EXAMENS BIOLOGIQUES ET BACTERIOLOGIQUES DE DETECTION D

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EXAMENS BIOLOGIQUES ET BACTERIOLOGIQUES DE
DETECTION DUN AGENT INFECTIEUX.

• Compétence 4 UE 2.5 S3
• Processus inflammatoire et infectieux.

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PLAN

• EXAMENS BIOLOGIQUES
• EXAMENS BACTERIOLOGIQUES
• IDR, QUANTIFERON BK.

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EXAMENS BIOLOGIQUES
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EXAMENS BIOLOGIQUES

• Hémogramme ou marqueur biologique non spécifique
• Marqueurs biologiques spécifiques de
  linflammation
• Autres marqueurs

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HEMOGRAMME
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EXAMENS BIOLOGIQUES HEMOGRAMME

• Obtenu par ponction veineuse (prescription
  médicale de NFSPlaq)
• Marqueurs non spécifiques permettent de
  suspecter une réaction inflammatoire mais ne la
  caractérisent pas

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EXAMENS BIOLOGIQUES HEMOGRAMME
Cellules mesurées Normales Modification si inflammation
Hématies (érythrocytes) 5 à 6 millions/mm³ Diminution (anémie) Destruction des hématies (hémolyse) par des agents infectieux
Leucocytes 6000 à 7000 / mm³ Augmentation (hyper leucocytose)
Plaquettes 150 000 à 400 000 / mm³ - Augmentation (thrombocytose) états inflammatoires chroniques - Diminution ( thrombopénie) infections bactériennes (méningocoques ou pneumocoques), infection virale (varicelle, rougeole, rubéole..), paludisme
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MARQUEURS SPECIFIQUES
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VITESSE DE SEDIMENTATION
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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• Confirment une réaction inflammatoire sans en
  préciser lorigine
• Vitesse de sédimentation
• Étudie la vitesse de la chute des globules
  rouges.Mesure la hauteur de la couche de plasma
  au-dessus des hématies qui sédimentent au bout de
  1 heure.
• Varie selon lâge , le sexe, la viscosité
  sanguine
• Prélèvement veineux.

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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• La grossesse et les périodes menstruelles
  augmentent les chiffres
• Normes lt 5mm (1 heure) et lt 10 mm (2 heure)
  en moyenne pour un adulte
• Mais peut atteindre 30mm chez la personne de plus
  de 70 ans

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CRP
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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• CRP (Protéine C réactive)
• Protéine synthétisée par le foie
• Sélève en quelques heures lors dun processus
  inflammatoire
• Prélèvement veineux sur tube sec
• Norme entre 5 et 10 mg/l (augmentation normale
  lors de grossesse, traitement oestroprogestatif
  et 48 h. après intervention chirurgicale)

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PCR
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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• PCR (Polymérase Chain Reaction)
• Méthode de duplication de fragments dADN in
  vitro permet de reconnaître le germe à partir
  de ses gênes spécifiques
• Intérêt majeur dans la mesure de la charge virale
  dans le sang (bilan initial de linfection par
  VIH, hépatites) ou dans le LCR (herpès, zona..)

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RECHERCHE DANTIGENES
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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• Détection des antigènes recherche spécifique
  pour confirmation
• Prélèvement veineux
• Exemples
• AgHBS hépatite
• AgP24 VIH
• AgCMV

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SEROLOGIE / SERODIAGNOSTICS
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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• Sérologie
• étude des sérums, de leurs propriétés, de leurs
  particularités immunitaires
• Révèle la réaction immunitaire développée par
  lhôte, en recherchant et en titrant des
  anticorps apparus dans le sérum
• Permet de diagnostiquer une maladie infectieuse
  sérodiagnostic

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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• Les sérologies peuvent rechercher
• Des bactéries mycoplasmes, syphilis
  (TPHA-VDRL)..
• Des virus VIH (Ac anti VIH1 et antiVIH 2),
  hépatites B (Ac anti VHB)
• Des parasites toxoplasmose (Ac spécifiques du
  Toxoplasma gondii)..

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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• 2 moyens pour étudier la sérologie
• Diagnostic direct
• recherche de lagent pathogène responsable par
  mise en culture
• Différentes techniques au microscope sans puis
  avec colorants, par immunofluorescence, mise en
  culture

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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• Diagnostic indirect
• recherche de la réponse immunitaire spécifique
  de lorganisme à lagent pathogène . Met en
  évidence la réponse de lorganisme à linfection
  par la présence danticorps spécifiques
• Différentes techniques recherche dantigènes,
  biologie moléculaire (PCR polymerase Chain
  Reaction)

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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• Quelques exemples
• Sérologie de Widal thyphoïde
• Sérologie de Bordet -Wasermann syphillis
• Sérologie de Wright brucellose
• Sérologie Paul Bunnel mononucléose infectieuse

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FROTTIS SANGUIN / GOUTTE EPAISSE
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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• Frottis sanguin
• Prélèvement veineux, spécifique au paludisme
• Une goutte de sang est déposée sur une lame et
  lue au microscope permet de mettre rapidement
  en évidence la présence du parasite spécifique
  (plasmodium)

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EXAMENS BIOLOGIQUES MARQUEURS SPECIFIQUES

• Goutte épaisse
• Prélèvement veineux, spécifique au paludisme
• Recherche du parasite par une technique de
  concentration puis de coloration des hématies
• Résultat au bout de 24 heures
• Moins spécifique que le frottis

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AUTRES MARQUEURS
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EXAMENS BIOLOGIQUES AUTRES MARQUEURS

• Protéines non spécifiques qui peuvent se modifier
  si inflammation
• Leur dosage peut avoir valeur dorientation
  diagnostique
• Haptoglobine, fibrinogène,complément, protéines
  totales

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PROTEINES NON SPECIFIQUES NORMES MODIFICATION SI INFLAMMATION
Haptoglobine 2g/L Augmentation
Fibrinogène 2 à 5 g/L Augmentation (peut aller jusquà 10 12 g/L)
Complément total (CH50) ou fractions C3 et C4 protéines sériques intervenant dans limmunité CH 50 25 à 100 U/mL C3 (fraction) 0,8 à 1,6 g/L C4 (fraction) 0,2 à 0,5 g/L Augmentation
Protéines totales 60 à 80 g/L Augmentation
Albumine protéine qui représente 55 des protéines plasmatiques totales 40g/L Augmentation
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES

• La recherche bactériologique permet de confirmer
  une étiologie infectieuse dorigine bactérienne
• Des examens spécifiques sont préconisés pour
  identifier les bactéries en fonction de la
  localisation du foyer infectieux
• Tout prélèvement qui nécessite une mise en
  culture doit être réalisé de manière aseptique
  afin déviter tout risque de contamination
  (résultats faussés)

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES

• Les examens spécifiques sont les suivants
• Hémocultures
• Examen cytobactériologique des urines
• Ponction liquidienne pleurale, lombaire
• Écouvillonnages
• Examen cytobactériologique des secrétions
  endobronchiques
• Coproculture

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HEMOCULTURES
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES HEMOCULTURES

• Prélèvement sanguin stérile, pour mise en culture
  immédiate, sur prescription médicale

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES HEMOCULTURES

• Les indications
• Hyperthermie gt 385
• Hypothermie lt 365
• Frissons
• Sepsis ou choc septique
• Fièvre prolongée inexpliquée

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES HEMOCULTURES

• Déroulement
• Se fait pendant un pic fébrile
• Lavage antiseptique des mains (bétadine scrub)
• Asepsie des bouchons (bétadine alcoolique)
• Port de gants
• Asepsie en 5 temps du point de ponction

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES HEMOCULTURES

• Toujours prélever dabord le flacon aérobie, puis
  le flacon anaérobie
• Homogénéisation par 2 ou 3 retournements
• Retirer les gants
• Étiqueter les flacons en dehors des codes barres
• Noter heure du prélèvement

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ECBU
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES ECBU

• Recherche une infection située sur lensemble de
  larbre urinaire
• Recueil aseptique des urines en vue de déterminer
  la présence ou non de germes
• Présence de germes si
• Femmes gt 105 germes /mL
• Hommes gt 10³ germes/mL

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES ECBU

• Une bactériurie gt 10³ germes/mL signe en général
  une infection urinaire si un seul germe est
  retrouvé (sinon, contamination)
• Une bactériurie lt 10³ germes/mL exclut
  généralement la possibilité dune infection.

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES ECBU

• Déroulé
• Se fait de préférence avant tout traitement anti
  infectieux
• Prévoir lexamen pour la première miction du
  matin (urines plus concentrées, germes plus
  développés)

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES ECBU

• Assurer une hygiène des organes génitaux externes
  pour éviter toute souillure
• Acheminer lexamen rapidement au laboratoire
• Laspect macroscopique des urines recueillies
  peut déjà renseigner sur la présence de germes ou
  pas.
• LIDE peut être amené(e) à faire un ECBU par
  sondage vésical (prescription médicale)

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES ECBU
Urines claires
Urines troubles
Hématurie
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PONCTION LOMBAIRE
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• Acte médical qui consiste à prélever du liquide
  céphalo-rachidien, en introduisant un trocart
  entre les vertèbres L3 et L4 ou L4 et L5
• Examen fondamental pour toutes les infections du
  système nerveux (méningite par exemple)

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE
Trocarts pour PL
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• Le liquide céphalo-rachidien est un liquide
  circulant à l'intérieur même du système nerveux
  central dans les ventricules cérébraux et le
  canal médullaire qui est un fin canal traversant
  la moelle épinière dans toute sa longueur.

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• Le LCR est examiné en bactériologie pour
  identifier des germes par mise en culture
• Peut aussi faire lobjet dun examen
• Direct (microscope)
• Biochimique recherche de glucose, protides
  chlore dont la quantité varie en fonction de
  linfection
• Cytologiques recherche la présence de
  différentes variétés de cellules sanguines

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• Geste invasif et parfois douloureux qui génère
  beaucoup danxiété (prescription de patch
  analgésique avant le geste)
• Déroulement
• Geste médical
• IDE aide opératoire ressource pour la
  personne (bien-être, communication)

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• Déroulement
• Geste médical
• IDE aide opératoire ressource pour la
  personne (bien-être, communication)
• Aide à linstallation de la personne position
  assise, jambes pendantes, un oreiller sur
  labdomen,dos rond

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• Complications
• Céphalées intenses survenant 12 à 24 heures après
  la ponction
• Malaise vagal
• Risque infectieux au niveau du point de ponction
• Vertiges
• Rachialgies

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• Contre indications
• Hypertension intracrânienne
• Infection au niveau du point de ponction
• Affection neurologique
• Trouble de lhémostase

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• Rôle infirmier post ponction
• Installer le patient en décubitus latéral
• Lui faire respecter un repos strict au lit
  pendant 24 heures
• Veiller à une hydratation suffisante
• Évaluer la douleur et faire respecter les
  prescriptions dantalgiques

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• LCR liquide clair,  eau de roche 
• Différents aspects du LCR
• Trouble infection
• Purulent méningite purulente
• Jaune saignement ancien (hyperprotéinorachie,
  hépatite)
• Hémorragique saignement traumatique, hémorragie
  méningée

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE

• Composition du LCR
• Protéinorachie lt 0,40 g/L
• Glycorachie ½ de la glycémie, 2,8 à 4?2
  mmôles/L
• Leucocytes lt 5/mm³
• Hématies 0/mm³

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES PONCTION LOMBAIRE
LCR liquide clair  eau de roche 
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ECOUVILLONNAGES
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES ECOUVILLONNAGES

• Écouvillon matériel stérile permettant de
  pratiquer des prélèvements au niveau
• Des conjonctives
• Du nez
• De la gorge
• De la peau
• De la verge
• Du vagin

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES ECOUVILLONNAGES

• But recherche dune infection locale pour
  identifier le germe et adapter le traitement (sur
  prescription)

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ECBC
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES SECRETIONS
ENDOBRONCHIQUES

• Recueil aseptique de crachats ECBC
• Important dobtenir une expectoration en
  provenance du foyer infectieux le patient doit
  fournir un effort de toux pour recueillir le
  crachat

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES SECRETIONS
ENDOBRONCHIQUES

• Si difficultés recueil par tubage gastrique
  (secrétions bronchiques dégluties pendant la
  nuit) ou par fibroscopie bronchique (aspiration
  bronchique, brossage bronchique, lavage
  broncho-alvéolaire)

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COPROCULTURES
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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES COPROCULTURE

• Recueil de selles fraîches dans pot stérile pour
  mise en culture et identification des germes
• Indication
• Diarrhées
• Syndrome dysentérique

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EXAMENS BACTERIOLOGIQUES COPROCULTURE
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IDR ou INTRADERMOREACTION
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IDR

• Test cutané qui explore lhypersensibilité de
  type retardée induite par linjection de
  composants antigéniques de Mycobactérium
  tuberculosis. La source antigénique utilisée est
  la tuberculine.
• Evalue si une personne est atteinte de
  tuberculose latente.

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IDR

• Technique pour réaliser une IDR
• LIDR nécessite une technique parfaite pour être
  valide
• injection strictement intradermique et exsangue à
  la face antérieure de lavant-bras
• de 0,1 ml de la solution tuberculinique
• lecture à la 72ème heure par la mesure du
  diamètre de linduration.

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IDR

• La réaction est jugée négative lorsque le
  diamètre dinduration est inférieur à 5 mm après
  injection intradermique de 0,1 ml de tuberculine
  Tubertest R 50 TU/ml au niveau de la face
  antérieure de lavant-bras.
• La lecture seffectue idéalement à la 72ème heure
  mais peut être différée jusquau 5ème jour chez
  les personnes âgées chez qui la réaction peut se
  développer plus lentement.

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IDR

• Indications (telles quelles sont définies par le
  Conseil supérieur dhygiène publique de France.)
• Vérification de labsence de tuberculose avant
  une primo-vaccination, sauf chez les nourrissons
  de moins de 3 mois
• enquête autour dun cas de tuberculose
• aide ponctuelle au diagnostic de tuberculose
• test de référence dans le cadre de la
  surveillance des membres des professions à
  caractère sanitaire ou social exposés à la
  tuberculose ( énumérés dans les articles R.
  3112-1 et R. 3112-2 du code de la santé
  publique.)

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IDR

• LIDR peut être faussement négative au cours
  dauthentiques tuberculoses
• Injection trop profonde, dune quantité trop
  faible de tuberculine, dune tuberculine qui a
  perdu son activité antigénique
• Erreur de lecture trop retardée
• Tuberculose en phase dincubationphase
  préallergique de 6 à 8 semaines après un contact
  infectant.

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IDR

• Certains cas de tuberculose pulmonaire.
• Tuberculose miliaire lIDR est souvent négative
  car lhypersensibilité est non acquise.
• Dépression de limmunité cellulaire.
• Certaines infections virales rougeole, etc

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IDR

• Réaction croisée avec le BCG
• La vaccination par le BCG positive lIDR.
• 2 à 3 mois après vaccination le diamètre
  dinduration est supérieur ou égal à 5 mm.
• La positivité est parfois forte avec un diamètre
  dinduration supérieur ou égal à 10 mm durant les
  premières années qui suivent la vaccination par
  le BCG.
• .

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IDR

• Ainsi lIDR est considérée comme non contributive
  pour faire le diagnostic de tuberculose-infection
  latente dans les 10 ans qui suivent la vaccination

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IDR
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QUANTIFERON
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QUANTIFERON BK

• Remplace de plus en plus lIDR car plus fiable
• Destiné à diagnostiquer les tuberculoses latentes
  (en aucun cas les tuberculoses actives)

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QUANTIFERON

• Le système QuantiFERON BK fait appel à des tubes
  spéciaux pour le prélèvement
• du sang entier.
• Lincubation du sang seffectue dans les tubes
  pendant 16 à 24 heures.
• Ensuite, le plasma est prélevé et analysé pour
  détecter la présence dIFN-g produits en réponse

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REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES

• Modulopratique  Maladies infectieuses  -
  Editions Estem.
• Les essentiels en IFSI  Processus inflammatoires
  et infectieux  - Editions Masson.
• Nouveaux dossiers de lIDE  Processus infectieux
  et hygiène  - Editions Maloine.