Interface faune sauvage

1
Interface faune sauvage animaux de rente
exemple de la Brucellose à Brucella suis biovar
2chez les suidés
GREGOIRE Fabien
Service de bactériologie
Réseau de Suivi sanitaire de la faune sauvage
2
INTRODUCTION Pourquoi sintéresser aux maladies
de la faune sauvage ?
SANTE DES ANIMAUX DOMESTIQUES
SANTE HUMAINE (Zoonoses)
 SANTE  DE LENVIRONNEMENT
FAUNE PATRIMOINE ET VALEUR ECONOMIQUE
3
CONTEXTE EUROPEEN

• DIRECTIVE EUROPEENNE
• COMMISSION FAUNE SAUVAGE - OIE
• FRANCE RESEAU SAGIR
• Wildlife diseases association
• Belgian Wildlife Diseases Society

4
Espagne (Sud-Ouest)
ONGULES SAUVAGES
Mycobacterium bovis
LYNX IBERIQUE
5
Brucella spp. . Quelques brefs rappels .

• coccobacciles Gram
• plusieurs  espèces  biovars hôtes
  préférentiels

6
Brucella spp.. Nouvelle nomenclature .

• Avant
• Brucella
• Plusieurs espèces
• (Plusieurs biovars)
• Ex Brucella abortus biovar 1, B. suis biovar 2,
  B. melitensis biovar 1, B. canis
• Dorénavant
• Brucella
• 1 espèce melitensis
• Plusieurs biovars
• Ex B. melitensis biovar abortus 1, B.
  melitensis biovar melitensis 1,

7
Biovars Biovars Hôte préférentiel Distribution Géographique Pathogénicité pour lhomme
melitensis 1, 2, 3 Ovins, caprins, ongulés sauvages Méditerranée, Moyen-Orient Forte
abortus 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9 Bovins, ongulés sauvages Europe, Asie, Amériques, Afrique modérée
suis 1 2 3 4 5 Suidés Suidés, Lièvres Suidés Rennes Rongeurs Amérique Latine, Asie, Océanie Europe Etats-Unis, Chine Canada, Russie Russie Forte Faible? Forte Modérée Forte
ovis Ovins (mâles) Méditerranée nulle
canis Chiens Amériques, Europe centrale faible
neotomae Néotomes Etats-Unis (Utah) ???
8
Brucella suis biovar 2 . Pathogénie .

• 1. Transmission
• via produits davortements
• excrétions génitales
• 75 des verrats infectés excrètent via
  éjaculat !
• lait
• urine
• ? Voies de pénétration orale vénérienne
  transplacentaire
• 2. Traversée des muqueuses et multiplication dans
  les nœuds lymphatiques

9
Brucella suis biovar 2 . Pathogénie .

• 3. Bactériémie importante et persistante (2 à 3
  mois)
• ? manipulation des carcasses des animaux
  infectés !
• 4. localisations génitales ET extragénitales
• 5.  Self limiting disease 

10
Brucella suis biovar 2 . Symptômes .

• Chez le porc domestique
• Lésions génitales
• ?
• Souvent infection inapparente
  (orchite et/ou
  épididymites)
• ?
• Avortements
• Infertilité
• Nombre de porcelets / portée ?
• Métrites (granulo-kystiques dans 30 des cas)
• Mammites exceptionnelles
• Rétentions placentaires exceptionnelles

11
Brucella suis biovar 2 . Symptômes .

• Chez le porc domestique
• Lésions extragénitales Fréquentes
• Abcès sous-cutanés, musculaires, rénaux,
• Lymphadénites
• Arthrites suppuratives et déformantes, synovites
• Spondylite ? paraplégie postérieure

12
Brucella suis biovar 2. Epidémiologie .

• Foyers de brucellose porcine
• En Belgique pas de cas recensés depuis les
  années 70
• En France 36 foyers détectés entre 1993 et 2002
  sur 21 départements (32 confirmés par isolement
  de B. suis 2)

13

• Elevages en plein air
• Pas de lien commercial (échange animaux ou
  semence) entre les foyers ? foyers PRIMAIRES

14
Brucella suis biovar 2. Epidémiologie .
LE COUPABLE
Sanglier (Sus scrofa)
15
Brucella suis biovar 2

• Intrusions des sangliers mâles dans les élevages
  (truies en chaleur!)
• Voie de transmission principale vénérienne

16
EFFECTIFS DES SANGLIERS EN REGION WALLONNE 1980
-2002 Augmentation de plus de 300 !
17
Brucella suis biovar 2

• Symptômes chez le sanglier
• Expression clinique rare (1 cas dorchite aiguë
  en 1993 Haut-Rhin)
• Impact sur la fertilité? Peu probable

18
Brucella suis biovar 2 . Epidémiologie rôle du
lièvre ? .

• Lièvre sensible à B. suis 2
• ? cachexie, lésions génitales, hépatomégalie,
  foyers nécrotiques au niveau des viscères
• 35 souches B. suis 2 isolées chez le lièvre
  (France)
• Prévalence ??? Rôle épidémiologique exact ???
• Mis en cause dans de nombreux pays (Suisse,
  Ukraine, Croatie, Danemark)
• Cadavre de lièvre retrouvé dans la nourriture
  destinée aux PC
• Elevages de PC infectés dans régions où sangliers
  absents
• Mais les souches lièvres et suidés semblent être
  génétiquement différentes .

19
Brucella suis biovar 2 . Etude de la prévalence
en Wallonie .

• Suivi sanitaire de la faune sauvage Projet RW
• Suivi des sangliers (brucellose)
• Collecte de 1. Sang ? sérologie
• 2. Rate ? culture et isolement

20
Brucella suis biovar 2 . I. Diagnostic direct .

• a. Mise en culture des échantillons de rate
• Broyat de rate ensemencé sur milieu sélectif
  (Farell)
• 4 jours à 37C (atm enrichie en CO2)
• Isolement des colonies caractéristiques
• ou suspectes
• Contrôle (coloration de Köster)
• Biotypages des souches OXY,
• CAT, et URE ? identifier le biovar

21
Brucella suis biovar 2 . I. Diagnostic direct .

• b. Analyse génétique (PCR IS6501)
• ? Culture et PCR méthodes de référence
  ( golden standard ) spécificité et sensibilté
  proches de 100

22
. II. Diagnostic sérologique .

• Brucella abortus
• B. melitensis
• B. suis
• Yersinia enterocolitica O9

Caractéristiques antigéniques communes (LPS)
Réactions croisées
23
Diagnostic sérologique .

• 2 TYPES DANTICORPS SERIQUES
• En réaction immédiate IgM (7 10 j P.I.,
  présents env. 3 mois)
• Plus tardivement IgG (28-30 j P.I., présents
  3-10 mois)

24
Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

• a. ELISA
• Détection IgG anti-Brucella (infection
   chronique )
• Bonnes spécificité (99,7) et sensibilité (92,5
  )
• Test de référence pour

25
Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

• b. AGGLUTINATION LENTE
• Résultats peu satisfaisants (sensibilité très
  mauvaise ? bcp de faux prévalence
  sous-estimée)
• IgM principalement ciblés ?  infection aiguë 
• Peu utilisé

26
Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

• c. AGGLUTINATION RAPIDE SUR LAME (ou test Rose
  Bengale)

Ag colorés au Rose Bengale Ac précipitation
des complexes immuns

• Sensibilité et spécificité environ 80
• Détecte principalement IgG1

27
Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

• d. FIXATION DU COMPLEMENT
• Très spécifique
• Détecte IgG1

Sérum à tester antigène
Brucella suis 2 complément
GR de mouton sensibilisés (indicateur)
28
Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

• Attention à linterprétation des résultats
  sérologiques
•  Self limiting disease  un résultat séro ne
  signifie pas nécessairement que linfection soit
  toujours présente.
• Les animaux porteurs peuvent perdre leur titre en
  Ac anti-Brucella ? infections latentes sans
  séroconversion !
• Séroprévalence ? prévalence de linfection !

29
Brucella suis biovar 2 . Diagnostic sérologique .

• Attention aux éventuelles réactions croisées !!!
• Diagnostic de Yersinia enterocolitica
• Sérologie ELISA YOP (Yersinia Outer Proteins)
• Culture à.p. des matières fécales

30
Brucella suis biovar 2 . Etude de la prévalence
en Wallonie .

• COMBINAISON DES 5 TESTS efficacité maximale
• Aucun test sérologique ne peut différencier
  réactions envers Brucella et Y. enterocolitica
• Sangliers - 2002 et 2003 (CERVA) n 345
• ELISA séroprévalence de 58,3
• Seul 25 environ des animaux séro étaient
  porteurs de la bactérie (culture)
• Prélèvements sur lièvres également (rate, sérum).
  
• Cultures sur rate négatives jusquà présent

31
Brucella suis biovar 2 . Réglementation
sanitaire .

• Maladie à déclaration obligatoire (liste OIE)
• Seuls les verrats pour lIA ou monte publique
  font lobjet dun contrôle sérologique
  obligatoire (à lentrée dans le centre, puis
  chaque année)

32
Brucella suis biovar 2 . Réglementation
sanitaire .

• En cas de confirmation de brucellose dans un
  élevage porcin
• Séquestration des animaux du foyer
• Accès interdit à tout PC étranger (sauf castrat)
• Unique sortie pour tous les PC gt abattoir
• Contact interdit avec autres animaux de
  lexploitation
• Désinfection des installations
• Persistance de la bactérie dans la terre humide
  et MF 5 mois
• Mesures applicables pendant minimum 6 semaines
  après constatation officielle du dernier cas

33
Brucella suis biovar 2 . Réglementation
sanitaire .

• 1. Léleveur décide de néliminer quune partie
  des animaux
• Les porcs (âge gt 4 mois) du foyer sont testés
  sérologiquement (2 prises de sang à 30 jours
  dintervalle minimum)
• ? Si tous les animaux sont séro- et ne présentent
  pas de signes cliniques de brucellose levée des
  mesures

34
Brucella suis biovar 2 . Réglementation
sanitaire .

• 2. VIDE SANITAIRE (la meilleure solution
  !!! Mais pas toujours réalisable )
• Les mesures sont levées 10 jours après la
  destruction du cheptel et la désinfection totale
  du foyer

35
Brucella suis biovar 2 .
Risques pour lhomme ? .

• Brucellose humaine principalement due à B.
  melitensis (Fièvre de Malte) et B. abortus
• Contact avec produits de sécrétion contaminés
• Ingestion de produits laitiers crus ou non
  pasteurisés
• Via particules/aérosol

36
Brucella suis biovar 2 .
Risques pour lhomme ? .

• B. suis 2 pathogénicité pour lhomme supposée
  faible néanmoins quelques cas (sérologiques et/ou
  cliniques) recensés en France
• Port des gants lors de la manipulation de
  cadavres danimaux sauvages !!!
• Risque de contamination via ingestion de viande
  considérée nulle

37
Brucella suis biovar 2 . Prophylaxie sanitaire .

• Protection des élevages porcins
• Mesures sanitaires classiques
• Contrôle des reproducteurs
• Surveillance sérologique des troupeaux à risque
  (plein air !!!)
• Séparation nette avec les élevages bovins, ovins,
  et caprins (risque de contamination avec B.
  abortus ou B. melitensis)

38
Brucella suis biovar 2 . Prophylaxie sanitaire .

• Protection contre les animaux sauvages (sangliers
  et lièvres)
• Eradication de la maladie chez les espèces
  réservoirs ? IMPOSSIBLE
• Vaccination porcs ? IMPOSSIBLE (pour le moment
  ?)
• Clôtures contre sangliers
• 1 clôture de 1,6 m avec un système
  anti-fouissement (rabat extérieur horizontal)
• Double clôture 1 clôture de 1,30 m 1 clôture
  extérieure électrique (2 fils superposés)

39
EN CONCLUSION

• La brucellose porcine court toujours
• Sous-diagnostiquée en Belgique chez les porcs
  délevage ???
• Ne pas lécarter de son diagnostic différentiel
  lors de troubles de la reproduction (et autres !)
  dans les élevages porcins (surtout en France !)
• Importance des réservoirs sauvages dans la
  prophylaxie des maladies infectieuses ? le VT
  dexploitation se doit dêtre au courant

40
Plus dinfos?

• Site de lOIE www.OIE.int
• Pour sinformer du statut des M.D.O.
• Site de lAFSCA www.afsca.be
• Pour connaître les mesures sanitaires en rigueur
  en Belgique
• Site sur la brucellose animale (Maison-Alfort)
• www.vet-alfort.fr/ENSV/brucellose-2004.pdf
• Brucellose enzootique à B. suis 2 chez le
  sanglier en Belgique, Godfroid F., Annales
  Médecine Vétérinaire, 1994, 138, 263-268
• Suivi Sanitaire de la Faune Sauvage (Dr Linden
  A. Service de bactériologie)