Diapositiva 1

1
Detección de Vibrio cholerae en muestras
ambientales. Rol del Departamento Salud Ambiental.
BQ. María Cristina Martínez Sección
Microbiología de Alimentos y Aguas Subdepartamento
de Alimentos y Nutrición
2
INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE
Es el laboratorio nacional y de referencia en
los campos de la microbiología, inmunología,
bromatología, farmacología, imagenología,
radioterapia, bancos de sangre, laboratorio
clínico, contaminación ambiental y salud
ocupacional. Como Institución pública, también
realiza funciones de control, supervisión, e
investigación. (Ley de Autoridad Sanitaria Nº
19.937, Art. 35)
3
INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE
Departamento Control Nacional
Departamento Laboratorio Biomédico Nacional
Departamento de Salud Ambiental
Departamento Salud Ocupacional
Departamento Administración y Finanzas
4
DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL
Realizar análisis químicos, microbiológicos,
toxicológicos y otros de muestras de alimentos,
aguas y otras sustancias, así como de elementos
contaminantes.
5
DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL
Efectuar investigación aplicada en técnicas
relativas a las materias de su competencia, para
su perfeccionamiento y difusión. Realizar
actividades de apoyo a la vigilancia
epidemiológica y a programas ministeriales
6
DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL
Referencia, normalizador y supervisor de la
Red de Laboratorios de Salud Pública reconocidos,
públicos y privados, en materia de alimentos y
medio ambiente.
7
Dpto. Salud Ambiental
8
SECCION MICROBIOLOGÍA ALIMENTOS Y AGUAS

• Actualización de métodos para la detección de
  microorganismos patógenos e indicadores de
  higiene en alimentos y aguas.
• Transferencia tecnológica a la red pública de
  laboratorios ambientales

9
Red pública de Laboratorios del Ambiente
Arica Arica
Iquique Iquique
Antofagasta Antofagasta
Atacama Copiapó
Coquimbo Coquimbo
Metropolitana Santiago
Valparaíso Valparaíso, Viña del Mar, San Felipe
OHiggins Rancagua
Maule Talca
Bio Bio Concepción, Chillán , Los Angeles
Araucanía Temuco
Los Ríos Valdivia
Los Lagos Puerto Montt, Osorno
Aysen Aysen
Magallanes Punta Arenas
TOTAL 20
10
VIGILANCIA AMBIENTAL

• RED DE LABORATORIOS PUBLICOS
• De los 20 laboratorios, 19 tienen implementado el
  método de detección de Vibrio cholerae, 13
  realizan análisis de muestras para la vigilancia
  de cólera en forma rutinaria.
• En promedio tienen una capacidad analítica de 3-5
  muestras semanales.
• Se encuentran en distintas etapas de
  implementación de la NCh 17025
• De acuerdo al Plan nacional de preparación para
  un eventual brote de cólera, se destinaron
  recursos para la compra de insumo y equipamiento,
  con el objeto de retomar la vigilancia ambiental
  de cólera en todos los laboratorios.

11
VIGILANCIA AMBIENTAL

• METODOS DE ANALISIS DE Vibrio cholerae
• Aguas Servidas (altamente contaminadas)
• Detección de Vibrio cholerae por Tórula de Moore
• 2.- Aguas Claras sin mayor turbiedad o sedimentos
  (agua de mar, agua de riego, agua consumo humano)
• Método de Filtración por Membrana
• 3.- Alimentos (moluscos bivalvos, verduras)
• Detección de Vibrio cholerae en 25 g
• Referencias CDC BAM FDA Standard Methods
• http//www.ispch.cl/

12
METODO TORULA MOORE
Muestras Agua Servida Altamente contaminada
Exposición 24-48 horas
TRASLADO lt 6 HORAS AL LABORATORIO
crítico
Enriquecimiento Agua Peptonada Alcalina (ph 8.5)
13
METODO FILTRACION POR MEMBRANA
Muestras agua sin mayor turbiedad o sedimento
TRASLADO lt 6 HORAS AL LABORATORIO
crítico
Filtrar por 0.22-0.45 200-300 ml
Enriquecimiento Agua Peptonada Alcalina (ph 8.5)
14
DETECCION EN ALIMENTOS
TRASLADO lt 24 HORAS AL LABORATORIO
25 g alimentos, moluscos, verduras
Enriquecimiento Agua Peptonada Alcalina (ph 8.5)
15
PROCESO ANALÍTICO
Enriquecimiento Agua Peptonada Alcalina (ph
8.5) 6-8 HORAS
crítico
AISLAMIENTO AGAR SELECTIVO TCBS Colonias
amarillas con bordes lisos, 2-3 mm ligeramente
aplanadas en el centro
Ausencia Vibrio cholerae
PRUEBAS BIOQUIMICAS
(-)
()
Serología
Presuntivo Vibrio cholerae O1
()
(-)
Vibrio cholerae NO O1
Envío laboratorio de referencia
16
AISLAMIENTO DE TORULA MOORE
17
VIGILANCIA AMBIENTAL COLERA RM-2010
TIPO MUESTRA CANT.
Torula Moore Planta tratamiento aguas aeropuerto AMB 14
Torula Moore La Farfana 4
Tórula Moore El Trebal 4
Canales de regadío (10) 20
Mariscos terminal pesquero 110
Hortalizas predios agrícolas 23
TOTAL 175
Resultados Ausencia Vibrio cholerae O1
Fuente SEREMI Salud Región Metropolitana
18
VIGILANCIA AMBIENTAL
BASE DE DATOS COLERA Se creó base de datos on
line para ingreso de muestras y resultados del
monitoreo ambiental, que realicen los
Laboratorios Ambientales de las SEREMIs de
Salud. OBJETIVO Estandarizar la información de
puntos de muestreo y resultados de análisis a
nivel nacional y regional.
19
(No Transcript)
20
(No Transcript)
21
(No Transcript)
22
(No Transcript)
23
DESARROLLO TECNOLOGICO

• METODOS DE DETECCION MOLECULARES
• Agua Implementación Método FDA, NMP en aguas
  concentradas para Detección de gen toxigénico de
  Vibrio cholerae en los tubos del enriquecido,
  directamente.
• 2.- Moluscos bivalvos BAX Vibrio (qPCR tiempo
  real). Muestreo de 5 muestras 2 veces al mes,
  desde Diciembre 2010 a Marzo 2011, para detección
  de Vibrio cholerae, (Puerto Montt).

24
COMENTARIO FINAL
El desafío propuesto es coordinar esfuerzos
para establecer una red de laboratorios públicos
y privados que permita compartir conocimiento y
tecnología y enfrentar, de manera conjunta,
eventuales emergencias sanitarias en nuestro
país.
25
GRACIAS mmartinez_at_ispch.cl