Enzimologija/Metabolisms

1
Enzimologija/Metabolisms Lekcijas
saturs Brivo radikalu procesi. Oksidativais
stress. Lipidu peroksidacija. Antioksidanti.
Selenoproteini. Slapekla oksida
sintazes Molekularas biologijas
(biokimijas)katedra 2009/2010. akad.gads
2
Oksidoreduktažu
klasifikacija I 1.1.
Iedarbojas ar donora - OH grupu 1.2. Iedarbojas
ar donora aldehid- vai ketogrupu 1.2.3.2.
Ksantinoksidaze 1.3. Iedarbojas uz CH-CH grupam
1.3.99.1.Sukcinatdehidrogenaze 1.9. Iedarbojas
ar donora hema grupu 1.9.3.1. Citohromoksidaze 1.
11. Iedarbojas ar peroksidu ka akceptoru 1.11.1.6.
Katalaze 1.11.1.7. Peroksidaze 1.13. Iedarbojas
ar vienu donoru, iesledzot molekularu
skabekli - oksigenazes (dioksigenazes) 1.13.11.11.
Triptofan -2,3 dioksigenaze 1.13.11.12.
Lipoksigenaze
3
Oksidoreduktažu klasifikacija
II 1.14. Iedarbojas ar
diviem donoriem, iesledzot molekularu skabekla
vienu atomu substrata, bet otru
udeni-monooksigenazes 1.14.14. Otrs donors ir
flavoproteins 1.14.14.1. Nespecifiska
monooksigenaze, mikrosomu P450 1.14.16. Otrs
donors ir pteridins 1.14.16.1.Fenilalanin-tetrehi
drobiopterinO2 -oksidoreduktaze 1.14.17. Otrs
donors ir askorbats 1.14.17.1. Dopamina
monooksigenaze 1.15. Darbojas uz superoksida
radikalu ka akceptoru 1.15.1.1.
Superoksiddismutaze 1.19.
4
Reaktivas skabekla formas
Reactive oxygen species ROS
5
Ka notiek skabekla reducešanas ?


6
Reakciju piemeri, kuras veidojas brivie
radikali 1.Eritrocitos pie hemoglobina
oksidacijas lidz methemoglobinam 2.Citohroma
P450 reduktazes gaita 3.Ksantinoksidazes
reakcija (K.F.1.2.3.22)(agrak K.F.1.2.3.2) 4.NADP
H oksidaze neitrofilajos leikocitos - nozime
fagocitoze 5.Fentona reakcija (neenzimatiska)
6.Harbera-Veisa
reakcija, Fe katalizeta
7.Slapekla oksida veidošanas un
darbiba
7
Iespejama mikrosomalas oksidacijas
sistemas darbiba O2
H2 O Substrats-CH3
Substrats CH2 OH
Otrs H2 donors
oksidets donors

RCH3

NADPH2 FP
Fe2 CitP450
RCH2OH
oksidets
H2O
Nehemina dzelzs
Adrenodoksins

NAD
FPH2 Fe3
Cit P450
reducets 2e-1
O2 2H
8
(No Transcript)
9
4.NADPH oksidaze neitrofilajos leikocitos ir
svarigakais fagocitozes enzims NADPH.H
O2
OH.

Fe2
Flavocitohroms b558 O.2- H2 O2


Cl- NADP

HOCl
Brivie radikali ir mikrobicidali - nodrošina
fagocitu speju nonavet mikrobus
10
Galvenas reakcijas,kuras elimine brivos
radikalus 1. Spontana dismutacija 2.
Superoksiddismutazes reakcija (K.F.1.15.1.1.)
3. Glutationperoksidaze (K.F.1.11.1.9.) 4.
Peroksidaze (K.F.1.11.1.7.) 6. Katalaze
(K.F.1.11.1.6.) 7. Neitrofilo leikocitu
mieloperoksidaze
11
(No Transcript)
12
(No Transcript)
13
(No Transcript)
14
Selenoproteini Visos
selenoproteinos selens iesaistas ka
selenocisteins HSe- CH2CHNH2COOH Oksidoreduktaze
s selenocisteins ietilpst aktivaja
centra Atseviškos proteinos terminacijas kodona
UGA vieta inkorpore selenocisteinu 1.
Glutationperoksidaze (GPx) ar lidzigu
aktivitati izškir 2 enzimus KF. 1.11.1.9. un
KF.1.11.1.12 eksiste ari vairakas
izoformas a) cellulara GPx
b)
fosfolipidu GPx (apzime PH-GPx)
c)
ekstracellulara GPx
d)
gastrointestinala Gi-GP 2. Iodtironindejodinaze
KF.3.8.1.4 vismaz tris tipi
L-tiroksins udens
3,5,3-trijodtironins jodids 3. Tioredoksin
reduktaze KF.1.8.1.9. (Piedalas ribozes
reducešana par dezoksiribozi) 4. Plazmas
selenoproteins P (50 plazmas selena, satur 10
selena atomus) 5. Muskulu selenoproteins W
15
(No Transcript)
16
Biokimiskas metodes ROS analizem 1.
Hemiluminescences petijumi dažados objektos un
metodes dažadie varianti 2. Konjugeto dienu
noteikšana 3. Malonskabes dialdehida noteikšana
ar tiobarbiturskabi 5. Enzimu aktivitates
a) superoksiddismutaze b) katalaze
c) glutationreduktaze d)
glutationperoksidaze 6. Selena daudzums
17
Dabigie organisma antioksidanti
18
Reaktivas slapekla formas
Reactive nitrogen species RNS
19

Slapekla oksida sintazes Slapekla monoksids. .NO
, ko parasti sauc par slapekla oksidu ir brivais
radikals , kurš generejas biologiskas sistemas
un darbojas ka signalmolekula daudzos
fiziologiskos procesos - asinsspiediena kontrole,
ka neirotranmitters, bet augsta koncentacija ka
defensivs citotoksins. Tas veidojas no
arginina. EC 1.14.13.39 Nitrita oksida sintaze,
NO sintaze, NO sintetaze, NOS Ziditajos ir tris
izoenzimi nNOS - NOS1- 29 eksoni, 1429-1433 ask.
- smadzenes,skeleta muskulatura iNOS - NOS2- 27
eksoni, 1144-1153 ask. - škistošs,
inducejams eNOS - NOS1- 26 eksoni, 1203-1205 ask.
- endotelija, membranu asociets Koenzimi1) FAD
2) FMN 3)
Hems 4) Tetrahidrobiopterins
5) Ca- kalmodulins
(CaM) Katalizeta reakcija NH2

NH2 Arg-C NADPH2O2
Oksiarginins-C 1/2NADPH2O2
.NO citrulins NH
N-OH

20
(No Transcript)
21
(No Transcript)
22
(No Transcript)
23
Nitritoksid sintazes katalizeta reakcija
24
Ziditaju nitritoksid sintazes, to geni un
ipašibas
25
Nitritoksid sintažu ipatnibas un elektronu plusma
to darbibas laika
26
Sinala transdukcjas cela no slapekla oksida lidz
efektam ir starpsavienojumi, kuru darbibu
var regulet ar medikamentiem
27
(No Transcript)