Presentacin de PowerPoint

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CONTROL BIOLÓGICO DE LA PODREDUMBRE AZUL DEL
MANZANO OCASIONADA POR Penicillium expansum.
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Ciclo de la enfermedad
parásitos de heridas o bien, aberturas naturales
Las esporas de Penicillium sobreviven en bins o
cajones contaminados, de estación a estación
Las esporas pueden llegar a la cámara frigorífica
provenientes del campo cuando los bins vienen
sucios de tierra, de frutas podridas o por el
aire.
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OBJETIVO
Búsqueda de antagonistas biológicos para el
control del Moho Azul de la manzana, causado por
Penicillium expansum.
En la superficie y en la zona endófita de los
frutos de manzanas, se localizan microorganismos
capaces de protegerlos de las infecciones
generadas por Penicillium expansum.
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Aislamiento de antagonistas epífitos y endófitos
para el control de P.expansum en manzanas sanas.
Siembra del agua del lavado sin diluir y de
dilución 1/10
Frutos
Lavado y desinfección
Agar jugo de manzana
Otros lavados
Incubación a 25º C
Extracción con sacabocado de pulpa cascara
agua tensoactivo
Stomacher
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Resultados de aislamiento de microorganismos
epífitos y endófitos
40 x
100 x
Colonias sin micelio
Colonias con micelio
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Discusión

• Método de aislamiento

• No se cuestiona la metodología empleada, ya que
  el tiempo de incubación no fue suficiente para un
  buen desarrollo de las colonias.
• Procedencia de la fruta (no fue de cámara
  frigorífica)
• Estado de madurez del fruto (no se determinaron
  ningún tipo de parámetros)

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Pruebas in vivo de posibles antagonistas
Lavado y desinfección
1º Antagonista (107 UFC/mL.) A B 2º
Patógeno (104 conidios/mL)
Inoculación
Incubación a 25º C
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PRUEBA in vivo DE LOS ANTAGONISTAS
m.o.
Control
A
B
Incidencia A 100 B 100
Severidad 70,0 73,6
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MECANISMOS DE ACCIÓN in vitro DE LOS ANTAGONISTAS
Producción de quitinasas
Microorganismos antagónicos
Epífitas Endófitas
?
Medio Agar quitina 0,2
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MECANISMOS DE ACCIÓN in vitro DE LOS ANTAGONISTAS
Producción de sustancias difusibles
Levaduras endófitas
Levaduras epífitas
Medio PDA
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MECANISMOS DE ACCIÓN in vitro DE LOS ANTAGONISTAS
Producción de sideróforos
Levaduras Epífitas
Endófitas
Medio CAS
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ACCIÓN ANTIMICROBIANA DEL QUITOSANO El Quitosano
genera una inhibición en la germinación de
esporas de P. expansum y B. cinerea en tomate
(Liu et al. 2007)
in vitro Placa PDA Quitosano a diferentes
concentraciones
in vivo
Hongo 10µL (104)
Limpieza y desinfección
Quitosano al 0.5 (10µL ) P. expansum (10µL)
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ACCIÓN in vivo DEL QUITOSANO
Ctrl P. expansum H1- H3 Quitosano 0.5 P.
expansum
Incidencia 100 Severidad 95.8
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ACCIÓN in vitro DEL QUITOSANO
Acción antimicrobiana del quitosano sobre P.
expansum en placa

Quitosano Control
0,625 1,250
1,875
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DISCUSIÓN

• Quitosano
• Procedencia (PM, grado acetilación).
• Evaluar a menores concentraciones.
• Posible efecto fungistático diferencial en placa
  respecto al fruto
• debido a diferentes condiciones nutricionales.

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• Cómo seguir
• Realizar otras pruebas bioquímicas, enzimáticas
  y evaluar otros mecanismos de acción.
• Probar los antagonistas seleccionados con otros
  patógenos y en otros frutos.
• Evaluar la resistencia a fungicidas de los
  antagonistas.
• Efectuar pruebas de compatibilidad entre
  antagonistas y de antagonistas con fungicidas.
• Probar controladores biológicos con Quitosano a
  diferentes concentraciones.
• Probar antagonistas con otras sustancias
  permitidas (ácido acético, bicarbonato de sodio,
  UV, etc... ).
• Evaluar sobrevivencia de antagonistas en las
  heridas en el tiempo.