Title: LES AUTO-ANTICORPS EN PRATIQUE COURANTE
1LES AUTO-ANTICORPS EN PRATIQUE COURANTE
- Dr. M.Delire Pédiatrie, Immunologie
- Dr. M.P.Lallemand Biologie Clinique
2Les maladies auto-immunitaires notions générales
3Physiopathologie
- Les maladies auto immunes sont la conséquence
dune rupture de la tolérance immune aux
antigènes du soi. - Les mécanismes de tolérance immune sont
- ? centraux (thymus et moelle osseuse)
- ? périphériques
-
4Mécanismes centraux de tolérance immune
- Les lymphocytes-T auto réactifs sont éliminés au
niveau du thymus - Les lymphocytes-B auto réactifs sont éliminés
avant sortie de la moelle osseuse
5Mécanismes périphériques de tolérance immune
- Les mécanismes centraux de tolérance immune sont
incomplets, et un certain nombre de lymphocytes
auto réactifs y échappent - Ces lymphocytes circulants sont maintenus
inactifs par toute une série de mécanismes - Les maladies auto immunes peuvent donc avoir une
origine centrale (thymus),ou périphérique
6- Les lymphocytes-T sont responsables de la grande
majorité des maladies auto immunes, car ils sont
nécessaires à la production dauto-anticorps par
les lymphocytes-B - Les lymphocytes-B sont responsables de la grande
majorité des lymphomes et leucémies, car
présentant un taux de mutation 1.000 fois
supérieur à celui des autres cellules de
lorganisme
7Causes des maladies auto immunes
- Facteurs de prédisposition génétique
- ? système HLA,
- ? anomalies du système du complément,
- ? anomalies du thymus, etc.
- Facteurs environnementaux
- ? Infections,
- ? hormones (oestrogenes, corticostéroïdes)
- ? radiations, toxines
- ? médicaments, etc..
8Exemples de relation entre phénotype HLA et auto
immunité
- HLA DR3 ? Maladie dAddison
- HLA DR4 ? Arthrite rhumatoïde
- HLA B27 ? Spondylarthrite ankylosante
- HLA DQ2 ? Hypersensibilité au gluten
- HLA DQ8 ? Diabète type I
- Etc
9Classification générale des maladies auto immunes
- 1. Maladies auto immunes systémiques dirigées
contre antigènes ubiquitaires - (ADN, nucléosome, histone, ANCA, etc.)
- ? lupus érythémateux disséminé,
- ? polyarthrite rhumatoïde,
- ? syndrome de Goujerot Sjögren,
- ? sclérodermie,
- ? polymysosite,
- ? vascularites
10Classification générale des maladies auto immunes
- 2. Maladies auto immunes spécifiques dorganes
ou de systèmes (quelques exemples) - ? thyroïdites auto immunes,
- ? diabète insulino dépendant (type I),
- ? maladie de Crohn, rectocolite hémorragique,
- ? myasthénie grave,
- ? syndrome de Guillain Barré,
- ? sclérose en plaques,
- ? etc., etc., etc,..
11Et en pratique ???
12Techniques utilisees
- Immunofluorescence
- Elisa
- RIA
- Immunodot
13IMMUNOFLUORESCENCE
- SUR CELLULES HEP-2
- Sur polynucléaires neutrophiles
- SUR COUPES DE TISSUS
14CELLULES HEP-2
- Cellules de carcinome laryngé humain
- Lames avec puits
- Mise en évidence danticorps dirigés contre le
noyau, les nucléoles, les organites
(mitochondries, lysosomes), les filaments
(actine) - Fluorescence au niveau du noyau homogène,
mouchetée, centromérique, granulaire,
nucléolaire, dots... - Fluorescence cytoplasmique granulaire, fibres,
dense
15- FLUORESCENCE AU NIVEAU DU NOYAU
16Fluorescence homogène
17Anti-centromere
18Nucleolaire homogene
19- FLUORESCENCE AU NIVEAU DU CYTOPLASME
20Anti-mitochondries
21Anti-actine
22Polynucleaires neutrophiles (ANCA)
23Anticorps anti-cytoplasme ANCA
- Dépistage par IF sur polynucléaires neutrophiles
- C-ANCA et P-ANCA
- Anti-PR3 (souvent c-Anca) évocateur de la
granulomatose de Wegener - Anti-MPO (souvent p-Anca) sont retrouvés dans la
maladie de Churg et Strauss, la polyangéite
microscopique et les glomérulonéphrites
nécrosantes pauci-immunes. - Ces vascularites auto-immunes sont rares
(prévalence lt 5/100.000 personnes
24COUPES DE TISSUS
- ESTOMAC / REIN
- ESTOMAC / REIN / FOIE
- ŒSOPHAGE
-
25ANTI-ACTINE
26ANTI-CELLULES GASTRIQUES
27Anti-mitochondries
estomac
Muscle lisse
rein
28ELISA - eiadosage immuno-enzymatique sur milieu
solide
- Utilisation de microplaques ou de crayons
- Automatisation possible
- Dosage de dsDNA, nucléosomes MPO, PR3
29Dot
- Le dot est un monotest constitué dune membrane
sur laquelle sont coatés en fines lignes
parallèles différents antigènes purifiés et
caractérisés biochimiquement. - Une tigette synthétique sert de support à la
membrane coatée . - Cette technique permet en une seule incubation du
sérum, de tester plusieurs paramètres en fonction
du type de dot choisi (panel dantigènes). - La lecture du test se fait simplement à loeil nu
ou via un scanner.
30Feuille lecture scanner dot hepatique
31Utilité des autoanticorps en medecine generale
32- Un casse-tête pour le médecin ? ???
33Auto-anticorps non specifiques dorgane - ana
Prévalence des ANA
LED induit 100
Sclérodermie systémique 85-98
Polymyosite 40-78
S. De Gougerot Sjögren 50-95
Arthrite rhumatoïde 20-40
Arthrite psoriasique 15
Myasthénie grave 40-60
Sujet sain gt 60 ans 5-30
Hiemanta M. et al. Am Med 1996 23283-91
34Anticorps anti-mitochondries
- Retrouvés dans 95 des Cirrhoses biliaires
primitives - CBP femmes de 30 à 70 ans, prurit, asthénie et
ictère. - Lésions histologiques (nécrose des canalicules
biliaires avec réaction inflammatoire) - AMA pour le DD des pathologies hépatiques
cholostatiques.
35La cirrhose biliaire primitive CBP
- Prurit (peut apparaître pour la première fois au
cours dune grossesse). Un prurit isolé est
fréquemment lunique symptôme inaugural !!! - Fatigue
- Signes de cholestase (ictère , hyperbilirubinémie,
élévation des PAL) - Incidence CBP 10 cas/100.00 personnes
- Prédominance féminine nette
- 90 à 95 des malades sont des femmes entre 30 et
60 ans
36CPB et serologie
- Anticorps anti-mitochondries (anti-M2)
retrouvés pratiquement dans tous les cas - Dautres anticorps peuvent aussi être retrouvés
(mais toujours en association avec les
anti-mitochondries type M2) - - anti-centromères (association avec S. de Crest
dans 10 à 20) - - anti-SSA/SSB (association avec S. de Gougerot
Sjögren)
37Anticorps anti-muscles lisses et lkm
- Unique moyen pour le diagnostic dune hépatite
chronique auto-immune de type I (anti-actine) ou
de - type II (anti-LKM)
- Traitement de choix HCA corticothérapie
- Interferon a contre-indiqué?avant de traiter par
IFNa pour une suspicion dhépatite C, il faut
rechercher la présence des Ac-muscles lisses
(spécificité actine !) et Ac-LKM pour écarter le
diagnostic dHCA
38Cholangite sclerosante primitive
- ANCA dans 60 à 70 des cas mais PR3 et MPO
négatifs - Diagnostic différentiel des hépatites chroniques
avec cholostase - ? anti-actine hépatite auto immune type I
- ? anti-LKM hépatite auto immune type II
- ? anti-mitochondrie cirrhose biliaire primitive
- ? ANCA cholangite sclérosante primitive
-
39Quelle strategie ???
40maladies auto-immunes
- Indications recherche auto-anticorps
- Arthrite
- Raynaud
- Rash cutané
- Vasculite
- Fièvre dorigine indéterminée
- Sécheresse buccale ou oculaire
- Faiblesse musculaire proximale
- Hématurie, protéinurie
- Cytopénies
- Thromboses à répétition
41Importance des donnees cliniques
- La recherche des auto-anticorps ne doit pas
figurer dans un bilan de base - Signes cliniques suspects ?demande auto-anticorps
ciblée (restriction INAMI) - Le protocole du laboratoire doit être explicite
- Le titrage dun anticorps anti-nucléaires, la
description de la fluorescence observée, la
caractérisation éventuelle des antigènes reconnus
sont incontournables, les performances du test
doivent être documentés - Tout anticorps détecté ? MAI
42Les limites
- La quantification des anticorps peut être
imprécise - Variabilité importante selon les techniques
- Ne pas confondre spécificité et valeur prédictive
positive - Toujours intégrer les résultats de laboratoire au
dossier clinique
43En resume.
MALADIES SYSTEMIQUES AUTO-ANTICORPS SPECIFIQUES
CONNECTIVITES
Lupus érythémateux disséminé Nucléosomes, dsDNA, Sm, PCNA
Lupus cutané subaigu SSA
Maladie de Sjögren SSA/SSB
Sclérodermies Centromère, nucléolaire, Scl70
Syndrome de Sharp RNP
Dermatomyosite Mi-2
Polymyosite Jo1, PL12, PL7, SRP
Polymyosite/sclérodermie PM-Scl, Ku
Calibri (Corps)
44VASCULARITES
Maladie de Wegener c-Anca, PR3
Microangiopathie Glomérulonéphrite microangiopathique p-Anca, MPO
Syndrome de Churg-Strauss c-Anca, MPO
MALADIES DU FOIE
Hépatite auto-immune type I Actine, SLA
Hépatite auto-immune type II LKM1
Cirrhose biliaire primitive Mitochondries M2
45 Merci pour votre attention