Diapositiva 1

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Immunologia
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Reazione Antigene-Anticorpo
Immunocomplesso reazione dellantigene con il
corrispondente anticorpo con formazione di un
complesso tenuto insieme da legame chimico , non
covalente che si forma tra i residui
amminoacidici dellAg (antigene) e quelli del
sito combinato dellanticorpo.

• Tipi di legame
• Legame idrogeno atomo di idrogeno è condiviso
  da due atomi elettronegativi
• Legame elettrostatici attrazione di carice
  elettriche di segno opposto
• Forze di Van der Waals movimento degli
  elettroni di una molecola che la inducono a
  comportarsi in maniera temporanea come un dipolo
  , attraendole molecole vicine
• Legami idrofobici determinati quando una
  molecola idrofobica si trova in acqua. Le
  molecole idrofobiche si aggregano per evitare il
  solvente.

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Reazione Antigene-Anticorpo

• Fattori che influenzano limmunocomplesso
• Ph del mezzo
• forza ionica
• concentrazione dei due reagenti

Affinita somma algebrica delle forze attrattive
e repulsive tra antigene ed anticorpo
Avidità insieme delle forze dinterazione tra i
singoli siti combinatori dellanticorpo e
lantigene
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Immunoprecipitazione
Rappresenta la formazione di un complesso
tridimensionale detto lattice che determina un
precipitato visibile. Può essere utilizzata sia
in modo qualitativo che quantitativo
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Precipitazione quantitativa
Si ottiene facendo reagire quantità costanti di
anticorpo con quantità crescenti dantigene. La
precipitazione è dovuta alla formazione di un
reticolo di molecole antigene-anticorpo.

• Se riportiamo su coordinate cartesiane la
  quantità di precipitato in funzione della
  concentrazione crescente dantigene, otterremo un
  curva in cui è possibile individuare tre zone
• zona deccesso dellanticorpo qui è inibita la
  precipitazione si ha un eccesso di anticorpo nel
  solvente
• zona di equivalenza qui la precipitazione è
  massima
• zona deccesso dellantigene qui si ha
  linibizione della precipitazione si ha un
  eccesso di antigene nel solvente

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Reazione di precipitazione
Le reazioni di precipitazione sono utilizzate per
evidenziare la presenza dellantigene oppure
dellanticorpo. Vengono utilizzati reazioni in
mezzi semisolidi (agar)
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Immunodiffusione doppia

• Metodo di Ouchterlony viene utilizzato per la
  determinazione qualitativa tra gli antigeni,
  ossia se essi sono identici o se hanno in comune
  alcuni epitopi od al contrario se sono diversi .
  Il metodo consiste
• Si stratifica lagar in capsule petri
• Si praticano un determinato numero di pozzetti
  rotondi ad una determinata distanza gli uni dagli
  altri
• Si aggiungono nei pozzetti adiacenti lantigene o
  lanticorpo e si lasciano diffondere luno verso
  laltro
• Si effettua la lettura

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Immunodiffusione doppia

• Se gli antigeni sono identici si forma una
  linea continua del precipitato

• Se gli antigeni sono diversi si hanno due
  linee di precipitato che si incrociano

• Se lantigene A possiede degli epitopi in
  comune con lantigene B si forma una linea di
  precipitato non continua

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Immunodiffusione radiale
Viene detto anche metodo di Mancini . Usato per
la determinazione quantitativa dei livelli delle
immunoglobuline e dei componenti del complemento
presenti sia nel siero che in altri liquidi.

• Il metodo consiste
• Stratificare lagar in cui è stato aggiunto un
  antisiero specifico in piastre di petri
• Si effettuano dei pozzetti
• Si aggiunge lantigene
• Lantigene diffondendo dà origine ad un alone di
  precipitazione
• Il diametro dellalone è proporzionale alla
  concentrazione dellantigene

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Immunoelettroforesi
Metodo utilizzato per lanalisi delle proteine
del siero . Essa si basa su una reazione di
precipitazione preceduta da una migrazione
elettroforetica del siero.

• Il metodo si basa
• Si stratifica lagar su un vetrino porta oggetto
  
• Si crea un pozzetto in cui si pone il siero da
  esaminare
• Si applica un campo elettrico
• Le proteine migreranno secondo la loro carica
  elettrica e la loro mobilità
• Separate le proteine si pratica un altro
  pozzetto parallelo al senso di migrazione e vi si
  aggiunge lantisiero
• Si lascia diffondere lantisiero
• Nella zona di incontro tra antigene ed anticorpo
  si forma la banda di precipitazione

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Western Blot ( Immunoblot )
Questo metodo viene utilizzato per identificare e
caratterizzare gli Ag sia nella ricerca sia nella
clinica.

• Il metodo consiste nel
• Separare gli antigeni attraverso lutilizzo di
  un gel di poliacrilammide
• Trasferire il gel su una membrana di
  nitrocellulosa
• Aggiungere un anticorpo specifico per lAg
  ricercato marcato con un marcatore enzimatico
• Lanticorpo si collocherà solo dove la reazione
  sarà avvenuta permettendo di analizzare con
  facilità la quantità e la presenza dellAg
• In alternativa può essere utilizzato un
  anticorpo marcato con un tracciante radioattivo.

12
Western Blot ( Immunoblot )
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Agglutinazione
Linterazione tra un anticorpo e un antigene
corpuscolato ( presente su batteri, eritrociti,
leucociti, ecc) determina la formazione di
aggregati visibili, definita agglutinazione.
Lanticorpi in questo caso prenderanno il nome
di agglutinine.

• Possiamo distinguere
• agglutinazione batterica per individuare la
  presenza nel siero di anticorpi specifici contro
  i batteri
• agglutinazione passiva per individuare
  anticorpi specifici contro antigeni solubili (
  proteici, polisaccaridi , apteni ) adsorbiti a
  biglie di lattice ,usate come matrici per la
  reazione di agglutinazione
• titolo anticorpale del siero serve a
  valutare la quantità di anticorpo presente in un
  antisiero

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Titolo anticorpale del siero

• Modalità di esecuzione
• si aggiunge ad una serie di provette un ugual
  volume di danticorpo a diluizione crescente
• si aggiunge una quantità costante di antigene
  corpuscolato
• si lascia incubare e si attende lagglutinazione
  
• lultima reazione in cui avviene
  lagglutinazione viene chiamata titolo del siero
• nella prima fase lanticorpo si lega agli
  antigeni situati nella membrana delle cellule
• nella seconda le cellule rivestite
  dallanticorpo si legano luna con laltra
  formando aggregati tridimensionali.

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Inibizione dellagglutinazione
E un saggio altamente sensibile per evidenziare
piccole quantità di Ag ( es. droghe) oppure per
determinare se un soggetto è stato esposto ad
alcuni virus che causano lagglutinazione dei
globuli rossi ( es. rosolia , influenza, ecc)
In pratica se nel siero del paziente sono
presenti Ab contro un virus , essi reagiranno con
questo, quindi il virus non sarà più in grado di
agglutinare i globuli rossi aggiunti in un
secondo momento
Le reazioni dagglutinazione sono utilizzate
anche per determinare i gruppi sanguigni di un
paziente (emoagglutinazione) oppure per ricercare
un anticorpo legato ad un antigene ( test di
Coombs).
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Emoagglutinazione
Viene utilizzata per determinare il gruppo
sanguigno utilizzando anticorpi anti-A, anti-B,
anti-AB
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Test di Coombs

• Si basa sullutilizzo del siero di Coombs, ossia
  lutilizzo di gammaglobuline eterologhe
  (anti-immunoglobuline) ottenute immunizzando un
  coniglio o una capra con immunoglobuline umane.
• Si possono distinguere
• Test diretto si esegue per evidenziare gli
  anticorpi incompleti legati alle emazie del
  soggetto ,presenti in seguito a
• malattie emolitiche nel neonato
• anemia emolitica autoimmune
• reazioni trasfusionali
• sensibilizzazione a farmaci
• Test indiretto si esegue per la determinazione
  degli autoanticorpi anti-IgG nel siero del
  paziente in esame. Si ricercano in particolare le
  eventuali emolisine nel sangue materno in caso di
  gravidanza a rischio (per malattia emolitica nel
  neonato).

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Test di Coombs diretto

• I globuli rossi del paziente vengono lavati per
  allontanare le IgG non legate alla membrana
• I globuli rossi vengono posti direttamente a
  contatto con il siero di Coombs
• Si stabilisce cosi se i globuli rossi sono
  stati ricoperti in vivo da IgG , come accade
  nelle malattie emolitiche autoimmuni
• Test positivo le emazie agglutinano ,
  significa che gli Ab del coniglio si sono legati
  agli Ab adesi sulla membrana degli eritrociti .

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Test di Coombs indiretto

• Gli eritrociti vengono lavati per rimuovere le
  IgG non legate alle membrane .
• Si incubano i globuli rossi del paziente o degli
  eritrociti compatibili con il siero del paziente
  e successivamente con il siero di Coombs.
• Il test viene detto indiretto perche il siero
  del paziente è incubato con eritrociti normali
  per far aderire gli eventuali anticorpi
  anti-eritrocitari.
• Test positivo i globuli rossi agglutinano ,
  quindi nel siero testato vi è la presenza di Ab.

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Immunoflorescenza

• Permette di legare ad alcuni anticorpi delle
  sostanze fluorescenti , senza alterarne la
  capacità di legarsi agli antigeni
• Le sostanze fluorescenti in questione sono
• La fluorosceina
• La rodamina
• Le sostanze fluorescenti coniugate agli anticorpi
  possono evidenziare al microscopio a fluorescenza
  la presenza di
• Antigeni di superficie di cellule viventi in
  sospensione
• Antigeni presenti nel citoplasma
• Antigeni presenti nei nuclei
• Il metodo viene utilizzato per identificare
• fenotipi cellulari
• i componenti del complemento
• antigeni tissutali
• antigeni tumorali
• batterici
• virali

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Immunoflorescenza diretta ed indiretta

• Esistono due metodi
• Metodo diretto lanticorpo specifico
  coniugato al fluorocromo si fa direttamente
  aderire agli antigeni cellulari
• Metodo indiretto lanticorpo specifico (
  anticorpo primario) non coniugato si fa aderire
  agli antigeni cellulari , in una seconda fase ,
  si aggiunge un anticorpo anti- anticorpo
  primario, coniugato con il fluorocromo.

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FACS ( fluorescence- activated cell sorter )
Si basa sul principio della citometria a flusso .
Viene utilizzato un raggio laser e un rivelatore
di luce per contare le cellule
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FACS ( fluorescence- activated cell sorter )

• La citometria a flusso si basa sul seguente
  principio
• Un campione, contenente le cellule,è incubato
  con un Ab monoclonale marcato con un fluorocromo
• Le cellule che hanno legato ai loro antigeni di
  membrana lAb fluorescinato vengono eccitati dal
  raggio laser ed emettono la luce
• Il rilevatore della luce misura sia la grandezza
  sia il numero delle cellule che hanno legato lAb
  marcato
• Un computer analizza questi parametri e crea un
  diagramma in cui sono riportate il numero delle
  cellule e la loro tipologia

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RIA ( saggio radioimmunologico)
E una tecnica molto sensibile che può rivelare
la presenza di un antigene o di un anticorpo a
concentrazioni inferiori a 0,001 pg/ml. Il test
RIA si basa sulla competizione tra un antigene
radio marcato ed uno non marcato per un anticorpo
specifico ad alta affinità. Lantigene è
marcato generalmente con piccole quantità di un
isotopo radioattivo ( per es. I251 ) che emette
raggi gamma ( g )
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RIA ( saggio radioimmunologico)

• Se si vuole determinare la concentrazione di un
  antigene X , presente nel siero , lo si purifica
  e lo si marca con I 251
• Si allestiscono una serie di provette
  contenenti una quantità costante dantigene X
  radiomarcato e di anticorpi anti-antigene X
• Si aggiunge una quantità crescente del siero
  in esame , in cui è presente lantigene da
  testare.
• Lanticorpo si può legare sia allantigene
  marcato sia allantigene non marcato, quindi i
  due tipi dantigene competono per legare
  lanticorpo.
• Si misura con un contatore gamma la quantità
  dantigene marcato rimasto in soluzione e quindi
  per differenza si può determinare la
  concentrazione di antigene non marcato.

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ELISA ( enzyme-linked immunosorbent assay)

• E una tecnica simile al RIA ma è più sicuro è
  meno costoso
• Viene utilizzata per evidenziare la reazione
  antigene -anticorpo
• Si utilizza un marcatore enzimatico
  contrariamente al RIA in cui si utilizza un
  marcatore radioattivo
• Sono impiegati vari enzimi tra cui
• la b-galattosidasi
• La fosfatasi alcalina
• La perossidasi di rafano
• Il test si basa sul fatto che un enzima coniugato
  ad un anticorpo reagisce con un substrato
  incolore, detto substarto cromatogenico, e dà
  origine a un prodotto di reazione colorato.
• Lintensità del colore è proporzionale alla
  quantità danticorpo marcato che si lega
  allantigene.

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ELISA (metodo indiretto)

• Viene utilizzato per determinare la quantità di
  anticorpi. Si basa sul seguente procedimento
• In un micropozzetto ricoperto dantigene si
  aggiunge il campione da analizzare ( siero o un
  altro campione , in cui è presente lanticorpo da
  testare, detto Ab primario e lo si lascia reagire
  con lantigene.
• Si aggiunge un anticorpo secondario anti-Ab
  primario, coniugato ad un enzima.
• Si lava via lAb secondario libero e si aggiunge
  il substrato per lenzima.
• La quantità di prodotto di reazione colorato,
  che si forma , viene valutata mediante speciali
  lettori spettrofotometrici
• I lettori spettrofotometrici possono misurare
  lassorbanza di una piastra a 96 pozzetti .

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ELISA (metodo indiretto)
Il test ELISA è utilizzato anche per determinare
la presenza di anticorpi sierici diretti contro
il virus dellimmunodeficienza umana ( HIV),
antigene eziologico dell AIDS. In questo caso
le proteine ricombinanti dellinvolucro e del
core dellHIV (Ag) vengono adsorbite nei
micropozzetti. E possibile evidenziare la
presenza di anticorpi sierici diretti contro
lHIV, mediante lELISA indiretto , entro 6
settimane dallinfezione
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ELISA (a sandwich)

• Viene utilizzato per determinare la quantità
  dellantigene.
• ELISA sandwich
• il micropozzetto è ricoperto con lanticorpo
  primario
• Viene aggiunto il campione contenente lantigene
  da misurare
• Dopo un periodo di incubazione si aggiunge un
  anticorpo specifico per lantigene coniugato con
  un enzima.
• Si lava via lAb secondario libero e si aggiunge
  il substrato dellenzima.
• Lintensità del colore è proporzionale alla
  quantità di anticorpo secondario marcato che si
  lega allantigene, e quindi alla concentrazione
  dellAg.

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ELISA (competitivo)

• ELISA competitivo
• E un test di inibizione la concentrazione
  dellAg è inversamente proporzionale al colore
  sviluppato.
• Si incuba lanticorpo primario con il campione
  contenente lAg da misurare
• Si aggiunge la miscela Ag-Ab formatasi ai
  micropozzetti contenenti lAg.
• Maggiore è la quantità di Ag, presente nel
  campione , minore sarà la quantità di anticorpo
  primario libero.
• Si aggiunge lanticorpo secondario, specifico
  per lAb primario, coniugato con un enzima.
• Dopo aver lavato via lAb secondario si aggiunge
  il relativo substrato e si misura il prodotto di
  reazione colorato

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Complemento

• E formato da un complesso sistema
  multifattoriale, costituito da oltre 20 proteine
  sieriche , che ha la funzione di distruggere i
  batteri tramite la lisi o la fagocitosi.
• Soggetti affetti da deficit quantitativo o
  funzionale del complemento pur avendo livelli
  normali di Ig, sono particolarmente esposti a
  ripetute infezioni.
• Le molecole del complemento si trovano nel
  sangue o nei liquidi biologici, in forma inattiva
  finche non sono attivati da microrganismi o altri
  fattori.
• Il meccanismo di attivazione è un meccanismo a
  cascata, in cui il primo elemento agisce sul
  successivo , rendendolo attivo e quindi capace di
  agire sullelemento successivo.
• Lattività è localizzata nella zona dinnesco
  con una emivita degli elementi di un millesimo di
  secondo.
• Le molecole del complemento sono indicate con
  una numerazione , che va da C1 al C9 , oppure con
  le lettere maiuscole (B,D,P).
• I frammenti derivati dalla molecola che ha
  subito lazione enzimatica dellelemento che lo
  precede nella cascata, sono indicati con le
  lettere minuscole (es. C5a, C5b) .
• Il meccanismo terminale dellazione del
  complemento è la formazione di un complesso
  litico, detto complesso dattacco alla membrana
  (MAC), costituito dai fattori che vanno dal C5 al
  C9.

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Complemento

• Il sistema del complemento può essere attivato ,
  nelle sue fasi iniziali fino al fattore centrale
  C3 , mediante 3 vie
• Via classica viene attivata dallinterazione
  fra l immunocomplesso ( formato da antigeni ed
  anticorpi delle classi IgG ed IgM ), oppure fra
  complessi formati da Ig aggregate o denaturate, e
  il primo componente , il C1q.
• Via alternativa o properdinica viene attivata
  dalla presenza di particolari prodotti dorigine
  batterica o virale, che interagiscono con il
  componente C3 . Viene innescata in assenza di
  anticorpi.
• Via lectinica attivata dallinterazione tra
  una proteina della fase acuta (lectina legante il
  mannosio, MBL) e i residui di mannosio, presenti
  nelle glicoproteine o carboidrati della
  superficie dei microrganismi.

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Complemento

• I fattori del complemento svolgono molteplici
  funzionalità biologiche
• La capacità di lisi delle membrane cellulari ,
  batteriche e dellinvolucro lipoproteico di
  alcuni virus per azione del complesso litico
  (C5b-C9)
• La capacità della risposta infiammatoria
  mediante liberazione di sostanze ad azione
  anafilattica (vasoattiva) e chemiotattica, che
  favoriscono il richiamo locale di cellule
  fagocitanti (C3a, C5a)
• Lopsonizzazione delle cellule capaci di
  fagocitosi (C3b,C4b)
• La rimozione degli immunocomplessi avviene
  tramite il legame tra un frammento del
  complemento (C3b) e i recettori presenti su
  alcune cellule.

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(No Transcript)
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Via classica

• Il primo fattore attivato è C1 .
• Il fattore C1 è costituito da un complesso
  tri-molecolare di 750 kDa legato in maniera non
  covalente , C1q, C1r, C1s , in un rapporto
  molare di 1/2/2 (C1qr2s2).
• C1q è una proteina complessa, ricca in
  idrossiprolina, idrossilisina e glicina che per
  le sue caratteristiche elettroforetiche presenta
  delle analogie con le Ig, mentre per la sua
  struttura amminoacidica ricorda le proteine del
  collagene.
• La molecola C1q è costituita da 6 unità ognuna
  costituita da tre distinte subunità A,B,C
• E possibile distinguere una parte centrale
  compatta , che lega C1r e C1 s , ed una struttura
  più esterna che termina con una forma a calice.
• La struttura a calice svolge la funzione di
  riconoscere e legare particolari siti presenti
  nelle Ig, i quali si evidenziano durante la
  formazione dellimmunocomplesso.
• La sub-unità C1q si deve legare ai domini CH2 di
  almeno due anticorpi IgG adiacenti .
• La sub-unità C1q si può legare ad un solo
  anticorpo IgM perche dotato di molti domini CH3.
• Esistono 4 sottoclassi di IgG nelluomo ciascuna
  delle quali ha una differente affinità per C1q.
  La più affine è IgG3 , seguita dallIgG1 e IgG2
  mentre lIgG4 non attiva il complemento.

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Via classica

• C1s inattivo ha un peso molecolare intorno a 90
  kDa ed è costituito da una sola catena
  polipeptidica
• Lattivazione di C1s comporta la formazione di
  due catene una più grande (a) ed una più piccola
  (b) , in cui si trova il sito enzimatico
  necessario per lattivazione dei componenti
  successivi .
• Lattività enzimatica è di tipo serino-esterasi,
  ed agisce su due substrati C4 e C2 che vengono
  scissi rispettivamente in C4a e C4b , e in C2a e
  C2b dando origine al complesso C4b2a, denominato
  C3 convertasi che ha la capacità di attivare il
  fattore C3.

37
(No Transcript)
38
Via classica meccanismi di controllo

• Le reazioni che caratterizzano la via classica
  sono soggette al controllo di diverse proteine
  solubili quali
• C1 inibitore ( C1 INH ) questo fattore agisce
  su C1, bloccando lattività enzimatica di C1s (
  edema angioneurotico , dipende dallassenza di
  questo fattore)
• C4bp ( C4 binding protein) questo fattore si
  lega al C4b, bloccando la formazione del
  complesso C4b2a e permettendo , cosi, il legame
  del fattore H, capace a sua volta di inattivare ,
  oltre che il C3b, anche il C4b.
• Fattore I questo fattore inattiva il C3b,
  formando il C3b inattivo (iC3b).
• Questi meccanismi sono necessari per mantenere
  gli effetti dellinnesco della cascata del
  complemento solamente a livello del sito
  dattivazione.

39
Via alternativa

• La via alternativa differisce dalla via classica
  essenzialmente per due motivi
• viene attivata in assenza di anticorpi
• inizia dal componente C3
• Costituisce un meccanismo di difesa
  anti-infettiva aspecifico ed immediato
• Può essere innescata da diverse sostanze
• lipolisaccaride (LPS) dei batteri gram-negativi
• endotossine batteriche
• particelle virali
• Va tenuta in considerazione che il componente C3
  và in contro ad una lenta scissione spontanea
  perche presenta al suo interno un legame molto
  instabile , un legame tioestere.
• Il C3 formatosi , alla presenza dei fattori
  diniziazione lega la proteina B, e forma il
  complesso C3bB.
• Se C3b non si lega alle strutture estranee viene
  trasformato in una molecola inattiva, il iC3b,
  importante per l opsonizzazione.

40
Via alternativa

• La proteina (fattore) B, una volta inserita nel
  complesso, è scissa dalla proteina D in Bb e Ba.
• Il complesso attivo C3bBb ( C3 convertasi della
  via alternativa) , potenziato dalla properdina
  (P) , è capace di scindere il C3 in C3a e C3b.
• C3b può rientrare nel ciclo, generando un
  meccanismo damplificazione del sistema , oppure
  legarsi al complesso precedente e dare origine,
  cosi , alla C5 convertasi della via alternativa
  (C3bBbC3b)
• La via alternativa è regolata dallazione di due
  proteine solubili
• la proteina H fattore di controllo anche nella
  via classica . Si lega al C3b della C3 convertasi
  occupando il posto di Bb, bloccando , cosi, la
  successiva attivazione della cascata
  complementare.
• il fattore I cliva il C3b, legato al fattore
  H, in iC3b, C3c e C3d.

41
Via lectinica

• Viene attivata in assenza di Ab .
• E un meccanismo di difesa aspecifico
• Viene indicata come MBL , ossia la via della
  lectina legante il mannosio
• La sua attivazione dipende dal riconoscimento non
  specifico di sostanze estranee (carboidrati).
• Presenta analogie strutturali alla via classica.
• La MBL è simile al C1q, infatti dopo che si è
  legata ad un microrganismo si unisce, per formare
  un complesso attivo , ad un enzima , detto MASP
  (MBL-associated serine-protease) , che è simile
  al C1r e al C1s della via classica.
• Il complesso MBL-MASP cliva il C4 e il C2 e porta
  alla formazione di una C3 convertasi che ha come
  conseguenza la formazione della C5 convertasi.

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Formazione del complesso dattacco alla membrana
( MAC )
La C5 convertasi provoca la scissione del C5 in
C5a e C5b. La C5a liberato contribuisce con le
sue capacità anafilattiche e chemiotattiche alla
risposta infiammatoria locale La C5b si lega al
C6 e al C7 per formare il complesso C5b-7, che
presentano la capacità di legarsi alle membrane
biologiche. Il complesso C5b-7 lega una molecola
del fattore C8 e circa 10 molecole di C9,
formando il complesso dattacco alla membrana
(MAC), il C5b-9. Il complesso dattacco alla
membrana (MAC) ha attività litica sulle membrane,
causando la formazione di pori di circa 10 nm di
diametro Attraverso i pori avviene il passaggio
dacqua e di Sali che portano alla lisi osmotica
della cellula o del microrganismo. La proteina S
si lega al complesso C5b-9, la quale blocca
lattività di lisi e quindi regola lattività
biologica del MAC.
43
Fattori regolatori

• Esistono molecole di membrana ad attività
  regolatoria tra cui
• fattore accellerante il decadimento ( DAF) e la
  proteina cofattore di membrana (MCP), che
  agiscono sulla C3 convertasi della via classia e
  della via alternativa.
• fattore di restrizione omologa (HRF) e l
  inibitore di membrana della reazione di lisi
  (MIRL/CD59), che lega il complesso C5b-8 e blocca
  il legame del C9 alle cellule autologhe.