EL ADN

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EL ADN

• Sus aplicaciones en Medicina Forense
• Esperanza López Hidalgo.
• Médico Forense.
• IML de Málaga.

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APLICACIONES

• Investigación de la paternidad
• Identificación criminal
• Identificación no criminal
• Alec Jeffreys 1985

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CARACTERISTICAS DEL ADN

• Unico
• Mismo en todas las células
• Estable
• Hereditario

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ESTRUCTURA

• Dos largas cadenas de nucleótidos unidas formando
  una doble hélice
• En el núcleo de la célula, en los cromosomas
• Cariotipo humano 46 cromosomas

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FUNDAMENTO de la aplicación del ADN en MF

• Polimorfismo
• Fragmento de ADN presentes en todos los
  individuos pero que son altamente variables
• Mediante el análisis de varias regiones
  polimórficas, la probabilidad de que dos
  individuos sean iguales es prácticamente nula.
  Excepción gemelos univitelinos

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Tipos de Polimorfismos

• Modificación de un solo nucleótido (SNPs)
• P. de Longitud (VNTR). Secuencia de nucleótidos
  repetidos en tandem
• Minisatélites (MVR), secuencias 30 pb
• Microsatélites (STR), 2 a 6 pb, normalmente 4,
  ATTCATTC... Homo o heterocigótico

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TIPOS DE ADN

• ADN nuclear
• ADN mitocondrial
• Polimorfismo del cromosoma Y

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ADN mitocondrial

• Se encuentra en las mitocondrias
• Herencia por vía materna
• Utilidades
• ADN deteriorado
• Células carentes de núcleo
• Linajes maternos

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P. Cromosoma Y

• Filiación en ausencia de progenitor
• Linajes por línea paterna
• Delitos sexuales
• Identificación de sexo en catástrofes
• Inconveniente, todos los individuos de la línea
  paterna comparten la misma información.

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METODO DE ANALISIS

• Hibridación con sondas
• Reacción en cadena de la polimerasa PCR

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HIBRIDACION CON SONDAS

• Sonda, fragmento monocatenario de ADN con una
  secuencia conocida que se une a un fragmento
  complementario de ADN.
• Sondas marcadas radiactivamente o con un producto
  quimioluminescente.
• Se pone en contacto con la muestra y se separan
  los fragmentos según su longitud.
• Wyman y White, 1980.

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TIPOS DE SONDAS

• Mono-locus (SLP) Específicas para una región de
  un cromosoma.
• 1 o 2 bandas, homo o heterocigótico.
• Multi-locus (MLP) Hibridan secuencias
  minisatélite, 33 pb, en varios locus de
  diferentes cromosomas.
• Patrón de múltiples bandas, huella genética.

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Ventajas de las SLP

• Mas específicas
• Exclusivas del ADN humano
• Menor cantidad de muestra, 20 a 100 ng de ADN, no
  necesariamente en buenas condiciones

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TECNICA DE LA PCR

• Es la de mayor aplicación.
• Enzima Taq polimerasa se van uniendo de forma
  complementaria fragmentos de ADN delimitados con
  sondas, primers.
• Repetición cíclica del proceso permite obtener
  múltiples copias del fragmento de ADN.
• UTILIDAD, escasa cantidad de ADN o degradado.

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MUESTRAS

• Cualquier célula o tejido vivo o posmortem.
• Sangre, manchas.
• Células, frotis.
• Tejidos, piel, huesos.
• Pelos.

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Instrucciones básicas

• Sangre con anticoagulante
• Secado al aire
• Muestras testigo
• Muestras indubitadas
• Máxima higiene

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• Envasar los indicios por separado
• Etiquetado e identificación
• Filiación de quienes intervienen en la
  investigación

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INTERPRETACION DE RESULTADOS

• Se expresa mediante un valor de probabilidad
  basado en el teorema de Bayes.
• Cálculo de la probabilidad en función de la
  frecuencia en la población de los perfiles
  analizados.

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PROBABILIDAD DE PATERNIDAD

• Si no se produce la exclusión directa.
• PP ( X/XY).100
• X probabilidad de transmitir el rasgo al hijo
• Y frecuencia del marcador en la población

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INVESTIGACION CRIMINAL

• Si los perfiles analizados coinciden se analiza
  la frecuencia de los polimorfismos analizados en
  la población general.
• Las combinaciones de los polimorfismos que se
  analizan en la actualidad permiten determinar una
  probabilidad de repetición al azar de hasta 1/
  1015

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• Si la frecuencia fuera de 1
• FALACIA DEL FISCAL SI solo 1 de cada 100
  personas tendrían ese perfil, el acusado tiene el
  99 de posibilidades
• FALACIA DE LA DEFENSA En una población de
  100.000 personas 1000 tendrían ese perfil, el
  acusado y 999 personas mas podrían ser culpables

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• Los dos son razonamientos falsos, aplicando el
  análisis Bayesiano, obtenemos la probabilidad,
  con lo que se denomina RAZON DE VEROSIMILITUD,
  que sería el razonamiento correcto

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• Frecuencia 1
• Probabilidad de ser culpable 1
• Probabilidad de no ser culpable 1/100 0.01
• RV 1/0.01 100
• El sospechoso es 100 veces mas probable de ser
  culpable que otra persona escogida al azar