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Diversidad Funcional y Ecofisiología de las
Bacterias Transformadoras del Nitrógeno y
Aplicación a la Gestión de un Sistema de
Humedales de Tratamiento (EDAR-Empuriabrava). REN
2003-02185
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Datos generales del proyecto
Investigador Principal Dr. L.J.
García-Gil Organismo Universidad de
Girona Centro Inst. de Ecología Acuática
(Microbiología) Subvención concedida 80.900
Personal -- Otros gastos -- Fecha de
Inicio Diciembre 2003 Fecha de
finalización Diciembre 2006
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Participantes
Entidades públicas Universidad de
Girona Entidades Privadas (EPO) Consorcio de la
Costa Brava Servicio de Control de
Mosquitos SEARSA- Roses Parque Natural dels
Aiguamolls de lEmpordà Investigadores Dr.
L.J. García-Gil, Dr. L. Bañeras Vives
J. Llansó Pascual O. Ruiz Rueda N. Poblet Mas
Dra. A. Martínez-Planells L. Calvó Perxas X.
Fuentes García
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Descripción del Proyecto y Objetivos

• El proyecto se centra en el estudio de las
  poblaciones de bacterias nitrificantes y
  desnitrificantes en el sedimento de un sistema de
  humedales para el tratamiento de aguas residuales
  urbanas (SHT). La eliminación efectiva de amonio
  y nitrato ha sido la principal preocupación de
  los organismos gestores en una zona altamente
  turística. Se desarrollan métodos moleculares
  para el estudio de la diversidad y actividad de
  bacterias nitrificantes y desnitrificantes, con
  la finalidad de ampliar los datos disponibles
  para la gestión del SHT estudiado.
• Análisis de la estructura y composición de las
  poblaciones nitrificantes y desnitrificantes.
• Determinación de actividades potenciales de
  nitrificación/desnitrificación.
• Determinación de actividad in situ.
• Utilización de resultados en programas de gestión.

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Tareas y Acciones del Proyecto

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Tareas y Acciones del Proyecto

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Tareas y Acciones del Proyecto

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Desarrollo del Proyecto
1. Toma de muestras Muestreos en las celdas de
tratamiento de los SHT.
lt7ppm NH4
Sedimento libre
Sed. vegetación
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Desarrollo del Proyecto
1. Toma de muestras Muestreos semestrales en las
celdas de tratamiento de los SHT.
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Desarrollo del Proyecto
3.1. Métodos moleculares Análisis de la
estructura de la comunidad nitrificante
(PCR-DGGE).
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Desarrollo del Proyecto
2.1. Métodos moleculares Análisis de la
estructura de la comunidad nitrificante
(PCR-DGGE).
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Desarrollo del Proyecto
2.1. Métodos moleculares Análisis de la
estructura de la comunidad nitrificante
(PCR-DGGE).
Bacterias oxidadoras de amonio
NH3
amoABC
NH2OH
hao
HNO2
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Desarrollo del Proyecto
3.2. Métodos moleculares Análisis de la
estructura de la comunidad desnitrificante
(PCR-TRFLP).
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Desarrollo del Proyecto
2.2. Métodos moleculares Desnitrificantes
NO3
nar
NO2
nirS,K
NO
norBC
N2O
nosZ
N2
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Desarrollo del Proyecto
2.2. Métodos moleculares Desnitrificantes
NO3
nar
NO2
nirS,K
NO
norBC
N2O
nosZ
N2
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Desarrollo del Proyecto
2.2. Métodos moleculares
30 bp
700 bp
30 bp
700 bp
UPGMA cluster 2004
UPGMA cluster 2005
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Desarrollo del Proyecto
4. Aislamiento y cultivo Desarrollo de métodos
para el aislamiento de bacterias nitrificantes y
desnitrificantes.
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Desarrollo del Proyecto
5. Construcción de sistemas experimentales
Ensayo de actividades potenciales.
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Desarrollo del Proyecto
5. Construcción de sistemas experimentales
Combinados agua-sedimento
NITRIFICACIÓN
DESNITRIFICACIÓN
Anaeróbico (N2) Agitación Nitrato
2mM acetatoetanol propionato
O2 Agitación Amonio 7.5mM
Toma de muestras
Análisis nitrato y nitrito HPLC
Cálculo cinético
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Desarrollo del Proyecto
5. Construcción de sistemas experimentales
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Desarrollo del Proyecto
8. Construcción de sistemas experimentales in
situ Estudio de la actividad transformadora de
nitrógeno a escala real.
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Desarrollo del Proyecto
8. Modelización Utilización de los resultados en
modelos reales y explotación.
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Resumen Final del Proyecto

• El desarrollo de las tareas realizadas respecto
  de las programadas en el proyecto puede resumirse
  en
• Disminución del número de muestreos.
• Freno en el desarrollo del estudio de bacterias
  nitrificantes debido a la renuncia del personal
  asignado.
• Demora en los estudios de expresión génica hasta
  el primer trimestre del año 2006.
• Demora en el desarrollo de sistemas
  experimentales in situ y explotación de los
  resultados.

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Resumen Final del Proyecto

• Objetivos conseguidos hasta la fecha
• Estudio de la diversidad del gen nirS.
• Optimización protocolos de T-RFLP.
• Optimización mètodos de estudio de genes
  funcionales nirK, nosZ, amoA y amoB.
• Diversidad de AOB mediante gen 16S rRNA.
• Análisis de las actividades potenciales de
  nitrificación/desnitrificación.
• Aislamiento y cultivo de bacterias
  desnitrificantes.

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Diversidad Funcional y Ecofisiología de las
Bacterias Transformadoras del Nitrógeno y
Aplicación a la Gestión de un Sistema de
Humedales de Tratamiento (EDAR-Empuriabrava). REN
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