Title: TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS (TSA) OU ANTIBIOGRAMA
1TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS
(TSA) OU ANTIBIOGRAMA
Thiago C. Nascimento
2Conceito Teste para verificar o comportamento
dos microrganismos (sensibilidade ou resistência)
in vitro, frente a diversos antimicrobianos,
para a escolha do antimicrobiano ideal.
- Indicações
- Para microrganismos isolados e identificados
como agentes causadores de infecção - Quando o microrganismo causador da infecção
apresenta, estatisticamente, grande variabilidade
no espectro de resistência ou tendência à mesma. - Ex Staphylococcus aureus, Pseudomonas sp.
3Dispensado Para microrganismos cuja
sensibilidade não apresenta variação ao longo do
tempo. Ex Neisseria meningitidis, Streptococcus
pyogenes (sensíveis à penicilina G)
Os resultados servem de base para
- Nortear a escolha do agente antimicrobiano mais
adequado - Predizer a chance de sucesso de um esquema
terapêutico.
4O diagnóstico laboratorial das doenças
infecciosas começa com a indicação clínica
adequada do exame microbiológico, o que requer
conhecimento da epidemiologia e da fisiopatologia
do processo infeccioso
Cultura Antibiograma
5(No Transcript)
6(No Transcript)
7Rede Brasileira de Monitoramento da Resistência
Microbiana (ANVISA)
Laboratórios brasileiros
CLSI
8Tipos de Teste
1. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar
2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
- Diluição em tubo ou em placa
- Teste E (Teste epsilométrico).
91. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
Princípio medida do halo de inibição (mm)
101. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
112. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
CIM
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
11 12
0,0625µg/mL -1024,0 µg/mL
122. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
130,0 µg/mL
0,0625 µg/mL
0,125µg/mL
?
0,25µg/mL
0,5µg/mL
1,0µg/mL
2,0µg/mL
4,0µg/mL
8,0µg/mL
142. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
B. Teste E (Teste epsilométrico).
152. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
B. Teste E (Teste epsilométrico).
Vários estudos demonstram que a CIM determinada
pelo Etest apresenta concordância com os métodos
de diluição em ágar ou tubo, para dierentes
antimicrobianos, em geral, com uma variação
permitida de /- 1 diluição.
162. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
B. Teste E (Teste epsilométrico).
17DEMONSTRAÇÃOE INTERPRETAÇÃO
182. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
Halo de leitura em mm
- Ausência de halo resistência
- Presença de halo sensibilidade ou resistência
Leitura
192. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
Medir os halos de cada placa distribuída
Anotar os resultados
Consultar o CLSI
Resultado
- Sensível
- Resistente
- Resistência Intermediária
20 Correlação entre tamanho do halo e CIM
Quando os halos de inibição são correlacionados
aos valores logarítmicos da CIM, pela análise de
regressão linear, encontra-se uma relação linear
consistente demonstrando que o halo de inibição é
inversamente proporcional à CIM daquele
antimicrobiano
21 Do ponto de vista clínico, o que significa dizer
que uma bactéria é sensível, resistente, ou
apresenta resistência intermediária?
- Resistente significa que a bactéria não é
inibida pelas concentrações de antimicrobiano
alcançadas pelas doses habituais e há grande
chance de falha terapêutica a bactéria cresce
na concentração sérica máxima do antimcrobiano
no paciente
- Resistência intermediária isolados cujas CIMs
são próximas à concentração sérica máxima obtida
por aquele antimicrobiano
- Sensível a categoria sensível implica que a
infecção causada pela bactéria isolada pode ser
adequadamente tratada com a dosagem recomendada
para aquele tipo de infecção e para aquela
espécie bacteriana, portanto o antimicrobiano
pode ser utilizado para o tratamento
22Os resultados dos TSA devem ser muito bem
interpretados pela equipe do laboratório de
microbiologia, antes que o relatório final seja
emitido ao médico.
23Fatores que influenciam o resultado do TSA
- 1. Composição química do meio de cultura ágar
Muller-Hinton, com 4 a 6 mm de espessura - 2. Densidade do inóculo 108 células/mL
- 3. Temperatura 35ºC a 37ºC
- 4. Concentração dos antimicrobianos nos discos
- 5. Validade e conservação dos discos
- 6. Ação e estabilidade da droga
- 7. Tempo de incubação 18 a 24h
6.1 . Algumas drogas podem sofrer hidrólise nas
primeiras horas de incubação
6.2 . Velocidade de crescimento maior que
velocidade de difusão da droga
24Antimicrobianos de espectro estreito x
Antimicrobianos de amplo espectro
Antimicrobianos de escolha x Antimicrobianos
de reserva
25Triste Realidade
26(No Transcript)
27(No Transcript)
28(No Transcript)
29Obrigado