Microbiolog

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MicrobiologíaAplicadaTrabajo Práctico N1

• Estudios de la actividad antimicrobiana

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Antecedentes históricos. Descubrimiento de los
antibióticos
Alexander Fleming (1928) Observó que el hongo
Penicillium notatum impedía el crecimiento de
Staphylococcus aureus Florey y Chain (1939)
aislaron Penicilina G
Penicillium notatum
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Antecedentes históricos. Descubrimiento de los
antibióticos
Foto original tomada por Fleming
Foto actual
El hongo Penicillium notatum impide el
crecimiento de Staphylococcus aureus
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Antibióticos

• Antimicrobiano
• Sustancia capaz de actuar sobre los
  microorganismos, inhibiendo su crecimiento o
  destruyéndolos.
• Antibiótico
• Sustancia producida por el metabolismo de
  organismos vivos, principalmente hongos
  microscópicos y bacterias, que posee la propiedad
  de inhibir el crecimiento o destruir
  microorganismos.
• Según su origen, los antibióticos pueden ser
• Biológicos (naturales) sintetizados por
  organismos vivos, ej. Penicilina, Cloranfenicol.
• Semisintéticos obtenidos por modificación
  química de antibióticos naturales, ej.
  Ampicilina.
• Sintéticos generados mediante síntesis química,
  ej. Sulfas.

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Evaluación de la susceptibilidad a un antibiótico
En el laboratorio se puede estudiar la
susceptibilidad a antimicrobianos que presentan
bacterias aisladas desde una muestra
biológica... La susceptibilidad a
antimicrobianos, junto con la identidad de la
bacteria aislada y ciertos factores del hospedero
constituyen las bases para la elección de una
terapia antimicrobiana adecuada
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Definiciones
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Antibiograma por dilución

• Técnica de referencia en la mayoría de los
  estudios clínicos de susceptibilidad a
  antimicrobianos.
• Entrega un resultado cuantitativo, ya que permite
  determinar la concentración inhibitoria mínima
  (CIM).
• Se puede realizar en medio líquido (dilución en
  caldo) o en medio sólido (dilución en agar).
• Método complejo y de alto costo.

Lectura del CIM
CIM
Dilución seriada en caldo
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Antibiograma por difusión
(Técnica de Kirby-Bauer)

• Es el método más usado
• Es práctico y sencillo de realizar e implementar
• Permite analizar un gran número de antibióticos
  al mismo tiempo y bajo las mismas condiciones
• Entrega un resultado cualitativo (bacteria
  sensible o resistente)

Bauer AW, Kirby WM, Sherris JC, Turck M.
Antibiotic susceptibility testing by a
standardized single disk method. Am J Clin
Pathol. 1966 Apr45(4)493496.
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Antibiograma por difusión
(Técnica de Kirby-Bauer)
Resistente (No hay halo de inhibición)
Análisis de varios antibióticos en un mismo
ensayo
Sensible (Presencia de halos de inhibición)
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Factores que afectan la actividad antibacteriana
in vitro

• pH del medio de cultivo algunos antibióticos son
  activos a pH ácido (nitrofurantoína) y otros lo
  son a pH alcalino (aminoglucósidos).
• Componentes del medio de cultivo pueden
  antagonizar al antibiótico (extracto de levadura
  antagoniza a sulfonamidas).
• Estabilidad del medicamento algunos antibióticos
  se inactivan a la temperatura de cultivo
  (clortetraciclina, en menor grado penicilina)
• Tamaño del inóculo si hay muchas bacterias, la
  susceptibilidad es menor y pueden aparecer
  mutantes resistentes.
• Tiempo de incubación si es muy breve los m.o. no
  mueren si es muy largo, pueden aparecer mutantes
  resistentes o inactivarse el medicamento.