8.2.

1
8.2. ŠUNU SUSPENSIJU KULTURAS Detalizeti ši
tema apskatita gramata ??????? ?.?., ?????????
?.?., ??????? ?.?. ?????? ???????? ?????? ?
?????????? ? ???????? ????????. ???? ???????
?????. 1980.-488 ?., no 145.-177.lpp.
2
Suspensiju kulturu nozime Šunu suspensijas
izmanto gan teoretiskiem, gan praktiskiem
merkiem.Teoretiskiem tas butu augstako augu
šunu metabolisma petijumiem.Praktiski tas
pielieto dažadu savienojumu rupnieciskai ieguvei,
ka alkoloidi, steroidi, glikozidi, eteriskas
ellas, fermenti, u.c.
3
Suspensiju kulturas sastav no atseviškam šunam un
šunu agregatiem, tas tiek audzetas škidras
barotnes, kam speciali pievada skabekli.
4
Iegušana

• Loti svarigs ir izejas materials, t.i., kadu
  kallusa tipu izmanto.Atseviškos gadijumos
  suspensiju kulturas iegust no steriliem augu
  eksplantiem, kas škidra barotne dediferencejas un
  veido kallusu, kas beigas sadalas atseviškas
  šunas, bet parasti iegust no irdena kallusa
  gabaliniem, kas sastav no nediferencetam šunam.

5
Faktori, kas iespaido kallusa disociaciju

• Lai iegutu irdenu kallusu, kas škidra barotne
  viegli sadalas, lieto paaugstinatu ?auksinu
  koncentraciju un pazeminatu ?citokininu
  koncentraciju, vai ari citokininus nelieto
  nemaz.Piemeram, audzejot Atropa beladonna
  kallusu, vajadzeja barotnei pievienot 0,5 mg.L-1
  kinetina un 2 mg.L-1 NES. Bet lai dabutu irdenu
  kallusu, ta vieta lietoja fitohormonu
  kombinaciju 0,1 mg.L-1 kinetina un 2 mg.L-1
  NES. Savukart zirnu saknu kulturai kallusa
  irdenumu panaca ar paaugstinatu rauga ekstrakta
  kombinaciju un pazeminatu 2,4-D devu.

6

• Šunas vienu ar otru saista Ca pektati. Lai tas
  atdalitu, var lietot ari tadu panemienu ka
  pievienot fermentu Ca pektatu sadališanai vai ari
  saistot Ca ar hellatiem.Par hellatešanas agentu
  var lietot, piemeram, amonija oksalatu.
  Northcraft norada, ka amonija oksalats 100 mg.L-1
  koncentracija aerobas kulturas padara ipaši
  irdenas, un tadi kallusi viegli sairst.Acer
  pseudoplatanus suspensiju kultura veido škistošos
  polisaharidus (Becker, u.c.), ko ta izdala
  barotne šo polisaharidu galaktouronskabes
  karboksilgrupa samazina polisaharidu kedes
  sasaiti, kas noved pie ipaša kallusa irdenuma.

7
Suspensiju kultura ir heterotrofa ka pec
morfologijas, ta ari biokimiski. Šunu populacija
parasti stipri varie ka pec formas, ta pec
izmeriem. Pat smalki dispergeta suspensija sastav
no

• 50-60 - atseviškam šunam,
• šunu grupam (2-10 šunas),
• daudzšunu agregatiem (simtiem tukstošu šunu).

8
Maz ir tadu kulturu, kam piemit nosacita
homogenitate, ka, piemeram, Rosa sp. (Dougale,
1966 Nash, 1968), kas kultivejot veido nelielus
agregatus. Liela nozime ir barotnes sastavam. Ja
rožu suspensiju kulturai barotne pievieno
galaktozi, rafinozi vai saharozi, tas veicina
lielu agregatu veidošanos. Nevins un lidzautori
vel konstatejuši, ka cukuri škidraja barotne var
ietekmet starpšunu kontaktus, inducejot izmainas
šunapvalku virsmas polisaharidos. Bet, protams,
noteicoša loma ir un paliek fiziologiski aktivam
vielam.
9
Bez barotnes sastava butiska nozime ir

• aeracijas veidam un
• škiduma maisišanas atrumam,
• attiecibai starp svaigo biomasu un barotnes
  tilpumu,
• subkultivešanas biežumam, u.c.

10

• Kulturam, kas tendetas uz agregatu veidošanu, var
  pievienot barotnei pektinazi un celulazi neliela
  koncentracija. Piemeram, Acer pseudoplatanus
  suspensijai pievienojot 0,05 macerozimu un 0,1
  celulazi, konstatets, ka suspensiju augšana
  netika inhibeta, bet palielinajas kulturas
  dispersija (Street, 1977). Lai noverstu šunu
  sieninas destrukciju, vienlaicigi ar celulazi
  kulturai ka osmotikis japievieno 8-igs sorbits.

11

• Ja žen-šena kulturai pievienoja 0,02 pektinazi
  un celulazi vienlaicigi ar 8 sorbitu, atseviško
  šunu un nelielo agregatu daudzums no 24
  palielinajas lidz 96
• ( ???????, 1977).
• Suspensiju kulturu iespejams iegut ne tikai no
  kallusa, bet ari no vienas šunas kulturas.

12
Suspensiju kulturas augšanas fazes Šunu
populacijas augšanas cikls veido S-veida likni.
Šunu skaits
Stacionara faze
5.
4.
6. Atmiršanas faze
Agra stacionara faze
3.
Lineara faze
1.
Lag- faze
2.
Logaritmiska faze
Laiks
13
Prakse, protams, izmanto šunas aktiva augšanas un
vairošanas faze. Ievada jau runajam par šunu
kulturu izmantošanu sekundaro metabolitu
ražošana. Lai iegutu lielu daudzumu ekonomiski
svarigu sekundara metabolisma produktu,
nepieciešami divpakapju šunu kultivešanas etapi

• pirmaja etapa tiek raditi apstakli, kas veicina
  šunu biomasas optimalu uzkrašanos,
• otraja etapa - šunu kultivešana noteikta nosaciti
  stabila stavokli specialos režimos (hemostatiska
  vai turbodinamiska).

14
Šunu metabolitu ieguve rupnieciski suspensiju
kulturas
15
Izmeginajumi škidras barotnes kratitajos
16

• paldies par uzmanibu!