Microscopa Confocal

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Microscopía Confocal

• Principios Básicos

2
En qué rango del espectro se usaun microscopio
confocal?
3
Espectro de Radiación Electromagnética
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Tipos de microscopio confocal

• Transmisión
• Reflexión
• Fluorescencia
• En aplicaciones biológicas se usa
  fundamentalmente el de Fluorescencia

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Fluorescencia
Fluorescencia Molecular es la emisión óptica
desde moléculas que han sido excitadas a un nivel
de energía superior por absorción de radiación
electromagnética

• La excitación de un fluoróforo es un proceso muy
  rápido (10-15 segundos).
• Los electrones permanecen en el estado excitado
  aproximadamente 10-8 segundos
• Asumiendo que todo el exceso de energía no se
  pierda en colisiones con otras moléculas, el
  electrón retorna a su estado basal emitiendo la
  energía sobrante, que es SIEMPRE de longitud de
  onda mayor (menor energía).

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Espectros de Excitación y Emisióndiferentes
colorantes fluorescentes
7
Cómo funciona un microscopio Confocal?
8
Comparición Fluorescencia vs. Confocal
Filtro de Excitación
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Principales Ventajas de un Microscopio Confocal

• Imagen nítida
• (siempre en foco)
• Secciones Ópticas
• Imágenes 3D
• Imágenes de muestras vivas ( no destructivo)
• Interacciones Moleculares, Colocalización
  Molecular

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Qué forma tiene un Confocal ?
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Bio-Rad MRC 1024
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LSM Meta
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(No Transcript)
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(No Transcript)