Allergitester p

1
Allergitester på labbet -fungerar de och varför?
Sjöberg 2007
2
Några definitioner

• Överkänslighet sjukdom orsakad av främmande
  ämnen - behöver inte ha immunologisk orsak. Ex
  kräftor, vin, ost
• Allergi sjukdom orsakad av immunologisk reaktion
  mot främmande antigen
• Allergen antigen som orsakar allergi

3
Olika typer av allergi

• Snabb överkänslighetsreaktion(ex hösnuva)
• Immunkomplexmedierad allergi(ex allergisk
  alveolit)
• T-cellsmedierad allergi(ex kontakteksem)

4
Typ I reaktionen snabb överkänslighet
5
IgE

• Uppbyggd som IgG men med 5 domäner(mw 188 kDa)
• Mkt låg koncentration i serum 0,05 mg/mL (IgG
  100 000 ggr högre)

6
Olika allergener
Husdjur Pollen björk, gräs, gråbo Damm -
kvalster Insekter Födoämnen Mögel Mediciner
7
Is your home a Dust Mite Bonanza and a Dead Skin
Buffet?
8
Ett allergenextrakt är vanligen en blandning av
många proteiner, varav man blir allergisk mot en
del. De som gt50 av allergiska reagerar mot
kallas major allergens, övriga minor. I
dåliga extrakt finns få proteiner som man blir
allergisk mot, dessutom finns ofta irritanter.
9
Utredning av allergi

• Anamnes (viktigast)
• Pricktest
• In vitro tester
• Provokation

10
Vilka in vitro-tester används?

• UKNEQAS (ägg) 279 CV
• Phadia 161 8,8-14,3
• DPC 57 12,0
• Dynatech 16 23,4
• Hycor 16 17,6
• Bayer 10 9,1
• Övriga 19 -

I Sverige dominerar Phadia helt
11
ALLERGENSPECIFIKT IgE (RAST)
12
(No Transcript)
13
DPCs (Siemens) luminiscens-teknik
Allergenet är kopplat till en polymer i löslig
form. Fastfas uppnås genom bindning till en
ligand-coatad plastkula.
14
När ska man ta RAST-prov?
I samband med en anafylaktisk reaktion
neutraliseras IgE-antikropparna i blodet. Man bör
därför vänta ungefär en månad innan man tar ett
prov.
15
Tolkning av RAST - 1

En positiv RAST är inte liktydigt med klinisk
allergi Olika gränsvärden för olika
allergener Finns en bra screening metod för
atopi? Phadiatop bäst Total-IgE mer
tveksam Vad betyder en positiv
Phadiatop? Atopibenägenhet Mäter bara vanliga
luftvägsallergener Inte bra för födoämnen
Inte bra för yrkesallergier
16
Gränsen för vad som med 95 sannolikhet
förutsäger en symtomgivande allergi varierar
En positiv RAST är inte alltid positiv

• Ägg gt 6 kU/L
• Mjölk gt32 kU/L
• Jordnöt gt15 kU/L
• Fisk gt20 kU/L

17

Tolkning av RAST - 1
En positiv RAST är inte liktydigt med klinisk
allergi Olika gränsvärden för olika
allergener Finns en bra screening metod för
atopi? Phadiatop bäst Total-IgE mer
tveksam Vad betyder en positiv
Phadiatop Atopibenägenhet Mäter bara vanliga
luftvägsallergener Inte bra för födoämnen
Inte bra för yrkesallergier
18
Phadiatop kan inte användas för diagnostik av
födoämnesallergi
Urval av vanliga inhalationsallergener Katt Hun
d Häst Björk Timotej Gråbo Cladosporium Kv
alster (D. farinae och D. pteronyssinus) Oliv
Väggört
19
Tolkning av RAST - 1

En positiv RAST är inte liktydigt med klinisk
allergi Olika gränsvärden för olika
allergener Finns en bra screening metod för
atopi? Phadiatop bäst Total-IgE mer
tveksam Vad betyder en positiv
Phadiatop? Atopibenägenhet Mäter bara vanliga
luftvägsallergener Inte bra för födoämnen
Inte bra för yrkesallergier
20
Födoämnespanel (fx5)
- Äggvita - Mjölk - Torsk - Vete - Jordnöt -
Sojaböna
Paneler med de vanliga luftburna allergenerna ska
inte användas för att screena vid misstänkt
födoallergi.
21
Tolkning av RAST 2
Humlan borde inte kunna flyga eller Varför
fungerar RAST överhuvudtaget? Varför är ibland
RAST pos. och Phadiatop neg. och vice
versa? Födoämnesallergi Vuxna oftast
negativa i RAST Penicillingallergi Oftast ej
IgE-orsakad
22
Hur kan RAST-testen fungera?
23
Tolkning av RAST 2
Humlan borde inte kunna flyga eller Varför
fungerar RAST överhuvudtaget? Varför är ibland
RAST pos. och Phadiatop neg. och vice
versa? Födoämnesallergi Vuxna oftast
negativa i RAST Penicillingallergi Oftast ej
IgE-orsakad
24
Antag att 3 IgE molekyler måste binda för
positivitet
25
Tolkning av RAST 2
Humlan borde inte kunna flyga eller Varför
fungerar RAST överhuvudtaget? Varför är ibland
RAST pos. och Phadiatop neg. och vice
versa? Födoämnesallergi Vuxna oftast
negativa i RAST Penicillingallergi Oftast ej
IgE-orsakad
26
Varför blir RASTEN fel?

• Patienten är inte allergisk
• Patienten är allergisk men inte via IgE
• Patienten är allergisk via IgE men extraktet
  är dåligt
• Korsreaktioner

27
Korsreaktioner I

• Patientens serum
• Antikroppar är inte en homogen substans utan en
  blandning av olika antikroppar med olika
  specificitet
• Därför kan ett visst serum visa korsreaktivitet
  mellan två allergener medan ett annat inte gör
  det.

28
Olika sammansättning av antikroppar i ett serum
ger olika korsreaktion
Kraftig korsreaktion
Ingen korsreaktion
29
Korsreaktioner II

• Allergenet
• Ett allergen(extrakt) är inte heller homogent
  utan en blandning av flera proteiner.
• Vissa proteiner är vitt spridda (profilin,
  tropomyosin) och ger korsreaktivitet, andra är
  mer arttypiska
• En enskild proteinkomponent har flera olika
  epitoper (antigena determinanter)
• Icke-identiska proteiner kan ha identiska
  epitoper som då ger korsreaktivitet
• Närbesläktade arter har ofta gemensamma epitoper

30
Allergenextraktets variation ger varierande
korsreaktion
Ett visst protein förekommer i olika extrakt
ex. profilin eller tropomyosin
Korsreaktivitet pga gemensam epitop hos
obesläktade proteiner
31
Understanding the nature of cross-reactivity

• Anti-A antibodies will react in an identical
  fashion with allergens 1 and 2
• Anti-B and Anti-D antibodies recognize unrelated
  epitopes on the two allergens and will show no
  cross-ractivity
• Anti-C antibodies react strongly with the
  homologous epitope C and cross-react weakly with
  heterologous epitope E

32
Oral Allergy Syndrome (OAS), tree pollen
allergic patients reacting to different foods

• Hazel nut, 46
• Apple, 39
• Peach, 24
• Cherry, 22
• Walnut, 21
• Pear, 20
• Almond, 19
• Plum, 17
• NE Eriksson, Sweden, 1984

• Brazil nut, 16
• Potato, 15
• Carrot, 13
• Peanut, 10
• Dessert almond, 11
• Strawberry, 10
• Orange, 9
• Apricot, 7

33
Carbohydrate determinants (CCD)

• Många allergener är glykoproteiner
• IgE är främst riktat mot peptid epitoper men en
  kolhydratgrupp kan ingå i en epitop eller vara
  nödvändig för bildandet av en polypeptid
  epitop.Kolhydraterna kan ge korsreaktivitet.
• En kolhydrat epitop kan trigga en allergisk
  reaktion om den är polyvalent
• Dagens tester använder naturligt glycosylerade
  allergener

34
Trender för att förbättra RAST-tekniken
35
Ökad känslighet (0,1 kU/L) - är det viktigt?
36
Ska vi förfina diagnostiken genom att titta på
antikroppar mot olika allergenkomponenter?
37
Component - Resolved Diagnostics (CRD) In vitro
tests for true sensitization may give new
applications
Predict cross-reactivity Differential diagnosis
More sensitive tests Tailor-made immunotherapy
38
Todays allergy diagnostics
39
Component - Resolved Diagnostics
40
(No Transcript)
41
(No Transcript)
42
(No Transcript)
43
JÄMFÖRELSE RAST OCH HUDTEST
RAST Hudtest Kostnad 150 kr Billigare? Snabbhet 1
-4 d 30 min Kräver teknik och
vana Nej Ja Hållbarhet för allergener God Mindre
god Sällsynta allergener Ja Nej Påverkas av
medicin Nej Ja Ospecifika reaktioner Nej Ja Säkerh
et för patient Säker Numer minimal risk
Kompletteringsbar Ja Nej Överensstämmelse med
provokation är 80-90 för båda.
44
Hudtest kan användas
- för vanliga allergener - vid
allergimottagningar eller av läkare med
specialintresse. - Annars är RAST att föredra.
45
ImmunoCap Rapid ny snabbtest
46
ImmunoCap Rapid
47
Allergener i olika ImmunoCap Rapid-kit
48
Blir vi arbetslösa på labben?Kommer ImmunoCap
Rapid att ta över?

• Rapid får gissningsvis en plats på vårdcentraler.
  
• Ersätter också sannolikt en del hudtestning.
• Nackdelar med Rapid
• Häst saknas i testen. Hund och gråbo fungerar
  inte heller så bra.
• Ej lika känsligt som in vitro tester (1 kU/L).
• Ej möjligt kvantifiera.

49
Så därför Även i framtiden kommer nog N.D. att
stå för initialerna på den patient vars
IgE-myelom möjliggjorde utvecklingen av
RAST. och inte för Not Done.
50
Ackreditering

• 1. Total-IgE och IgE-antikroppar mot individuella
  allergener kan ackrediteras.(Således ingen
  generell ackreditering för RAST-metoden för alla
  allergener eller mot paneler.)
• 2. Minst 10 olika allergener ska ackrediteras
  (minst ett allergen från var och en av de
  viktigaste allergengrupperna.
• 3. Allergenerna ska vara väl karakteriserade
• 4. Externa kontrollprogram ska finnas för de
  ackrediterade allergenerna
• 5. Internkontroll (driftkontroll) ska användas
  för de aktuella allergenerna - lämpligen enligt
  löpande schema.