G

1
Génétique Médicale

• K Dieterich
• AHU Génétique Médicale
• HCE CHU Grenoble

2
Plan

• Introduction
• Cytogénétique et cytogénétique moléculaire
• Caryotype
• FISH
• Trisomie 21
• Diagnostic post-natal
• DPN
• Indications du caryotype
• Génétique monogénique
• Types classiques de transmission mendélienne
• Autres types de transmission monogénique
• Maladies à composante génétique

3
I Introduction (1/5)

• Génétique
• Etude de la transmission des caractères
  héréditaires
• Génétique formelle (1866, Mendel)
• Récessivité, dominance, codominance
• Support de linformation héréditaire
• Chromosomes (1915, Morgan)
• ADN (1953, Watson Crick)
• Etude des pathologies génétiques chez lHomme
• Génétique Médicale (1940-50, McKusick et autres)

4
I Introduction (2/5)

• Génétique Médicale
• Étude des variations et de la transmission des
  traits chez lHomme en rapport avec la pathologie
• Domaines  classiques 
• Génétique clinique gt phénotype gt Ex clinique
• Cytogénétique gt chromosomes gt caryotype
• Génétique moléculaire gt ADN/ génotype gt PCR,

5
I Introduction (3/5)

• Génétique Médicale
•  Nouveaux  domaines
• Cytogénétique moléculaire
• gt anomalies submicroscopiques des chromosomes
• gt FISH CGH-array/ puce à ADN
• Épigénétique
• gt modification de lexpression des gènes sans
  modification de la séquence de lADN
  (conformation de la chromatine et accessibilité
  à lADN)
• gt méthodes de génétique moléculaire

6
I Introduction (4/5)

• Classification des maladies génétiques
• Anomalies chromosomiques
• Excès ou défaut de gènes, non mutés, contenus
  dans 1 chromosome ou 1 segment chromosomique
• 0,7 des naissances
• 50 des FCS
• Maladies monogéniques
• Mutation dun gène ou de ses séquences
  régulatrices
• Gène nucléaire ou mitochondrial
• 1 des naissances
• Maladies à composante génétique
• Maladie à gène majeur de susceptibilité
  (BRCA1,2,) 15 des naissances
• Maladie multifactorielle (DID, maladies
  auto-immunes,)

7
I Introduction (5/5)

• Gènes paternels Gènes maternels
• 23 chromosomes 23 chromosomes
• n ADN n ADN
• Fécondation
• Zygote 46 chromosomes
• 2n ADN
• Couples de gènes Fonctions cellulaires

8
II Cytogénétique Caryotype (1/5)

• Etude morphologique des chromosomes au microscope
  optique
• Après traitement chimique ou enzymatique
• Rapport de 1/1000 entre ADN et le chromosome

9
(No Transcript)
10
II Cytogénétique Caryotype (2/5)

• 1) Matériel
• A partir de cellules nucléées
• en division cellulaire
• Lymphocytes sanguins
• Cellules amniotiques
• Cellules trophoblastiques
• Fibroblastes cutanés

11
II Cytogénétique Caryotype (3/5)

• 2) Culture cellulaire
• En fonction du type cellulaire
• 72h à plusieurs jours
• Faire multiplier les cellules (représentatives de
  lorganisme entier!)

12
II Cytogénétique Caryotype (4/5)

• 3) Technique d obtention des métaphases
• Choc
• Fixation
• Etalement sur lame

13
II Cytogénétique Caryotype (5/5)

• 4) Observation et analyse
• Nombre et structure des chromosomes
• 46,XX
• 46,XY

14
II - Cytogénétique FISH (1/3)

• Hybridation in situ fluorescente FISH
• Fragments d ADN marqués par un fluorochrome
  Sonde
• gt Fixation de la sonde par complémentarité
• gt Au microscope on repère la présence ou
  l absence de la sonde utilisée et le nombre
  d exemplaire
• Cette technique peut être appliquée sur
• des métaphases ou directement sur des
• noyaux en interphase

15
II Cytogénétique FISH (2/3)
16
II Cytogénétique FISH (3/3)
17
II Cytogénétique Trisomie 21 (1/11)

• Première aberration chromosomique décrite chez
  lHomme
• Première cause de retard mental (1/800
  classiquement lt 1/2000 naissances actuellement)
• 1) Clinique
• Dysmorphie Brachycéphalie
• Cou court / excès de peau
• Face ronde, fentes palpébrales en haut, en
  dehors
• Hypotonie axiale
• Malformations associées cardiaques, digestives
• Retard mental
• Risque tumoral Leucémies

18
II Cytogénétique Trisomie 21 (2/11)
19
II Cytogénétique Trisomie 21 (3/11)

• 2) Diagnostic postnatal
• Cytogénétique à partir dun prélèvement sanguin
  veineux
• Forme libre
• 47,XX,21
• 47,XY,21
• Obligatoire pour affirmer le diagnostic

20
II Cytogénétique Trisomie 21 (4/11)
21
III Cytogénétique Trisomie 21 (5/11)

• 3)Diagnostic prénatal
• Différents types de prélèvements
• Amniocentèse prélèvement de liquide amniotique
• LA Milieu complexe en renouvellement constant
• 500ml à 20 SA / max 30 34 SA 1l
• Prélèvement le employé
• Le plus souvent entre 15ème et 19ème SA
• Complications Avortement spontané / MFIU
• 0,5 / 100
• Réalisation du caryotype fœtal

22
II Cyogénétique Trisomie 21 (6/11)

• Amniocentèse
• Avantages
• Geste simple
• Technique éprouvée
• Peu de risque
• Inconvénients
• Terme 16 17 SA
• Délais de résultat
• Echec possible des cultures après 32SA

23
II Cytogénétique Trisomie 21 (7/11)

• Trophocentèse
• Prélèvement plus précoce 12ème SA
• Cytotrophoblaste mitoses spontanées
• Syncytiotrophoblaste
• Avantages
• Précoce
• Caryotype en 24 à 48h sur examen direct
• Qualité de lanalyse chromosomique
• Inconvénient
• Taux de FCS 2 à 3

24
II Cytogénétique Trisomie 21 (8/11)
25
II Cytogénétique Trisomie 21 (9/11)

• Indication de dépistage de la Trisomie 21 par
  caryotype
• 1) Age maternel gt ou à 38 ans
• Risque d anomalie de nombre de chromosomes
• 25 ans 1 / 2 000
• 30 ans 1 / 1 000
• 35 ans 1 / 500
• 38 ans 1 / 100
• 40 ans 2 / 100
• gt 45 ans 6 à 8 / 100
• 2) Antécédent d enfant avec aberration
  chromosomique

26
II Cytogénétique Trisomie 21 (10/11)

• 3) Signes d Appel Echographiques
• Nuque au 1er trimestre
• Malformations au 2ème trimestre

27
12 SA
Hygroma
Clarté
28
II Cytogénétique Trisomie 21 (11/11)

• 4) Marqueurs sériques
• Evaluation du risque de trisomie 21
• A partir du dosage de bêtaHCG, dAFP, doestriol
• A 15ème 16ème 17ème 18ème (14 SA 17SA6j)
• Indication d amniocentèse pour un risque gt ou
  à 1 / 250
• / ! \ Evaluation séquentielle en prenant en
  compte la mesure d épaisseur de la nuque et
  l évaluation à partir des marqueurs sériques
  (Risque combiné)

29
II Cytogénétique Autres anomalies

• Autres anomalies de nombre
• Trisomie 13
• Trisomie 18
• 45,X sydrome de Turner
• 47,XXY Syndrome de Klinefelter
• 47,XXX
• 47,XYY
• Anomalies de structure
• Délétion
• Translocation

30
(No Transcript)
31
(No Transcript)
32
(No Transcript)
33
II Cytogénétique Translocation réciproque
Equilibré
Déséquilibré
34
Bilan du retard mental
35
(No Transcript)
36
II Cytogénétique Indications du caryotype

• 1) Diagnostic postnatal
• Naissance
• Signes évocateurs daberration chromosomique
• Association syndrome polymalformatif / dysmorphie
  
• Enfance
• Retard de croissance
• Retard pubertaire
• Retard de développement
• Adulte
• Fausses couches à répétition
• Infertilité

37
II Cytogénétique Indications du caryotype

• 2) Diagnostic prénatal
• Age maternel
• Antécédent d enfant avec aberration
  chromosomique
• Parent porteur d un remaniement chromosomique
  équilibré
• Signes dAppel Echographiques
• Marqueurs sériques