Interacciones microorganismos planta

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PRÁCTICO N 5
Interacciones microorganismos - planta
Objetivo Conocer las técnicas de laboratorio
para el manejo de microorganismos que interactúan
con las plantas
Interacciones más comunes

• Positivas (sinérgicas)
• Simbiosis (rizobios, micorrizas)
• Mutualismo (Azozpirillum)

• Negativas (antagónicas)
• Competencia
• Amensalismo

Aislamiento de microorganismos
Selección de cepas Producción de inoculantes
Técnicas de laboratorio
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Aislamiento de microorganismos rizobios
Extraer los nódulos
Raíz de leguminosa
Desinfectar con H2O2 (20) 5 minutos
Enjuagar con H2O estéril
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Aislamiento de microorganismos (Rizobios)
Colocar los nódulos en un tubo con 1ml de agua
estéril
Macerar con varilla de vidrio
Incubar (28-30 C)
Estriar en medio YEM
Extraer una alícuota
4
Aislamiento de microorganismos (Rizobios)
Colorear y observar
Cultivo de rizobio
Incubar y conservar
Repicar a pico de flauta
5
Síntesis de aislamiento de rizobios
6
Aislamiento de microorganismos Azospirillum
Gramínea
Suspender en H2O estéril
Cortar raíces
Extraer alícuota
Agitar
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Aislamiento de microorganismos Azospirillum
Incubar
Sembrar en medio NFB semisólido
Halo de crecimiento de Azospirillum
Repicar a pico de flauta"
Incubar y conservar
8
Síntesis de aislamiento de Azozpirillum
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Selección de cepas
Ensayo de laboratorio alfalfa
Medio de cultivo Yensen Testigo medio sin N sin
inocular Control medio sin N inoculado con cepa
eficiente Tratamientos medio sin N inoculados
con cepas a testear Testigo medio con N sin
inocular
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Síntesis de selección de cepas
11
Síntesis de producción de inoculante
Medio Ashby (estéril)
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Producción de inoculantes
Mangueras
Tapones
Fermentadores
Filtro de aire
Mechero
Aireador
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Actividades

• Micorrizas observar raíces de pino
• Azospirillum observar halos y movilidad
• Risobios observar bacteroides y bacterias
• Producción de inoculantes instalar un fermentador