Enterobacteriaceae ailesinin genel

1
ENTEROBACTERIACEAE GENEL ÖZELLIKLER
PROF.DR. MEHMET TEKEREKOGLU
2

• OLGU
• 7 yasinda kiz çocugu, üç hafta öncesine kadar
  saglikli.
• Kendisini hep yorgun hissetmeye basliyor.
• Ates 38C ve sag dizinin altinda duyarlilik
  mevcut.
• Hemoglobin 10.2, BK 9600, nötrofil hakimiyeti
  var.
• Periferik yaymada oraklasma egilimi mevcut.
• Kan kültüründe gram negatif çomaklar üremistir.

3

• Tani
• Salmonella osteomyeliti. Orak hücreli anemi
  Salmonella türlerinin yaptigi osteomyelite
  yatkinlik yaratir. Anormal sekildeki orak
  hücreler kemigin ince kapillerlerini tikamakta ve
  mikroinfarktlara neden olmaktadir. Bu
  mikroinfarktlar salmonella infeksiyonuna zemin
  hazirlar.

4

• Enterobacreiaceae ait mikroorganizmalar, klinik
  örneklerden en sik izole edilen bakteri grubudur.
• Bu bakteriler
• Tüm üriner sistem infeksiyonlarinin 70
• Tüm sepsislerin 30-35inden sorumludur.

5

• Biyokimyasal özelliklerine, antijenik
  yapilarina, nükleik asit hibridizasyonu ve
  sekanlarina göre siniflandirilmis 40dan fazla
  cins ve 150den fazla türe sahiptirler

6

• Dogada, toprakta, sularda, bitkilerde bulunurlar.
• Insan ve hayvanlarin normal flora üyesidirler.
• Çok genis bir familya olmalarina karsin
• insanlarda hastalik yapan tür sayisi 20 kadardir.

7
Siklikla hastalik etkeni olanlar

• Citrobacter freundii, Citrobacter koseri
• Enterobacter aerogenes, Enterobacter cloacae
• Escherichia coli
• Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca
• Morganella morganii
• Proteus mirabilis, Proteus vulgaris
• Salmonella enterica
• Serratia marcescens
• Shigella sonnei, Shigella flexneri
• Yersinia pestis, Yersinia enterocolitica,
  Yersinia pseudotuberculosis

8
(No Transcript)
9
(No Transcript)
10
(No Transcript)
11

• Tümü gram negatif basildirler.
• 4-5 mikron boyundadirlar, Spor olusturmazlar

Gram stain of Salmonella typhi from a positive
blood culture. Note the intense staining at the
ends of the bacteria. This "bipolar staining" is
characteristic of the Enterobacteriaceae.
Escherichia coli stained to demonstrate
peritrichous flagella
12
Hücre Morfolojileri
13

• Flagellari ile haraketlidirler.
• Sadece Klebsiella ve Shigella haraketsizdir.

14
(No Transcript)
15
Flagella H antijeni özelligi gösteren kamçi
proteinidir. Escherichia ve Salmonella gibi
sadece kamçili organizmalar H antijenine
sahiptir. Klebsiella ve Shigella gibi haraketsiz
olanlarda bu antijen bulunmaz. Isiya duyarli bir
antijendir.
16

• Hücre duvar antijeni (somatik veya O antijeni)
  lipopolisakkaritin dis polisakkarit bölümüdür.
• 15-20 kez yinelenmis 3 veya 4 sekerden olusan
  oligosakkaritlerden olusmustur.
• Bir çok tür, O somatik antijenlerine göre
  serolojik olarak tiplendirilirler.

17
Lipopolisakkarit

• Serbest LPS, endotoksin adini alir. Serbest
  kaldiginda memeli hücreleri için toksik etki
  gösterir
• Fizyolojik etkileri
• Ates indüksiyonu (pirojeniktirler)
• Lökosit Sayisinda degisiklik
• Kan damarlarinda dilatasyon ve ödem
• Tümör nekrozu
• Kan basincinda düsme ve sok.
• Dissemine intravasküler koagülasyon
• Yüksek konsantrasyonlarda ölüm.

18

• Kapsüler veya K polisakkarit antijeni.
• Klebsiella gibi yogun kapsülü bulunan
  organizmalarda özellikle belirgindir.
• K antijeni özgün antiserumlarla gösterdigi
  kapsül sismesi reaksiyonu ile tiplendirilir.
• Tifonun nedeni olan S. typhide buna Vi
  (virulans) antijeni adi verilir.

19

• Enterobacteriaceae ailesinin tümü
• Oksidaz negatiftirler.
• Glikozu fermente eder.
• Fakültatif anaeropturlar.
• Enerji üretim süreçlerinde nitratlari nitritlere
  indirgerler.

20

• Üremek için zengin besiyerlerine ihtiyaç
  duymazlar. Genel besiyerlerinde üreyebilirler.
  18-24 satte türe özgü koloni olusturarak ürerler.

21
Proteus
E. coli
22
Kullanilan Besiyerleri ve Koloni Özellikleri

• XLD.(Xylose Lysine Deoxycholate)
• Mikoorganizmalarin ksiloz, laktoz, sükroz
  üzerine etkisini, lizini dekarboksile etme
  özelliklerini ve H2S olusturup olusturmadiklarini
  incelemeye yarar.

23
Kullanilan Besiyerleri ve Koloni Özellikleri

• XLD (Xylose Lysine Deoxycholate)
• Fenol kirmizisi indikatördür.
• Laktozu parçalayanlar sari renkli koloni,
• Salmonellalar ortasi siyah pembe-kirmizi koloni
• Shigellalar renksiz koloni yaparlar.

24
Kullanilan Besiyerleri ve Koloni Özellikleri

• MacConkey Agar
• Seçici-ayirdedici besiyeridir.
• Tek karbonhidrat laktozdur.
• Kristal viyole ve safra tuzlari gr ()
  bakterilerin üremesini inhibe eder.
• Indikatörü nötral kirmizisidir.
• Laktozu fermente edenler Escherichia,
  Klebsiella, Enterobacter MacConkey de kirmizi
  renk verirler.

25
Kullanilan Besiyerleri ve Koloni Özellikleri

• EMB
• Eozin ve metilen blue gr () bakteri üremesini
  önler. Laktoz ve sükroz içerir.
• Laktozu fermente eden Escherichia, Klebsiella ve
  Enterobacter EMBde yesil-siyah metalik renk
  verirler.

26

• Familya içindeki türler kendilerine özgü
  biyokimyasal özelliklerine bakilarak
  tanimlanirlar.
• Bu özellikleri bakteri kromozomunda bulunan
  genler tarafindan belirlenir. Örnegin
• Laktozu fermente edenler E. coli, Klebsiella,
  Enterobacter, Citrobacter, Serratia
• Laktozu fermente edemeyenler Salmonella,
  Shigella, Proteus, Yersinia
• Laktozu fermente edebilecek enzimlere sahip ancak
  laktozu hücre içine alamayan türlerde laktoz
  negatif sonuç alinabilir. Bu durumda enzimin
  varligini gösterebilecek ortonitrofenil beta
  D-galaktopiranosid (ONPG) testi yapilir.

27

• Laktoz (-)
• Salmonella
• Shigella
• Proteus
• Serratia
• Yersinia
• Morganella
• Edwardsiella

Laktoz () Escherichia coli Enterobacter
Klebsiella Citrobacter Serratia Hafnia Provid
encia Geç fermentasyon 24 sa.
28

• Üç Seker-Demir Agari (TSI triple sugar iron)
• Bu vasatin önemli yapitasi ferrosülfat ve 3
  sekerdir (glukoz, laktoz,sükroz)

• Laktoz (veya sükroz) fermente olursa büyük
  miktarda asit çikar ve hem dik hem de yatik kisim
  fenol kirmizisini sari renge dönüstürür.
• Laktoz fermente olmuyorsa az miktarda (1/10)
  glikoz fermente oluyorsa oksijence fakir dik
  kisim sari olacak, yatik kisimda ise olusan asit
  organizma tarafinda alkali aminlere
  çevrildiginden kirmizi (nötral) kalacak.

Laktoz ve glikoz kullanilmiyorsa her iki kisimda
kirmizi kalacak. H2S üretiliyorsa ferrosülfidin
siyah rengi görülür.
29
(No Transcript)
30

• Familyadaki tüm bakteriler glikozu fermente
  ederler. Ancak fermantasyon sirasinda
  kullandiklari enzimler ve son ürünler farklidir.

METIL RED TESTI Bakteri asit üretmis ise
besiyerinin pHsi 4,4e kadar düser. Metil red
indikatörünün damlatilmasi ile kirmizi renk
degisimi olur. E.coli, Shigella, Edwersiella,
Salmonella, Citrobacter türlerinde pozitif
VOGES PROSKAUER TESTI Glikozun fermentatif
parçalanmasi esnasinda pyruvic acid, bir kisim
bakterilerde bulunan enzimatik sistemlerle
(butilen glikol yolu) daha ileriye dogru
parçalanarak asetil metil karbinol (asetoin)
olustururlar. Klebsiella, Enterobacter, Hafnia ve
Serratia pozitif
31
METIL RED TESTI
VOGES PROSKAUER TESTI
32

• Salmonella ve Proteus gibi bazi cinsler hidrojen
  sülfür olustururlar.

33
Indol Besiyeri ve Indol Deneyi Basta
Enterobacteriaceaeler olmak üzere birçok
bakterinin triptofonaz enzimleri ile triptofandan
indol olusturduklarinin arastirilmasi temeline
dayanir. Pozitif kontrol E.coli Negatif kontrol
K.pneumoniae
34

• Üre besiyeri ve üreaz deneyi
• Bu besiyerinin önemli bilesenleri üre ve pH
  belirteci olan fenol kirmizisidir. Organizmanin
  üreaz enzimi varsa üre NH4 ve CO2e hidroliz
  olur. Amonyak besiyerini alkali yapar ve fenol
  kirmizisinin rengi açik portakaldan kirmizimtrak
  menekseye döner. Proteus ve Klebsiella.

35

• Sitrat besiyeri ve Sitrat deneyi
• Sitratlari tek karbon kaynagi olarak kullanma
  yetenegindeki bakterilerin incelenmesinde
  kullanilir.
• Incelenecek bakteri besiyerinin yüzeyine az
  miktarda ekilir. 35 derecede 24-48 saat
  bekletilir.
• Sitrati kullanarak üreyen bakteriler prusya
  mavisi renk olustururlar.
• Pozitif kontrol E.aerogenes
• Negatif kontrol E.coli

36
HAREKET
37

• Ayrica direkt olarak veya reagent eklenmesi
  sonucu bakteriyel enzimler tarafindan renkli veya
  floresan veren hidroliz ürünlerine dönüstürülen
  bilesikler kullanilabilir.

Api 20E - Identification System for
Enterobacteriaceae
38
(No Transcript)
39
TESEKKÜRLER