ENTEROBACTERIACEAE

1
ENTEROBACTERIACEAE

• Eschericha coli

2
Generalidades

• Bacilos Gram negativos
• Aislamientos bacterianos recuperados con más
  frecuencia de muestras clínicas.
• Distribuidos ampliamente en la naturaleza SUELO,
  AGUA, PLANTAS

3
ENTEROBACTERIAS

• son colonizadores normales del tracto intestinal
  de seres humanos y animales
• No se encuentran normalmente en sitios
  corporales fuera del tracto gastrointestinal

4
Generalidades

• Pueden estar relacionados con cualquier tipo de
  enfermedad infecciosa, en particular sistema
  genito urinario.
• Individuos con compromisos en las barreras
  anatómicas normales.
• Heridas traumáticas contaminadas, insiciones
  abdominales
• ocurre infección por estas bacterias
• neumonía, septicemia, meningitis o formación de
  abscesos.

5
DIARREA Y DISENTERÍA
6
Generalidades

• Pacientes inmunocomprometidos o debilitados son
  altamente susceptibles a infecciones adquiridas
  en hospitales
• se hallan estos m.o. entre las causas
  principales de infecciones intrahospitalarias

7
ENTEROBACTERIAS

• Estas bacterias constituyen el 80 de las cepas
  GN aisladas en laboratorios clínicos y la mitad
  de las clínicamente significativas

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Endotoxina

• LPS
• porción variable externa de CH ESPECIFICIDAD
  ANTIGÉNICA.
• Estructura interna de polisacáridos que es
  estructuralmente similar entre especies.
• Una porción lipídica central LIPIDO A ALTAMENTE
  CONSERVADA

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SEPSIS GRAM NEGATIVOS

• FIEBRE
• LEUCOPENIA
• HEMORRAGIA CAPILAR
• HIPOTENSIÓN
• COLAPSO CIRCULATORIO
• LIPIDO A altamente antigénico con determinantes
  comunes a todas las cepas de bacterias Gram
  negativas.

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PLASMIDO

• Resistencia antimicrobianos.
• betalactamasas

11
CARACTERISTICA PARA UNA IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA

• GRAM
• cel bacilares y cocobacilares.
• Gram negativos cortos y gordos
• 0.5 a 2 um de ancho a 2 a 4 um de largo

12
CARACTERISTICA PARA UNA IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA

• Características morfológicas de las colonias
• Mucoides o secas
• relativamente grandes
• color gris a opacas en agar sangre.
• La hemòlisis es variable y no es distintiva

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CARACTERISTICA PARA UNA IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA

• Fenòmeno de onda
• mòvil

14
CARACTERISTICA PARA UNA IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA

• Colonias rojas en agar Mac conkey o brillo
  metálico en EMB.
• presencia o ausencia de enzimas codificadas por
  el cromosoma bacteriano.

15
(No Transcript)
16
CARACTERISTICA PARA UNA IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA

• Las enzimas dirigen el matabolismo microbiano que
  pueden ser detectados por la utilización de
  medios de cultivo.
• Perfil bioquimico características metabólicas.

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CARACTERISTICAS DE REVELAMIENTO

• IDENTIFICACION DEFINITIVA p. bioquimicas
• Con pocas excepciones, todos los miembros de
  Enterobacteriaceae demuestran las siguientes
  características
• Fermentación de glucosa con producción de ácido,
  con o sin gas
• Citocromo oxidasa negativo
• Reducción de nitrato a nitrito

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UTILIZACIÓN DE LOS HIDRATOS DE CARBONO

• FERMENTACION entorno anaerobio.
• Compuesto orgánico aceptor de electrones.
• En pruebas bacteriológicas el proceso se detecta
  por la observación de cambio de color de los
  indicadores de pH como consecuencia de la
  formación de ácidos

19
fermentación
Proceso metabólico de oxido-reducción que tiene
lugar en un entorno anaeróbico, en el que el
sustrato orgánico sirve como aceptor final de
hidrógenos (electrones) en lugar de
oxigeno Fermentadores de lactosa o no
fermentadores de lactosa Se detecta por cambio de
color del indicador de pH como consecuencia de la
formación de productos ácidos
20
(No Transcript)
21
ROJO DE METILO
22
VIA BUTILENGLICOLICA Klebsiella ,Hafnia, Serratia
23
metabolismo

• Algunas especies bacterianas producen CO2.
• microorganismos que producen cantidades
  abundantes de CO2

• FORMACION DE ALCOHOL ETILICO

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FERMENTACIÓN DE LA LACTOSA( glu-gal)

• ES MÁS COMPLEJA QUE LA GLUCOSA.
• UNIDO POR UN ENLACE GALACTOSIDO.
• BETA GALACTOSIDO PERMEASA
• BETA GALACTOSIDASA

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FERMENTADORES DE LA LACTOSA TARDIOS

• Son microorganismos que exhiben actividad beta
  galactosidasa pero muestra baja actividad beta
  galactosido permeasa.
• PRUEBA ONPG( orto Nitrofenil B-D galactosido)
  SIMILAR A la lactosa solo que la glucosa ha sido
  remplazada por un grupo o nitrofenilo

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MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS PARA LA DETECCIÓN
DE FERMENTACIÓN DE HC

• FERMENTACION DE LA GLUCOSA
• la ausencia de fermentación excluye a cualquier
  microorganismo de pertenecer a la familia
  Enterobacteriaceae

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Medios para recuperación de Enterobacterias

• Medios no selectivos para aislamiento primario.
  Ej AGAR SANGRE
• AGAR SELECTIVO Y DIFERENCIAL.

28
Medios para recuperación de Enterobacterias
XLD
29
CALDOS DE ENRIQUECIMIENTO

• CALDO SELENITO
• CALDO Gram negativos

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Indicaciones para la elecciòn de medios de
aislamiento selectivos

• Inocular la muestra directamente en placas de
  agar Mac conkey o EMB para aislamiento primario
  de todas las especies de bacilos entericos Gram
  negativos

• Inocular directamente o en placas de agar XLD O
  HE para INVESTIGAR salmonella- Shigella.
• Enriquecer una pequeña porción de la muestra en
  caldo selenito o Gram negativos

31
(No Transcript)
32
(No Transcript)
33
Estructura antigénica

• Antígenos somáticos O (LPS)
• Antígenos capsulares K
• Antígenos Flagelares H
• Flagelos (H)
• Cadenas laterales (O)
• del LPS
• Cápsula (K) CAPSULA
• (antígeno K)
• LPS (endotoxina, antígeno O)

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Factores de virulencia

• Factores de virulencia
• Adhesinas PILIS O FIMBRAS inhiben la capacidad
  de ser fagocitado.
• Endotoxina
• Cápsula Variación de fase antigénica
• Exotoxina-enterotoxinas
• Supervivencia y multiplicación dentro de la
  célula
• Secuestro de factores de crecimiento
  aerobactina
• Resistencia a los antimicrobianos

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Clasificacion Enterobacteriaceae

• TRIBU I
• Escherichieae
• TRIBU II
• Edwarsielleae
• Tribu III
• Salmonella
• TRIBU IV
• Citrobactereae

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Escherichia coli

• Escherichia coli, infecciones diarreicas
• Es el m.o. más común causantes de diarreas.
• Existen cinco variedades patógenas y c/u de ellas
  presenta un mecanismo distinto de producir la
  enfermedad.
• Escherichia coli se clasifican por las
  características de sus propiedades de virulencia.
• Las propiedades de adherencia a las células
  epiteliales de los intestinos grueso y delgado
  son codificados por genes presentes en
  plasmidios.
• Con frecuencia las toxinas son mediadas por
  plasmidios o por fagos

37
Escherichia coli

• Existen 5 especies pertenecientes al género
  Escherichia, de
• estas sobresale Escherichia coli por su
  importancia clínica.
• Constituyente de la microbiota normal
• Algunas cepas tienen la capacidad de producir
  cuadros
• diarreicos
• Existen 5 grupos, los cuales desarrollan
  síndromes díarreicos
• Escherichia coli enterohemorragica ECEH
• Escherichia coli enterotoxigénica ECET
• Escherichia coli enteroinvasora ECEI
• Escherichia coli enteropatogéniaca ECEP
• Escherichia coli enteroagregativa ECEA

38
Enfermedad Diarreica Aguda
39
Enfermedad Diarreica Aguda

• Presencia de deposiciones líquidas o acuosas,
  generalmente en número mayor a tres en 24 horas
  y con duración inferior a los 14 días.

40
Enfermedad Diarreica Aguda

• La Enfermedad Diarreica Aguda a nivel mundial
  ocasiona la muerte de aproximadamente 4 a 6
  millones de personas cada año, siendo una de las
  patologías que en niños menores de 5 años
  ocasiona alrededor de 800.000 casos.

41
Tipos de Diarrea

• Diarrea secretora
• Diarrea tipo osmótico
• Diarrea exudativa o inflamatoria

42
Escherichia coli
43
Diarrea toxígena o secretora
44
Diarrea invasiva o inflamatoria
45
Diarrea Osmótica
Acortamiento en vellosidades Hipertrofia de
criptas

• Agente etiológico
• Rota virus
• Virus Norwalk

Mala absorción
Fiebre, vòmito, diarrea Deshidratación
leve Ausencia de PMN en heces
46
PATOGENIA
47
Tipos de diarrea según la clínica
48
Escherichia coli productores de diarrea
Tipo F. Virulencia Mecanismo
Enterotoxigénico (ETEC) Enterohemorrágico (ECEH) Enteroinvasivo (ECEI) Enteropatógeno (ECCEP) Enteroagregativo (ECEAg) Enterotoxinas (TS y TL) Toxinas ? Shiga I y II Enterotoxina enteroinvasora Pili Fimbrias enterotoxinas Activación AGC I. síntesis proteínas Invasión celular Adherencia localizada Adherencia agregativa
49
Microorganismo Lugar de acción Enfermedad
Patogenia

• Microorganismo Lugar de acción Enfermedad
  Patogenia
• ECET.
• Intestino delgado
• Diarrea del viajero.
• diarrea infantil en países subdesarrollados.
• diarrea acuosa
• retorcijones
• Nàuseas.
• Enterotoxinas termoestables ST y/o termolabiles
  LT
• NO dañan el epitelio de la mucosa.
• estimula la actividad guanilato o
  adenilatociclasa con perdida de líquidos y
  electrólitos.

GANGLIÒSIDOS AUMENTA LOS NIVELES DE AMPC
50
Cuadro Clínico

• diarrea acuosa, fiebre, dolor abdominal,
  retorcijones.
• corta evolución (3-4 d)
• sin sangre, moco o pus, fiebre inhabitual, muy
  ocasionalmente se manifiesta como un cuadro
  semejante al cólera.

51
Mecanismo Patogénico

• la gastroenteritis es mediada por la presencia de
  enterotoxina Termolabil(LT) y termoestable (ST)
• colonización de la mucosa intestinal mediada por
  fimbrias
• Las toxinas incrementan la concentración
  intracelular de monofosfato cíclico, e inhiben la
  absorción de cloruro sódico, lo que induce a una
  secreción intestinal neta

52
Mecanismo Patogénico

• Dosis infectante alta 108 UFC.
• agua o alimentos contaminados con heces
• Unión superficial de las células bacterianas a
  las células del epitelio intestinal como
  prerrequisito para la producción de la toxina.

53
Tratamiento

• Una vez presente la diarrea el uso de
  antibióticos reduce la duración
• Con Trimetoprima-sulfametoxazol o con
  fluoroquinona se trata la diarrea
• del viajero

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Esquema patogénico de ECET

• fimbrias
• ECET
• Liberación de enterotoxinas LT o ST

55
SEROTIPOS DE Escherichia coli

• 06
• 08
• 015
• 020
• 025
• 027
• 063
• 078

• 080
• 085
• 092
• 0115
• 0128ac
• 0139
• 0148
• 0153
• 0167

56
Escherichia coli enteroinvasiva

• ECEI
• UNION A LA MUCOSA DEL COLON- INVASION DE LA
  MUCOSA Y LA LÀMINA PROPIA
• Fiebre
• retorcijones,
• diarrea acuosa seguida por cuadro disentérico con
  heces sanguinolentas escasas
• Invasión y destrucción de las células epiteliales
  que tapizan el colòn.

57
Escherichia coli enteroinvasiva, ECEI

• Invaden la célula huésped y provocan una
  respuesta inflamatoria significativa en la mucosa
  intestinal.
• La infección es más común en niños, en países
  en vías de desarrollo, población susceptible
  toda
• Mecanismo Patogénico
• Invasión y multiplicación en células
  epiteliales del intestino ulceración superficial.
• Dosis infectante 104-105 ufc
• Tratamiento
• Reposición hídrica
• El uso de antibióticos no es necesario en casos
  graves Trimetropinasulfametoxazol
• o cefalosporina de tercera generación

58
serogrupos

• 028ac
• 029
• 011
• 0124
• 0136
• 0143
• 0144
• 0152
• 0164

59
Cuadro Clínico

• Disentería, dolor abdominal, retorcijones,
  frecuentes deposiciones de poco volumen, tenesmo
  doloroso, diarrea acuosa en sus inicios.
• se continua con evacuación intestinal con sangre,
  moco y pus.
• leucocitos en las heces, diarrea sanguinolenta

60
Escherichia coli Enteropatogena

• ECEP
• Intestino delgado
• Diarrea infantil( MENORES DE 1 AÑO) con fiebre,
  nauseas, vómitos,
• heces sin sangre
• Adherencia y destrucción de las células
  epiteliales mediadas por plàsmidios

61
Escherichia coli enteropatogénico, ECEP

• No produce toxinas, no es invasiva
• Restringido a cierto número de serotipos O55B5,
  O86B6
• Agente importante de diarrea en lactantes, en
  países en vías de desarrollo Diarrea infantil.
• Localización de la infección intestino delgado

62
Cuadro Clínico

• dolor abdominal, diarrea acuosa con moco, fiebre
  leve, generalmente de evolución prolongada.
• Es la primera causa bacteriana de diarrea y
  deshidratación en menores de un año.

63
Mecanismo Patogénico

• Adherencia localizada a nivel de las membranas
  enterocìticas.
• No se adhieren en forma uniforme.
• Pili tipo iv al epitelio.
• Forman microcolonias diferenciadas.
• colonización de la mucosa por genes plasmidiales
  (bfp)

64
Mecanismo Patogénico

• Hacen que los niveles de calcio dentro de la
  célula aumenten y los micro vellosidades
  desaparezcan.
• Adhesina intimina favorece una fuerte adherencia
  .
• Proliferación de actina filamentosa debajo de
  cada bacteria ADHERIDA
• formación de unión en pedestal mediada por gen
  cromosomal eae,
• Produce lesión histológica característica.
• CIERTO GRADO DE PENETRACIÒN
• El mecanismo de producción de la diarrea se
  debe por la alteración en el transporte de iones
  y por la mala absorción debido a la alteración de
  la microvellosidad

65
Epidemiología

• Es una causa importante de diarrea en los países
  en vías
• desarrollo
• Transmisión fecal-oral, mediante contaminación de
  manos,
• alimentos, leche, fomites
• Dosis infectante 105 ufc
• Reservorio niños con infeción asintomática o
  sintomáticas
• Colastro y leche materna protegen contra ECEP
• Tratamiento
• Pevenir y cortar la deshidratación
• el uso de antibióticos puede acortar duración de
  la diarrea
• cotrimoxazol,neomicina por 5 días

66
Modelo de la adherencia de EPEC a
célulasepiteliales y formación de la lesión A/E

• Adherencia inicial a
• microvellosidades
• mediada por BFP
• Transducción de
• señales mediada por
• proteinas secretadas
• por EPEC, codificadas
• por LEE
• Adherencia intima
• mediada por intimina,

67
Lesión en pedestal
68
serogrupos

• 055
• 086
• 0111
• 0119
• 0126
• 0127
• 0128ab
• 0142

69
Escherichia coli enteropatogena
70
Escherichia coli enterohemorragico, ECEH

• Es la unica categoria zoonotica heces de
  bovinos, amplio reservorio en animales carne mal
  cocida.
• Serotipos O157H7, O26H11
• produce una toxina similar a la shiga (SLT),
  también llamada verotoxina
• Población susceptible toda
• Cuadro Clínico
• Varia desde diarrea leve sin complicaciones,
  hasta colitis hemorrágica
• con dolor abdominal intenso, diarrea
  sanguinolenta y fiebre escasa o
• nula, vómitos
• Periodo de incubación de 3 a 4 días, el cuadro
  se puede prolongar por
• 4 a 10 días
• DOSIS INFECTANTE MUY BAJA 100- 200
• El síndrome hemolítico urémico se asocia a este
  m.o., esta enfermedad
• puede producir insuficiencia renal aguda

71
Escherichia coli Enterohemorragica

• ECEH
• Diarrea hemorrágica con retorcijones intensos,
• diarrea acuosa al principio, seguida por heces
  teñidas con sangre.
• fiebre escasa o nula
• síndrome urémico hemolítico (SHU)
• Mediada por verotoxina
• Citotóxica bloquea la sintesis de proteìnas

72
Escherichia coli Enterohemorragica

• Los microorganismos se adhieren a las células del
  colon y producen verotoxinas.
• Ausencia de PMN en heces.

73
VEROTOXINAS

• VEROTOXINA 1 toxina shiga
• Subunidad A y B se enlaza con globotriaosilceramid
  a Gb3 y permite que la subunidad a entre a la
  cèlula.
• BLOQUEANDO LA SINTESIS PROTEÌCA
• VEROTOXINA 2
• SUH

74
Tratamiento

• Corrección del trastorno hidroelectrico y manejo
  de las complicaciones.
• Uso de los antibioticos es controvertido
• Se debe educar a la población

75
enterohemorragia

• Asociado con colitis hemorragia y sindrome
  urèmico hemolìtico.
• Colitis
• CLAMBRES ABDOMINALES
• DIARREA ACUOSA
• DESCARGA HEMORRAGICA

• NO HAY FIEBRE NI CELULAS INFLAMATORIAS EN MATERIA
  FECAL.
• SUH
• daño renal agudo
• Trombocitopenia
• Anemia hemolìca

76
Escherichia coli enteroagregativa

• ECEAg
• Intestino delgado Diarrea infantil
• persistente, a veces teñidas con sangre,
• fiebre ligera
• Adherencia agregativa MEDIADA POR PILIS FORMANDO
  MACIZOS.
• No invasivas
• mediada por plasmido 60
• MDa

77
Escherichia coli enteroagregativa
Diarrea secretora aguda que suele ser mucoide, no
GR O6, O8, O25, O111, O119 y O142.
78
Bacterias productoras de toxinas entéricas
Neurotoxinas Enterotoxinas Citotoxina
C.botulinum S.aureus B.cereus V.cholerae y spp E.coli Salmonella spp Shigella dysenteriae B.cereus C.perfringens Shigella spp S.aureus E.coli C.yeyuni C.difficile C.perfringens
79
FISIOPATOLOGIA DE LA DIARREA

• La diarrea ocurre cuando hay un desequilibrio
  entre la absorción y secreción intestinal de
  líquidos como consecuencia aumenta el volumen y
  consistencia de las deposiciones

80
TIPOS DE INFECCIONES ENTERICAS
MECANISMO No Inflamatorio Diarrea Secretora Inflamatorio Penetración
ALTERACION FISIOLOGICA Acción de Enterotoxinas que originan un desbalance entre el fluido bidireccional entre el agua y los electrolitos Destrucción Inflamatoria de la mucosa del íleo o del colon Penetración a través de la mucosa intacta al sistema retículo endotelial
LOCALIZACION Intestino Delgado Proximal Colon Intestino Delgado Distal
MANIFESTACION Diarrea Acuosa Disentería Fiebre entérica
EXAMEN DE MATERIA FECAL No leucocitos fecales Leucocitos Fecales PMN Leucocitos Fecales MN
EJEMPLOS Vibrium cholereae ECET Bacillus cereus S. aureus Shigella ECEI ECEH Salmonella typhi Y. enterocolitica
81
FACTORES DEL MICROOORGANISMO

• Adhesión
• CFA (Factor antigénico de colonización) ECET
• BFP (Pili formador de paquetes) ECEP
• Producción de Toxinas
• Neurotoxinas
• Staphylococcus aureus
• Bacillus cereus
• Citotoxinas
• Shigella
• Clostridium perfringes
• Enterotoxinas
• ECET
• Vibrium cholerae
• Otros factores
• Vibrium cholerae Mucinasa

82
ENTEROBACTERIAS

• Las Enterobacterias son un vasto grupo
  heterogeneo de bacilos Gramnegativos cuyo habitat
  natural es el intestino de humanos y animales.
• Esta Familia incluye muchos generos entre los
  que se encuentran Escherichia, Shigella,
  Salmonella, Enterobacter, Klebsiella, Serratia,
  Proteus.
• Las Enterobacterias fermentan una amplia
  variedad de carbohidratos, poseen una estructura
  antigenica compleja y producen varias toxinas y
  otros factores de virulencia.

83
ENTEROBACTERIAS

• La Familia Enterobacteriaceae muestra las
  siguientes caracteristicas
• Son Bacilos Gramnegativos dotados de motilidad
  por flagelos peritricos o carentes de motilidad.
• Crece en condiciones aerobias y anaerobias (son
  anaerobios facultativos).
• Fermentan la glucosa en vez de oxidarla y con
  frecuencia producen gas.
• Son catalasa positiva, oxidasa negativa y
  reducen el nitrato a nitrito.
• Crecen facilmente en medios comunes.
• En cuanto a la identificacion presuntiva rapida
  que hay para los generos de las bacterias
  entericas Gram-negativas tenemos
• FERMENTADORES Escherichia, Enterobacter,
  Klebsiella NO
  FERMENTADORES Salmonella , Proteus
  FERMENTADORES LENTOS Citrobacter,
  Serratia

84
Escherichia spp

• Esta bacteria puede presentarse tanto como um
  agente primario como secundario.
• Las muestras utilizadas a nivel de avicultura
  son los sacos aéreos, hígado, bazo, corazón,
  pericardio, MO, articulaciones, saco vitelino
  (pollitos).
• Mas del 90 de las E. coli aisladas son
  positivas para ß-glucoronidasa con el empleo del
  sustrato 4-metilumbeliferil-B-glucoronido (MUG),
  caracteristicas claves en el momento de la
  identificacion.

Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli
CIT - TSI A/A LIA K/K URE - RM VP - MAL - IND MOT GAS H2S -
Escherichia vulneris Escherichia vulneris Escherichia vulneris Escherichia vulneris Escherichia vulneris Escherichia vulneris Escherichia vulneris Escherichia vulneris Escherichia vulneris Escherichia vulneris
CIT - TSI A/A LIA K/K URE - RM VP - MAL - IND - MOT GAS- H2S -
85
BATERIA Escherichia coli
86
BATERIA Escherichia vulneris
87
E. coli EN CHROMOCULT
88
E. coli EN XLT4
89
BRILLO METALICO E. coli EN EMB
90
BACTERIA FERMENTADORA