Title: Terapia celular en distrofias musculares
1Terapia celular en distrofias musculares
- Jordi Díaz-Manera
- Unidad de Enfermedades Neuromusculares
- Hospital de la Santa Creu i Sant Pau
- Barcelona
2Introducción-Definiciones
- Terapia celular
- Pretende substituir el tejido enfermo por un
tejido nuevo de donante sano que aporta las
proteínas deficitarias causantes de la
enfermedad. - Terapia génica
- Pretende minimizar los efectos de mutaciones
génicas a través de el aporte de un gen nuevo
sano o a través de la corrección de la mutación
patogénica.
3Terapia celular
- Qué es una célula madre?
- Célula con capacidad de autorenovación
- Capacidad de diferenciación a uno o más tejidos
- Tipos
- Totipotencial capaz de producir un organismo
completo tres líneas embrionarias germinal
tejidos extraembrionarios. - Pluripotencial capaz de producir tres líneas
embrionarias - Multipotencial una única línea embrionaria
- Unipotencial un único tipo celular.
4Célula madre ideal
- Fácilmente obtenible desde tejido adulto.
- Expansión in vitro.
- Estabilidad celular tras la proliferación.
- Liberación sistémica sencilla
- Alta tasa de colonización muscular.
- Alta capacidad miogénica in vivo
5Cómo reparar el músculo esquelético?
- El músculo esquelético tiene per se una
importante capacidad regenerativa. - Fibras musculares son un sincitio celular formado
por cientos de núcleos. - 1961, Mauro
- Observa la presencia de células mononucleadas
bajo la lámina basal y por fuera de la membrana
muscular. - Las denomina Células Satélite (SC).
Mauro A, J Byophis Biochem Cytol 1961
6Cómo reparar el músculo esquelético?
- Células hematopoiéticas
- Células endoteliales
- Pericitos
- Células intersticiales
Tedesco S, JCI 2010
7Células satélite
- También conocidas como mioblastos
- SC participan en diversos procesos
- Regeneración muscular
- Crecimiento muscular postnatal
- Originadas a partir de los somitos, sin embargo
no se conoce con exactitud el progenitor directo
de esta célula.
Mauro A, J Byophis Biochem Cytol 1961
8(No Transcript)
9(No Transcript)
10Células satélite
Shi X, Genes Dev 2006
11- Niño de 9 años, Duchenne
- Inyección local en EDB
- 8x106 mioblastos
- Donante padre legal
- Ciclosporina
- IH y WB a los 92 días demuestran la presencia de
distrofina
12Tedesco S, JCI 2010
13Skuk, D JNEN 2006
14No se produjeron cambios funcionales
significativos
Mendell, NEJM 1995
15Mioblastos-ventajas
- Facilidad de obtención.
- Rápido crecimiento in vitro.
- Gran volumen celular fácilmente obtenible.
- Alta tasa de diferenciamiento a músculo
esquelético.
16Mioblastos-desventajas
- Inyección intramuscular obligatoria.
Skuk, D JNEN 2006
17Mioblastos-desventajas
- Muerte celular post-trasplante
Día 0
Día 2
Fan, MN 1996
18Mioblastos-desventajas
- Reacción inmunitaria contra donante
19Médula ósea C57/MLacZ
Inyección im
Scid/bg tratado con CTX
Fibras musculares regenerativas LacZ
201 semana
2 semanas
Médula ósea C57/MLacZ
Trasplante m.o.
Scid/bg
Lesión muscular con cardiotoxina
3 semanas
Fibras musculares regenerativas LacZ
21- Ratón mdx4cv Stop codon exón 53
- Trasplante proveniente de C57 en 15 ratones de 8
semanas de edad - Sacrificio de los ratones, desde 9 semanas hasta
10 meses post trasplante - Recuento de fibras 0,23
- RT-PCR confirmaba lt1 expresión
- Sin cambios clínicos significativos
22- Varón. 6 meses SCID asociado a X
- Trasplante proveniente de su padre.
- 12 años, hiperckemia de 8000
- Gowers, pseudohipertrofia pantorrillas,
- Delección exón 45 gen distrofina
- Presencia de fibras distrofina en el músculo
del paciente
23Celulas madre mesenquimales
- Originadas a partir de mesodermo
- Capacidad de diferenciación a
- Tejido adiposo
- Tejido óseo
- Tejido cartilaginoso
- Músculo liso
- Músculo esquelético
- Músculo cardíaco
24Celulas madre mesenquimales
25Tejido obtenido desde liposucción
26Inyección intramuscular hMADS
gt 90 expresión distrofina 6 meses
27MADs
- Facilidad de obtención.
- Rápido crecimiento in vitro.
- Gran volumen celular fácilmente obtenible.
- Alta tasa de diferenciamiento a músculo
esquelético en experimentos animales.
28Ensayos clínicos en activo con MADs
- Estudios en cardiopatía isquémica
- Estudio APOLLO-1
- Fase I en pacientes con IAM agudo
- Autotransplante de hMADs
- Estudio PRECISE-01
- Fase I en pacientes con infartos no
revascularizables - Autotrasplante de hMADs
- Inyección directa en pared ventricular.
29Mesoangioblastos (MABs)
- Célula madre de origen mesenquimal
- Descritas a finales de los años 90
- Localizadas inicialmente en la pared dorsal de
la aorta embrionaria de diversas especies - Descritas posteriormente en músculo esquelético
adulto de perros, ratones y humanos.
30M-caderina ALP Laminina
31(No Transcript)
32gt50 fibras expresaban a-distroglicano
33(No Transcript)
34(No Transcript)
35Ensayos clínicos en activo con MABs
- Pacientes con Distrofia Muscular Duchenne
- Giulio Cossu, coordinador
- 3 pacientes con DMD 5-14 años de edad
- Estudio Fase-I
- Inyección intramuscular APB donante emparentado
- Tratamiento con tacrolimus
- Evaluación seguridad
- Duración 6 meses.
36Ensayos clínicos en activo con MABs
- Pacientes con Distrofia Muscular Duchenne
- Fase II del estudio
- Inicio primavera 2011
- 3 pacientes con DMD
- Inyección intraarterial cels de donante
emparentado - Mes 0 1x108 cels arteria femoral
- Mes 2 2x108 cels misma arteria femoral
- Mes 4 6x108 cels subclavias, aorta descendente,
femoral - Mes 6 6x108 cels subclavias, aorta descendente,
femoral
37Gracias por su atención