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MODALITÀ DI PRELIEVO, TRASPORTO E CONSERVAZIONE
DEL CAMPIONE IMPLICAZIONI PER LERRORE
PREANALITICO Prof. Pietro Pietrini
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Introduzione

• Il sangue è formato da elementi figurati
  (eritrociti, leucociti e piastrine) e da una
  sostanza intercellulare liquida, denominata
  plasma.
• Il plasma è la componente fluida del sangue, cioè
  il sangue deprivato degli elementi figurati, ma
  che contiene i fattori della coagulazione
• Il siero identifica quel liquido normalmente
  chiaro che si separa dal sangue quando questo
  viene lasciato coagulare. Quindi il siero è la
  componente liquida del sangue che rimane dopo la
  rimozione degli elementi figurati e del coagulo
  di fibrina.
• Il sangue può essere prelevato dalle arterie,
  vene o capillari. Il sangue venoso (o il sangue
  capillare) è di scelta per le indagini
  chimico-cliniche di routine. Il sangue arterioso
  è standard per lo studio degli equilibri
  acido-base e dei gas del sangue.
• Nel corpo umano sono presenti circa 5 L di sangue
  (7 del volume corporeo) Di questi 5 L,
  solamente 2,25 L, cioè il 45, è rappresentato da
  cellule, mentre il resto è plasma, che consiste
  per il 93 di acqua e per il 7 di componente
  solida (per lo più proteine). Dei 2,25 L di
  elementi corpuscolati, solamente 0,037 L (1,6)
  sono leucociti, le piastrine anche meno - circa
  0,0065 L.

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Il sangue

• Il sangue è un tessuto formato da una sospensione
  di cellule (45) in un liquido chiamato plasma
  (55)
• costituisce circa 1/12 del peso corporeo, circa
  quindi 5-6 litri
• Il sangue svolge numerose ed importanti funzioni
• Respiratoria per mezzo dell'emoglobina contenuta
  negli eritrociti, porta l'ossigeno ai vari
  tessuti e ne preleva l'anidride carbonica (CO2)
• Nutritizia ed escretrice trasporta sostanze
  nutritive (amminoacidi, zuccheri, sali minerali)
  e raccoglie quelle escrete dai vari apparati che
  verranno eliminate attraverso il filtro renale od
  elaborate dal fegato
• Regolazione Il sangue trasporta inoltre ormoni,
  enzimi e vitamine
• Difesa Presiede anche alla difesa dell'organismo
  attraverso l'azione svolta dai globuli bianchi
• Termoregolatrice
• Mantenimento del tasso idrico
• Regolazione dellemostasi
• Mantenimento della pressione osmotica (minerali)
  e oncotica (proteine)

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(No Transcript)
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Il sangue

• Il plasma è un fluido leggermente alcalino (pH
  7,4), con caratteristico colore giallino,
  costituito per il 90 da acqua e per il 10 da
  sostanza secca
• La sostanza secca è formata al 90 da sostanze
  organiche
• glucidi (glucosio)
• lipidi (colesterolo, trigliceridi, fosfolipidi,
  lecitina, grassi), proteine (globuline, albumine,
  fibrinogeno)
• glicoproteine
• ormoni (gonadotropine, eritropoietina,
  trombopoietina)
• amminoacidi
• vitamine
• mentre il 10 è costituita da minerali, dissolti
  sotto forma ionica, cioè dissociate in ioni
  positivi e negativi
• Per ottenere il plasma bisogna aggiungere al
  sangue contenuto in una provetta, una sostanza
  anticoagulante e sottoporre il campione a
  centrifugazione in questa maniera la parte
  corpuscolata si deposita sul fondo della provetta
  e sopra questa abbiamo un fluido che e' il
  plasma. Se invece al campione non viene aggiunto
  anticoagulante, alla parte corpuscolata si lega
  il fibrinogeno centrifugando, o semplicemente
  attendendo un certo tempo, la parte solida si
  deposita e sopra resta un liquido che si chiama
  siero

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Conta Ematica Completa

• È il cardine di ogni esame emocromocitometrico e
  fornisce indicazioni sullo stato funzionale del
  midollo osseo determina le caratteristiche
• ERITROCITI
• numero totale RBC
• indici degli eritotrociti MCV, MCHC, MCH
• ampiezza di distribuzione RDW
• LEUCOCITI (conta differenziale)
• PIASTRINE (conta e volume piastrinico medio MPV)
• Alterazioni nel numero
• -penia deficienza del componente cellulare
  ematico (deficit di produzione o aumentata
  distruzione)
• -citosi aumento del componente cellulare ematico
  (risposta fisiologica ad uno stimolo periferico o
  proliferazione incontrollata)

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(No Transcript)
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Procedure di preparazione al prelievo

• preparare tutto il materiale occorrente e
  verificarne il corretto funzionamento (siringhe
  prelievo o vacutainer, provette, laccio
  emostatico, garze, soluzione disinfettante)
• verificare lidentificazione del pz e gli esami
  richiesti, indagare sullo stato del paziente
  (digiuno, farmaci assunti, stato emotivo, dieta,
  ecc.)
• disinfezione detergere e disinfettare con
  sostenze efficaci ma non interferenti (alcool
  etilico 70 ma se si determina lalcolemia -gt
  disinfettanti privi di alcool)
• PRELIEVO
• controllare la condizione del pz prevenendo
  possibili sincopi (il prelievo va effettuato a pz
  seduto o sdraiato per evitare cadute)
• gettare il materiale usato durante il prelievo
  negli appositi contenitori non incappucciare la
  siringa dopo il prelievo e non rimuovere lago
  con le mani

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Prelievo Venoso

• ispezionare la regione antecubitale del braccio
  chiedendo al pz di fare il pugno
• selezionare la vena migliore (mediana cubitale e
  cefalica, dorso della mano per obesi) per il
  prelievo
• detergere e disinfettare il punto del prelievo
• applicare un laccio emostatico a monte del punto
  di prelievo (metà del braccio) - non lasciare il
  laccio in sede per più di un minuto
• afferrare la vena, inserire lago a circa 15 dal
  piano cutaneo, inserire lago gentilmente ma in
  modo deciso, senza affondare troppo
• sciogliere il laccio emostatico (causa
  emoconcentrazione!)
• iniziare il prelievo aspirando in modo continuo
  unazione troppo rapida causa emolisi o
  collabimento della vena (differenza fra siringa e
  sistema a vuoto)
• far rilasciare il pugno del pz evitando il
  pompaggio, porre un bendaggio (cotone o garza
  sterile), rimuovere delicatamente lago e premere
  sul punto del prelievo per evitare la formazione
  di un ematoma
• versare il sangue nelle provette senza causare
  emolisi, ruotare senza agitare le provette con
  lanticoagulante

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Prelievo Venoso
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Prelievo Venoso
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(No Transcript)
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Prelievo Arterioso

• richiede una maggiore esperienza
• selezionare larteria migliore (radiale,
  brachiale o femorale) per il prelievo (facendo
  iperestendere il polso al paziente)
• ispezionare la regione
• Test di Allen per valutare ladeguato afflusso di
  sangue alla mano dallarteria ulnare e radiale
• detergere e disinfettare il punto del prelievo (è
  possibile ricorrere ad una lieve anestesia con
  lidocaina 2)
• larteria viene immobilizzata tenendo le dita a
  cavallo è facile da percepire perché offre
  maggiore resistenza della pelle e del tessuto
  muscolare
• la puntura viene effettuata a 90 rispetto alla
  superficie cutanea
• dopo lestrazione dellago applicare una
  pressione idonea almeno per 5 minuti

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(No Transcript)
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Prelievo Capillare

• i dati ematochimici su sangue capillare non
  differiscono significativamente da quelli
  ottenuti su sangue venoso, purché si eviti, nel
  primo caso, il passaggio di liquido dallo spazio
  interstiziale a quello vascolare e, nel secondo,
  una stasi prolungata
• il prelievo capillare può essere eseguito dal
  polpastrello di un dito o dal lobo dellorecchio
  nelladulto e dal tallone nel bambino
• frizionare la parte con alcool o immergere in
  acqua calda per aumentare il flusso localmente e
  ottenere sangue arterializzato
• pungere con una lancetta di acciaio alla
  profondità di 3-4 mm
• scartare la prima goccia di sangue e raccogliere
  quello che defluisce successivamente, senza
  spremere

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La selezione delle provette
Rossa nessun additivo Raccolta
siero Rosso/Nero gel separatore Raccolta
siero Blu citrato Plasma o sangue intero
Viola EDTA Plasma o sangue
intero Verde eparina Plasma o sangue
intero Grigio ossalato, iodoacetato Plasma o
sangue intero
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Anticoagulanti
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Variabili preanalitiche che possono influenzare i
valori degli esami di laboratorio
Variabili modificabili
Variabili non modificabili

• Fisiologiche
• postura
• decubito prolungato
• esercizio fisico
• allenamento fisico
• variazioni circadiane
• viaggi

• Fattori biologici
• età
• sesso
• razza
• patologie

• Fattori ambientali
• altitudine
• temperatura
• residenza

Farmaci

• Dieta
• ingestione di cibo
• cibi e bevande particolari
• dieta vegetariana
• obesità
• malnutrizione
• digiuno prolungato

• Condizioni mediche
• febbre
• shock e trauma
• trasfusioni

• Stile di vita
• fumo
• alcool

• Cambiamenti ciclici a lungo termine
• stagioni
• ciclo menstruale

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(No Transcript)
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Variabilità preanalitica

• Un trattamento preanalitico improprio può
  invalidare risultati altrimenti corretti ( gt90
  delle cause di errore)
• Trasporto intramurale o extramurale (natura dei
  contenitori, imballaggi, modalità di spedizione,
  modalità di conservazione durante il trasporto)
• Accettazione dei materiali e verifica della loro
  idoneità

Criteri di non accettabilità
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Variabilità preanalitica

• Sieratura e centrifugazione (entro 1 ora)
• Smistamento ai settori analitici
• Eventuale deproteinizzazione o altro trattamento
• Eventuale conservazione (refrigerazione a 4,
  conservazione al buio, liofilizzazione,
  modificazione del pH, aggiunta di sostanze
  chimiche, ecc.)

Cause di errori preanalitici durante la
conservazione
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Linterpretazione delle analisi di laboratorio

• Paziente
• segni e sintomi
• storia clinica

• Clinico
• sviluppa unipotesi di diagnosi
• valutazione successive

• Clinico
• stabilisce una diagnosi o prognosi
• trattamento e follow up

• Clinico
• richiede gli esami
• prepara il paziente

• Clinico
• interpreta i risultati
• valuta lipotesi originale

Linee guida per la raccolta campioni
Raccolta campioni
Emissione referto
LABORATORIO
Trattamento e conservazione campioni
Stabilisce i valori di riferimento
Verifica dei risultati
Analisi