punteado
  basófilo cuerpos Howell-Jolly anillos Cabot

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Diseritropoyesis

• Médula ósea
• Alteraciones nucleares multinuclearidad
  picnosis puentes internucleares irregularidad
  del contorno nuclear hiperlobulación nuclear

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Diseritropoyesis

• Médula ósea
• Alteraciones citoplasmáticas vacuolización
  citoplasmática puentes intercitoplasmáticos
  punteado basófilo disrelación núcleo/citoplasma
  distribución irregular de la hemoglobina
• PAS positividad de eritroblastos
• Tinción de Perls sideroblastos anillados gt o
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• Alteraciones de mayor grado puentes
  internuclares multinuclearidad PAS
  sideroblastos anillados

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Disgranulopoyesis

• Valorar 200 células ( mejor SP)
• Mayor o 10 granulocitos dismórficos
  displasia granulocítica OMS
• Alteraciones nucleares bisegmentación (pseudo
  Pelger-Huet) hiposegmentación nuclear
  hipersegmentación nuclear clumping cromatínico
  apéndices nucleares

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Disgranulopoyesis

• Alteraciones citoplasmáticas hipogranulación
  asincronismo madurativo granulación tóxica
  granulación pseudo-Chediak cuerpos de Dohle
  bastones de Auer

• Gold standard granulocitos hipolobulados
  agranulares

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Distrombopoyesis

• Mayor 0 10 megacariocitos dismórficos
  displasia megacariocítica OMS
• Sangre periférica macroplaquetas (pseudo
  Bernard Soulier) plaquetas hipogranuladas (
  plaquetas grises) plaquetas agranuladas (
  plaquetas azules)

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Distrombopoyesis

• Valorar 30 megacariocitos
• Médula ósea megacariocitos monolobulados
  asincronismo madurativo núcleos dispersos
  micromegacariocitos mononucleados (núcleo
  excéntrico y redondo)

• Alteraciones de mayor grado micromegacariocitos
  mononucleados, megacariocitos hipolobulados
  agrupación de micromegacariocitos

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Clasificación OMS 2001
Clasificación OMS 2008
Clasificación FAB 1982
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Novedades OMS 2008

• Nueva categoría citopenia refractaria con
  displasia unilínea AR, NR y TR
• Definición de sideroblastos anillados 5 o
  gránulos, ubicación perinuclear
• Mejor definición de SMSI

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Citopenia refractaria con displasia unilínea -
anemia refractaria
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Citopenia refractaria con displasia unilínea
neutropenia refractaria

• Recuento neutrófilos lt 1800 cels/ mm 3
• Displasia granulocítica gt o 10
• Blastos en SP lt 1
• Blastos en MO lt 5

Citopenia refractaria con displasia unilínea
trombopenia refractaria

• Recuento plaquetar lt 100.000 / mm3
• Displasia megacariocítica gt o 10
• Blastos en SP lt 1
• Blastos en MO lt 5

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AR con sideroblastos anillados
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Citopenia refractaria con displasia multilínea
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AREB TIPO 1 Y 2
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Síndrome 5q-
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SMD no clasificable

• 2001
• Concepto mal definido
• Incluía neutropenia o trombopenia refractaria
• No de displasia

• 2008
• Sangre periférica citopenia(s) blastos lt o 1
• Médula ósea MO hipercelular displasia lt 10
  en 1 ó más líneas mieloides y una citogenética
  alterada presunta de SMD blastos MO lt5
  displasia unilínea con pancitopenia pacientes
  con CRDU o CRDM pero 1 de blastos en SP
• Incidencia desconocida, pronóstico no establecido

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SMD-formas especiales

• SMD hipocelular
• MO hipocelular desde el diagnóstico, gral AR o
  AREB
• 5-10 de los SMD de novo, gt relacionados a
  tratamiento
• Mayor frecuencia en mujeres, gt evolución a LMA
• Diagnóstico diferencial más importante anemia
  aplásica
• Importancia de la biopsia de MO y tipaje de
  blastos con CD34

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SMD-formas especiales

• SMD CON FIBROSIS O HIPERFIBRÓTICO
• 10-20 SMD de novo, gt SMD relacionados a
  tratamiento
• Sangre periférica citopenia(s), escasos
  dacriocitos y leucoeritorblastosis escasa
• MO Fibrosis principalmente reticulínica
  displasia de al menos 2 líneas mieloidesMO
  hipercelular, con importante proliferación de
  megacariocitos
• Diagnóstico diferencial SAMPC LMA-M7
  panmielosis aguda con fibrosis. Importancia CD34
  CD117 MPO
• Citogenética alteraciones frecuentes y
  cariotipo complejo
• Pronóstico desfavorable

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SMD-formas especiales

• SMD CON CORRELACIÓN CLÍNICO/CITOGENÉTICA
• 1. Anomalías del cromosoma 17 (17p-) o
  i(17)(q20). Alteración p53
• 1-5 de los SMD. Características de SMD y SMPC
• Disgranulopoyesis hipolobulación núcleo
  abundantes y pequeñas vacuolas citoplasmáticas
  abundancia de monocitos y macrófagos aumento de
  blastos
• Elevado riesgo de transformación a leucemia
  aguda
• 2. Anomalías del cromosoma 3 inv(3)(q21q26)
  t(3,5)(q25q33) t(3,3)(q21q26). Alteración EVI1
• 2 de los SMD,gt relacionados a tratamiento
• Aumento de blastos plaquetas N o aumentadas
  dismegacariopoyesis ( micromegacariocitos)

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SMD-formas especiales

• SMD CON CORRELACIÓN CLÍNICO/CITOGENÉTICA
• 3. Anomalías del cromosoma 7 -7 y 7q-
• Dismegariocitopoyesis ( micromegacariocitos muy
  dismórficos)
• Infecciones graves
• Evolución desfavorable

• SMD con eosinofilia
• 7 de los SMD
• Mayor frecuencia en hombres
• Aumento de blastos
• Eosinófilos atípicos ( formas nucleares
  irregulares granulación pseudobasófila
  vacuolización citoplasmática ) gt o 5 en MO

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SMD secundario

• Pronóstico desfavorable
• 50 con MO hipocelular y/o fibrótica al
  diagnóstico
• Acentuada inmadurez de las líneas
  hematopoyéticas
• Secundaria a agentes alquilantes
• Aparición a los 5 10 años del tratamiento, con
  displasia multilínea
• Leucemización más frecuente a LMA M1-M2 FAB
• Anomalías genéticas de cromosomas 7 y 5
• Resistencia total a terapia
• Secundaria a inhidores de topoisomerasa II
• Aparición 2 3 años del tratamiento
• Leucemización más frecuente a LMA M4-M5
• Alteraciones genéticas balanceadas 11q23, 21q22
• Respuesta parcial a quimioterapia

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SMD infantil

• Muy infrecuente, lt 5 neoplasias hematológicas
  en lt 14 años
• Mayor frecuencia de MO hipocelular, menor
  frecuencia de SMD bajo riesgo
• OMS 2008
• Citopenia refractaria de la infancia
• citopenia persistente blastos en MO lt 5 y en
  SP lt 2, displasia en al menos 10 de la serie
  comprometida o rasgos displásicos en 2 o más
  líneas mieloides.
• Infrecuentes sideroblastos anillados. 75 MO
  hipocelular, gran valor diagnóstico de la biopsia
  ( clusters de precursores eritroides inmaduros,
  micromegacariocitos)
• Monosomía 7 alteración genética más frecuente

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Morfología en SMD
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Morfología en SMD
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(No Transcript)
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Citogenética en SMD

• 50 alteraciones genéticas en SMD
• Perfil genética característico alteraciones no
  balanceadas (pérdida de material genético)
  inactivación de genes supresores
• Importancia pronóstico (IPSS) 3 grupos
• Riesgo favorable cariotipo normal del(5q)-Y
  del(20q)
• Riesgo intermedio 8, lt 3 alteraciones
  cromosómicas
• Riesgo desfavorable cariotipo complejo 7-
• Cariotipo normal 50
• Alteraciones más frecuentes
• Del(5q) aislada banda más afectada q31,
  frecuencia 16-28
• Alteraciones cromosoma 7 11-26
• Trisomía 8 8-10

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• Tipo y condiciones de la muestra elección MO.
  SP si blastos 10-20 tubo heparina y volumen 1-3
  mL tº ambiente no más de 24 horas cultivos
  cortos ( 24-48 hrs)
• Cariotipo-Metafases a analizar 20 ISCN2005
• FISH no reemplaza cariotipo.
• Indicación imprescindible al diagnóstico,
  escasas o nulas metafases o cromosomas de pobre
  calidad.
• Tejido de elección MO
• Núcleos a examinar 200
• Sondas imprescindibles 5q31 cen7 7q31, cen8
• Sondas opcionales 20q p53(17p13) cromosoma Y

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Citogenética en SMD
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(No Transcript)
41
(No Transcript)
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Inmunofenotipo en SMD
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(No Transcript)
44
(No Transcript)
45
(No Transcript)
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Sindromes mielodisplásicos/mieloproliferativos

• Leucemia mielomonocítica crónica
• Leucemia mieloide crónica atípica, BCR/ABL
  negativa
• Leucemia mielomonocítica juvenil
• Sindrome mielodisplásico/mieloproliferativo no
  clasificable

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• Leucemia mielomonocítica crónica
• Monocitosis persistente en SP gt 1x109/L
• Ausencia de cromosoma Ph o gen de fusión BCR/ABL
  o reordenamiento PDGFRA o PDGFRB
• lt 20 blastos (mieloblastos,monoblastos,promonoci
  tos) en SP y MO
• Displasia en una o más líneas mieloides
• Si displasia ausente o mínima uno de los
  siguientes alteración clonal citogenética o
  molecular adquirida, monocitosis persistente por
  al menos 3 meses, excluir causas de monocitosis
• Subtipos
• LMMC-1 blastos lt5 SP lt10 MO
• LMMC-2 blastos 5-19 SP,10-19 MO o bastones
  Auer con lt 20 blastos
• LMMC-eosinofilia eosinófilos gt1,5x109/L

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• Leucemia mieloide crónica atípica BCR/ABL neg
• Leucocitosis en SP gt o 13 x109/L, debido a
  aumento de neutrófilos y sus precursores, con
  prominente disgranulopoyesis
• Ausencia de cromosoma Ph o gen de fusión BCR/ABL
  o de reordenamiento PDGFRA o PDGFRB
• Precursores neutrófilos (promielocitos,mielocitos
  ,metamielocitos) gt o 10 de los leucocitos
• Basófilos lt 2 de los leucocitos
• Monocitos lt10 de los leucocitos
• MO hipercelular, con proliferación y displasia
  granulocítica, con o sin displasia en serie
  eritroide y megacariocítica
• Blastos en SP y MO lt 20

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• Leucemia mielomonocítica juvenil
• Monocitosis SP gt 1x109/L
• Blastos (incluídos promonocitos) lt 20 en SP y
  MO
• Ausencia de cromosoma Ph o del gen de fusión
  BCR/ABL
• Dos o más de los siguientes
• Hemoglobina F aumentada para la edad
• Granulocitos inmaduros en SP
• Leucocitos gt 10x109/L
• Alteración cromosómica clonal ( por ej
  monosomía7)
• Hipersensibilidad a GM-CSF de progenitores
  mieloides in vitro

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• Sindrome mielodisplásico/mieloproliferativo
• no clasificable
• Presencia de datos clínicos, morfológicos y de
  laboratorio de una de las categorías de SMD con
  lt20 de blastos en SP y MO
• rasgos mieloproliferativos prominentes
• ausencia de SMD o SMPC previo, ausencia de
  tratamiento reciente con citostáticos o factores
  de crecimiento. Ausencia de cromosoma Ph o del
  gen de fusión BCR/ABL o del reordenamiento PDGFRA
  o PDGFRB o FGFR1, ausencia de del(5q),
  t(3,3)(q21q26) o inv(3)(q21q26)
• o el paciente tiene rasgos de SMD y SMPC que no
  puede ser asignado a ninguna categoría de éstos
  (RARS-T)

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CITODIAGNÓSTICO EN SÍNDROMES MIELODISPLÁSICOS
Mónica Romero Riquelme 5 de febrero de 2009