Pr

1
PLACE DES AUTO AC DANS LE DIAGNOSTIC DES
PATHOLOGIES AUTOIMMUNES
Valérie GOUILLEUX-GRUART
2
MALADIES AUTO-IMMUNES (MAI)
Maladies dues à laction pathogène de Lc T et /
ou Lc B spécifiques dAuto-Ag

• MAI spécifiques dorganes (hépatites
  auto-immunes, pemphigus, myasthénie thyroïdites)
• MAI non spécifiques dorganes (LED, PR,
  sclérodermie ..)
• MAI possiblement auto-immune (Sclérose en
  plaques, maladie de Crohn, rectocolite
  hémorragique.)

Auto-Ac Rôle pathogène / Témoin de la maladie
ou conséquence
3
INTÉRÊTS DE LA RECHERCHE DAUTO AC

• Marqueurs sensibles voire précoces de MAI
• Élément essentiel du diagnostic positif dans de
  nombreuses MAI
• Diagnostic différentiel des connectivites
• Caractérisation de formes cliniques particulières

• 180 spécificités antigéniques différentes
• 2 notions importantes SPECIFICITE
• SENSIBILITE

4
SPECIFICITE / SENSIBILITE...

• Ac  critère  diagnostique
• Ex Ac anti centromère et CREST
• Ac anti cardiolipides et SAPL
• Ne veut pas dire forte spécificité
• (ACL dans SAPL Lupus Infections .)

• Ac à valeur diagnostique élevée
• Ex Ac anti MAG et neuropathie sensitive
  démyélinisante
• Ac anti-PR3 et maladie de Wegener
• Ac anti-Scl 70
• Forte spécificité

- Ac important pour le diagnostic mais peut être
négatif Ex Ac anti-DNA
Ac anti-mitochondries de type 2 Ac
anti-endomysium

• Ac sans valeur diagnostique
• Ex Ac anti-fuseau mitotique
• Ac anti-bordure en brosse
• Ac anti-muscle strié ..

5
METHODES DETUDES

• IF ou Immunofluorescence directe (recherche de
  dépôts dauto-Ac dans les tissus)

• IFI ou Immunofluorescence indirecte (cellules
  HEp2 ANA, Ac anti-tissus..)

• RIA ou Radio Immuno Assay Test de Farr Ac
  anti-DNA

6
METHODES DETUDES (suite)

• Précipitation en milieu gélifié recherche dAc
  anti-Ag solubles ou anti-ECT (Ouchterlony )

• ELISA Ac anti-DNA, Ac anti-cardiolipides ou
  ACL, anti-MPO.

7
METHODES DETUDES (suite)

• Immunoblot / western blot gp 210

• Agglutination Test de Coombs
• Réaction de Waaler-Rose
• Test au latex

INTERPRETATION DES RÉSULTATS

• Nature de lexamen (IFI, ELISA..)
• Titre des Ac
• Inverse de la dilution du sérum ou
• Unités arbitraires
• (seuil de positivité, variation dune dilution)
• Contexte clinique (Age, signes cliniques..)
• Sensibilité / spécificité du marqueur
• Valeur diagnostique
• Suivi évolutif

8
AC ANTI-NUCLÉAIRES
Ac anti-cytoplasme
Enzymes Hélicase, PCNA topo isomérase 1
DNA histones
Nucléole
Actine
Mitochondries
Membrane nucléaire
Enzymes ARNt synthétases
Ribonucléoprotéines
9
Cellules HEp2 Fluorescence Homogène
10
Cellules HEp2 Fluorescence Mouchetée
11
Cellules HEp2 Fluorescence Mouchetée
12
Cellules HEp2Fluorescence centromérique
13
Cellules HEp2Fluorescence Nucléolaire
14
Cellules HEp2 Ac anti-mitochondries
15
AC ANTI-NUCLÉAIRES
Ac anti-cytoplasme
Enzymes Hélicase, PCNA topo isomérase (Scl70)
DNA histones
Nucléole Polymerase 1 PM-Scl
Actine
Mitochondries
Membrane nucléaire gp210, lamines
Enzymes ARNt synthétases Anti-Jo1.
Ribonucléoprotéines Sm/RNP SSA/SSB
16
Stratégie de dépistage des AAN (Laboratoire
dImmunologie, Amiens)
17
Fréquence des Ac anti-nucléaires dans différentes
affections
Pathologie AAN LED 72-100 PR
13-30 PR Sde Gougerot Sjögren 55
Sclérodermie 40-80 Poly et
dermatomyosite 8-29 Connectivites mixtes
100 HCA 100 Hépatite aiguë virale
17 Sujets normaux 0.5
18
Principaux auto-Ac dirigés contre les composants
du noyau ou du cytoplasme
LED Sm (8-30 ),RNP (40 ), SSB/SSA
(15-35 ) anti-ADN (60 ) Conn.Mixte
RNP (95-100 ) SSB (11), centromère
(7) Sclérodermie Scl70 (20-60), RNP
(12) CREST centromère (70-90
) Gougerot-Sjögren SSA/SSB (50-70
) Polymyosite, Jo1, PM-Scl. Dermatomyosite
PR SSA/SSB(5-15 ), RNP (3)
Anti-DNA et lupus Ac fréquents lors datteintes
rénales Évolution plus grave Ac et suivi
évolutif
19
Facteur rhumatoïde (FR)
Ac de faible spécificité FR (IgM)PR
80SS 60LED 20Sclérodermie
20Dermato polymyosite 20Polyarthrites
chroniques 5Infections virales 10
Dans PR Polyclonalsouvent absent dans les PR
débutantes Taux élevé et persistant  formes
graves FR de type IgA  PR grave avec érosion
osseusePeut être négatif
20
Ac Anti-protéines citrullinées
Facteur anti-périnucléaire APF Ac anti-kératine
AKA Ac anti-Filaggrine AFA Ac anti-peptide
citrulliné cyclique a CCP

• Citrullination Arg citrulline

Peptidyl arginine désiminase
Ac de type IgG Spécificité gt 95 pour la
PR Sensibilité 50-60 non recouvrant avec le
FR Apparition précoce dans PR débutante
21
Ac anti-phospholipides

• Famille très hétérogène dAc
• Ac anti-phospholipides proprement dits
• - anti-cardiolipides (aCL) de type IgG ou IgM
  (phospholipides anioniques )
• - anti-phosphatidyl-éthanolamine, anti-
  phosphatidyl sérine

• Ac vis-à-vis de protéines régulatrices de la
  coagulation liées à des phospholipides
• ?2 glycoprotéine 1, protéine S, prothrombine.

• Anticoagulant circulant de type lupique (LA)
• Ac anti-mitochondrie de type 5.

22
Principales indications de la recherche dACL

• Antécédents de thromboses artérielles et
  veineuses
• Thromboses veineuses ou embolies pulmonaires
  récidivantes
• Premier épisode de thrombose veineuse de siége
  inhabituel ou chez un sujet lt 50 ans
• Manifestations artérielles systémiques en
  labsence de facteurs de risque lt 50 ans
• Une (ou plus) mort fœtale
• Récidives davortements spontanés précoces
• Thrombopénie durable inexpliquée
• LED

23
ANCA
Auto-Ac anti-cytoplasme des neutrophiles
cANCA anti-Protéinase III . Maladie de
Wegener (75 ), Polyangéite microscopique
pANCA anti-MPO (myéloperoxydase) Polyangéite
microscopique Syndrome de Churg et
Strauss Maladie de Horton xANCA aspect pANCA,
PMN fixés méthanol non dirigés contre la
MPO RCH, Maladie de Crohn
24
HÉPATOPATHIES ET AUTO-AC

• Ac anti-mitochondries de type 2
• Cible Pyruvate déshydrogénase
• CBP , HCA
• Ac anti-muscle lisse (anti-actine)
• HAI de type I , CBP , Hépatites
  virales, médicamenteuses
• Ac anti-LKM1 (liver Kidney microsome)
• Cible Cyt P450
• HAI de type II , Hépatite C, GVH, MAI
  diverses
• Ac anti-LC1

25
Ac anti Mitochondries (M2)
26
HÉPATOPATHIES ET AUTO-AC

• Ac anti-gp 210 (pore nucléaire)
• CBP
• Ac anti-lamines (env. nucléaire)
• HAI, CBP, vascularite,
• cytopénie auto-immune
• Ac anti-SLA (soluble liver Ag)

27
Auto-Ac et Maladie cœliaque

• Ac anti-gliadine
• Ac anti-endomysium
• Ac anti-transglutaminase
• Ac anti-réticuline
• Recherche importante dans le diagnostic et le
  suivi de la maladie le taux des Ac diminue sous
  régime sans gluten

• Ac anti-gliadine Ac de type IgA et IgG Ac par
  ELISA
• Se. Sp.
• IgG 82 à 100 50 à 100
• IgA 52 à 100 65 à 100
• Ac anti-endomysium (IFI)
• Ac anti-transglutaminase (ELISA)
• Ac de type IgA, Sp. 90 à 100
• Combinaison de 2 tests 100 de Sp. et Se.
• Attention au déficit en IgA