TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS (TSA) OU ANTIBIOGRAMA - PowerPoint PPT Presentation

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TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS (TSA) OU ANTIBIOGRAMA

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TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS (TSA) OU ANTIBIOGRAMA Thiago C. Nascimento Conceito: Teste para verificar o comportamento dos microrganismos ... – PowerPoint PPT presentation

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Title: TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS (TSA) OU ANTIBIOGRAMA


1
TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS
(TSA) OU ANTIBIOGRAMA
Thiago C. Nascimento
2
Conceito Teste para verificar o comportamento
dos microrganismos (sensibilidade ou resistência)
in vitro, frente a diversos antimicrobianos,
para a escolha do antimicrobiano ideal.
  • Indicações
  • Para microrganismos isolados e identificados
    como agentes causadores de infecção
  • Quando o microrganismo causador da infecção
    apresenta, estatisticamente, grande variabilidade
    no espectro de resistência ou tendência à mesma.
  • Ex Staphylococcus aureus, Pseudomonas sp.

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Dispensado Para microrganismos cuja
sensibilidade não apresenta variação ao longo do
tempo. Ex Neisseria meningitidis, Streptococcus
pyogenes (sensíveis à penicilina G)
Os resultados servem de base para
  1. Nortear a escolha do agente antimicrobiano mais
    adequado
  2. Predizer a chance de sucesso de um esquema
    terapêutico.

4
O diagnóstico laboratorial das doenças
infecciosas começa com a indicação clínica
adequada do exame microbiológico, o que requer
conhecimento da epidemiologia e da fisiopatologia
do processo infeccioso
Cultura Antibiograma
5
(No Transcript)
6
(No Transcript)
7
Rede Brasileira de Monitoramento da Resistência
Microbiana (ANVISA)
Laboratórios brasileiros
CLSI
8
Tipos de Teste
1. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar
2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
  1. Diluição em tubo ou em placa
  2. Teste E (Teste epsilométrico).

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1. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
Princípio medida do halo de inibição (mm)
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1. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
11
2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
CIM
  • Diluição em tubo

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
11 12
0,0625µg/mL -1024,0 µg/mL
12
2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
  • Diluição em placa

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0,0 µg/mL
0,0625 µg/mL
0,125µg/mL
?
0,25µg/mL
0,5µg/mL
1,0µg/mL
2,0µg/mL
4,0µg/mL
8,0µg/mL
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2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
B. Teste E (Teste epsilométrico).
15
2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
B. Teste E (Teste epsilométrico).
Vários estudos demonstram que a CIM determinada
pelo Etest apresenta concordância com os métodos
de diluição em ágar ou tubo, para dierentes
antimicrobianos, em geral, com uma variação
permitida de /- 1 diluição.
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2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
B. Teste E (Teste epsilométrico).
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DEMONSTRAÇÃOE INTERPRETAÇÃO
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2. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
Halo de leitura em mm
  • Ausência de halo resistência
  • Presença de halo sensibilidade ou resistência

Leitura
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2. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
Medir os halos de cada placa distribuída
Anotar os resultados
Consultar o CLSI
Resultado
  • Sensível
  • Resistente
  • Resistência Intermediária

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Correlação entre tamanho do halo e CIM
Quando os halos de inibição são correlacionados
aos valores logarítmicos da CIM, pela análise de
regressão linear, encontra-se uma relação linear
consistente demonstrando que o halo de inibição é
inversamente proporcional à CIM daquele
antimicrobiano
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Do ponto de vista clínico, o que significa dizer
que uma bactéria é sensível, resistente, ou
apresenta resistência intermediária?
  • Resistente significa que a bactéria não é
    inibida pelas concentrações de antimicrobiano
    alcançadas pelas doses habituais e há grande
    chance de falha terapêutica a bactéria cresce
    na concentração sérica máxima do antimcrobiano
    no paciente
  • Resistência intermediária isolados cujas CIMs
    são próximas à concentração sérica máxima obtida
    por aquele antimicrobiano
  • Sensível a categoria sensível implica que a
    infecção causada pela bactéria isolada pode ser
    adequadamente tratada com a dosagem recomendada
    para aquele tipo de infecção e para aquela
    espécie bacteriana, portanto o antimicrobiano
    pode ser utilizado para o tratamento

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Os resultados dos TSA devem ser muito bem
interpretados pela equipe do laboratório de
microbiologia, antes que o relatório final seja
emitido ao médico.
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Fatores que influenciam o resultado do TSA
  • 1. Composição química do meio de cultura ágar
    Muller-Hinton, com 4 a 6 mm de espessura
  • 2. Densidade do inóculo 108 células/mL
  • 3. Temperatura 35ºC a 37ºC
  • 4. Concentração dos antimicrobianos nos discos
  • 5. Validade e conservação dos discos
  • 6. Ação e estabilidade da droga
  • 7. Tempo de incubação 18 a 24h

6.1 . Algumas drogas podem sofrer hidrólise nas
primeiras horas de incubação
6.2 . Velocidade de crescimento maior que
velocidade de difusão da droga
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Antimicrobianos de espectro estreito x
Antimicrobianos de amplo espectro
Antimicrobianos de escolha x Antimicrobianos
de reserva
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Triste Realidade
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(No Transcript)
27
(No Transcript)
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(No Transcript)
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Obrigado
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