Sin t

1
(No Transcript)
2
Sistema inmune
Algunas células capturan microorganismos y otros
antígenos que presentan a los linfocitos
3
(No Transcript)
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(No Transcript)
5
(No Transcript)
6
Definición de Enfermedad celíaca
1.Enteropatía por sensibilidad al gluten
2.Trastorno inflamatorio multiorgánico mediado
por el sistema inmune y desencadenado por la
ingestión de gluten (y otras prolaminas) en
individuos genéticamente predispuestos, aparición
a cualquier edad, distribución
mundial, caracterizado por la presencia de
autoanticuerpos, con o sin manifestaciones
clínicas o enteropatía.
Basado en Troncone et al, CDEUSSA 2008
7
Prioridades en la Enfermedad celíaca
Revisar los criterios diagnósticos
Integrar marcadores serológicos, genéticos,
histológicos Mejorar protocolos de uso de la
serología (Sería necesario identificar
marcadores de uso diagnóstico que no se
relacionen con la ingestión de gluten) Promover
conocimiento de la enfermedad, mejorar
detección y tratamiento precoz Aumentar la
adherencia a dieta sin gluten Identificar los
mecanismos patogénicos Desarrollar terapias
complementarias
Basado en R. Troncone JPGN 2004
8
Factores implicados en la inmuno- patogenia de la
enfermedad celíaca
Extrínsecos Gluten/trigo prolaminas
Intrínsecos Infecciones, Lactancia, flora?
Hipersensibilidad tipo IV Linfocitos T CD4
Autoanticuerpos Citotoxicidad
Genéticos HLA-DQ2/DQ8 Genes no-HLA
Inmunológicos Pérdida de tolerancia oral?
EA2009
9
(No Transcript)
10
a-gliadina
Riqueza en Glutamina y Prolina
11
Susceptibilidad genética asociada a HLA
Máximo riesgo en homozigotos DR3-DQ2 o
combinación DR2-DQ2 con DR7-DQ2
Sollid LM. et al. J Exp Med 1989
12
Célula presentadora de antígeno
CD4
DQ2
Linfocito T
13
Transglutaminasa modifica la gliadina
gliadina
Efecto dosis del dímero DQ2.5 Número/calidad de
moléculas DQ2 mejoran la presentación de péptidos
14
Control genético de la Inmunidad específica al
gluten
HLA-DQ2
HLA-DQ2
PQQPQQSFPQQQRP
EA2009
15
Frecuencia de HLA-DQ2 y otros alelos en la
población de Castilla y León
25 DQ2
DQ2 negativos 6 en España 14 Finlandia
Alrededor del 10 de familiares DQ2 desarrollan
la EC
Arranz E. J Clin Immunogenet 1997 Polvi A-Arranz
E. Hum Immunol 1998
16
Susceptibilidad genética sistema HLA contribuye
lt40 (Otros genes relacionados con la función
inmunológica)
Población general
Individuos con E. celíaca
Expresión HLA-DQ2/8
Solo el 2 de portadores HLA-DQ2 desarrollan
EC
Basado en Kagnoff MF. J Clin Invest 2007
17
Genes HLA y no-HLA en enfermedad celíaca
Otros en región HLA genes MICA, MICB,
TNF (desequilibrio ligamiento)
18
Enfermedad celíaca modelo en 2 señales
Péptido 19-mer
Péptido de gliadina 33-mer
IL-15Ra
HLA-clase I
1
CD8
CD71
MICA
KGF MMP
NKG2D
TGt
IFNg
2
TCRab
CD4
DQ2
NLM
EA2009
19
Datos conocidos en la patogenia
1. Digestión incompleta del gluten con
acúmulo de fragmentos ricos en glutamina y prolina
2. Efecto doble del gluten sobre el intestino
interviene la Inmunidad Innata en epitelio
(citolisis), y la I. Adaptativa en la
lámina propia (linfocitos T CD4)
3. La transglutaminasa modifica el gluten
deamidación de péptidos, aumento de
inmunogenicidad
4. La molécula HLA-DQ une ciertos péptidos
restricción en la presentación de péptidos a
linfocitos T
5. Producción de citocinas proinflamatorias
Balance alterado. Pérdida de tolerancia.
Remodelación
EA2009
20
Espectro de cambios histológicos asociados al
gluten (reversibles)
21
(No Transcript)
22
Modelo de cultivo ex vivo de explante de biopsia
Aislamiento y purificación de poblaciones
celulares
EA2006
23
Respuesta Th1 con predominio de IFNg
Biopsias sin cultivar
Correlación con el grado de lesión
León AJ et al. Clin Exp Immunol 2006146479-85
24
IL-18 podría mantener las respuestas Th1
a.Niveles mRNA de IL-18. Biopsia sin
cultivar b.Inmunohistoquimia en secciones
(criptas)
Densitometría bandas de IL-18 (18 kDa)
Análisis por Western blot 1-6 EC activa, 7-8
controles, 9-10 patológicos
León AJ et al. Clin Exp Immunol 2006146479-85
25
Expresión de IL-15 en biopsias de duodeno
a. Niveles mRNA de IL-15 en biopsias sin cultivar
(pacientes, controles) b. Inmunohistoquimia
células mononucleares en lámina propria
Western blot EC activa 1-4, control patológico
5-6, control normal 7-8
León AJ et al. Clin Exp Immunol 2006146479-85
26
Gliadina induce IL-15 en cultivo de biopsia
Bernardo D. et al. Gut 2007 Clin Exp Immunol 2008
27
Zimograma técnica electroforética, para revelar
bandas que degradan el mismo sustrato.

• Enzimas post-prolina (bacterias)
• Matrix Metallopeptidasa-9
• MMP9, M10.004, 92 kDa
• Prolyl Oligopeptidase
• POP, S09.001, 80,7 kDa
• Dipeptidylpeptidase II
• DPP7, S28.002, 54,3 kDa
• Proline-specific peptidyldipeptidase
• Streptomyces, M9D.002

Biopsias controles no-EC (1,2), EC activa (3,4),
en DSG (5) Pacientes muestran 7 perfiles con
actividad degradadora gliadina de origen
bacteriano
Bernardo D et al. Gut 200958887-7
28
Posibles tratamientos complementarios

1. Estrategias de tipo cuantitativo

Paliativas, impiden la llegada del gluten al
intestino a) Generación de cereales no
inmunogénicos Selección de cultivos.
Modificación genética de cereales b) Destrucción
del gluten, o bloqueo de su entrada Enzimas
proteolíticos. Ligandos (Acs). Bloqueo de zonulina
2. Estrategias de tipo cualitativo
Tratan la causa, modifican la respuesta al
gluten a) Inhibición de la respuesta adaptativa
TGt, HLA-DQ2 b) Bloqueo de mediadores
antagonistas de CCR, a4b7, citocinas (IL15,
IFNg, IL21, otras), TNFa (en EC refractaria) c)
Inducción de tolerancia falta por identificar
epítopos dominantes y estrategias eficaces (Sobre
células dendríticas)
Falta un modelo animal para estudiar eficacia,
toxicidad/seguridad
29
Posibles puntos de intervención terapéutica
Anticuerpos anti-gluten
Péptidos de gluten
IL15Ra
zonulina
HLA-clase I
CD8
MICA
NKG2D
tolerancia
TGt
IL21
IFNg
TCRab
CD4
DQ2
EA2008
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Inmunoterapia en la enfermedad celíaca Vacuna
realidad o ciencia ficción?
-Podría elegirse entre la dieta sin gluten o la
vacuna, aunque su eficacia sería de alrededor de
3 años -Sólo para pacientes DQ2/DQ8 y Biopsia
confirmada -Actúa sobre la respuesta inmune
adaptativa -Criterios similares a la
inmunoterapia utilizada en alergia y
enfermedades autoinmunes -Problemas es una
inyección! Cómo controlar la inmunidad
innata al gluten? Qué dosis utilizar y cuál es
la vía óptima? Qué péptido/epitopo T elegir ?
(eficacia x3)
Objetivo re-inducción de la tolerancia al gluten
2c
EA2006
31
Epítopos estimuladores de los linfocitos T CD4
Péptido origen HLA TG2 secuencia Glia
(206-217) gliadina DQ8 parcial
SGQGSFQPSQQN Glt (723-735) glutenina DQ8
no QQGYYPTSPQQSG Glia-g1 (138-153)
gliadina DQ2 si QPQQPQQSFPQQQRP Glia-a2
(62-75) gliadina DQ2 si
PQPQLPYPQPQLPY Glia-a9 (57-68) gliadina DQ2
si QLQPFPQPQLPY Glia-a-20 (93-106)
gliadina DQ2 si PFRPQQPYPQPQPQ Glt-156
(40-59) glutenina DQ2 si
QPPFSQQQQSPFSQ Glt-17 (46-60) glutenina DQ2
si QPPFSQQQQSPFSQ Glia-g30 (222-236)
gliadina DQ2 no VQGQGIIQPQQPAQL Glia-a9
(57-68) gliadina DQ2 si QLQPFPQPQLPY
(Basado en Vader 2002, Koning 2003)
32
Posible mecanismo de Tolerancia oral
Antígenos solubles (dieta) y de la flora comensal
Epitelio
TSLP
PGE2
RA
TLR
CPA
TGFb
CD80/86
CD28
CD4
MHC
TCR
IL-10
16
33
Bloqueo de mediadores estrategias combinadas
Gliadina
CCL20
IL15
IFNg
IL21
Treg
Th1
IFNa
IL15 e IL21 potencian respuestas CD4 Th1.
Activan a LIE CD8 IL21 estimula liberación MMP
(fibroblastos) y producción CCL20
IL21 inhibe maduración de CDs y expresión de
NKG2D por LIE
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