SISTEM GOL.ABO

1
SISTEM GOL.ABO
2
GOLONGAN GOLONGAN DARAH ABO
Antigen pada sel Antibodi dalam serum
Gol A A Anti-B
Gol B B Anti-A
Gol AB AB Tidak ada
Gol O Tidak ada Anti-A anti-B
3
Sistem ABO

• Th 1900 Karl Landsteiner
• Menemukan gol A,B,O
• Masing2 serum orang tersebut mengandung
  antibodi terhadap antigen yang tidak ada pada sel
  darah merahnya
• Th 1902- von Decastello dan Sturli menemukan gol
  AB.

4
Sistem ABO

• Sistem golongan darah pertama yg ditemukan ,
  merupakan golongan darah yg terpenting dalam
  transfusi darah.
• Merupakan satu2nya sistem, yang antibodinya
  dapat diperkirakan terdapat dalam serum orang
  yang tidak pernah expose pada sel darah merah
  manusia.

5
Sistem ABO

• Oleh karena antibodi2 ini ,transfusi darah dengan
  gol ABO yang tidak cocok, akan menyebabkan reaksi
  transfusi hemolitik intravasculair yang berat
  dengan manifestasi reaksi transfusi hemolitik
  yang akut.
• Pemeriksaan kecocokan gol ABO donor dan resipien
  merupakan dasar pemeriksaan pretransfusi

6
Pewarisan dan genetika

• 1910-EpsteinOttenberg gol ABO diwariskan
• Von dungern dan Hirszfeld mengkonfirmasi bhw gol
  ABO secara genetika diwariskan dg meneliti pada
  72 keluarga dg 102 anak.
• Mereka menemukan bahwa pewarisan agglutinogen A
  dan B menurut hukum Mendels.
• Gen ABO adalah autosomal(tidak terdapat pada sex
  chromosome)Masing2 orang mempunyai 2 copies gen
  yg menandai gol ABO mereka.(satu berasal dari ibu
  dan satu berasal dari bapak)

7
Pewarisan dan genetika

• Gol darah A dan B dominant terhadap gol O
• Gen Gol A dan B adalah co-dominant.berarti bahwa
  seorang mewarisisatu gen gol A dan satu gen golB
  sel darah merah nya akan mempunyai antigen gol A
  dan B.Alleles disebut A(yg menghasilkan A
  antigen),B(yg memproduksi B antigen) dan O(yg
  nonfungsional dan tidak memproduksi A atau B)

8
Ringkasan gol darah,antigen sel darah merah
kemungkinan genotype
Human blood group Red cell antigens Serum antibodies Possible genotype
A A antigen Anti-B AA atau AO
B B antigen Anti-A AA atau BO
O none Anti-Aanti-B Hanya OO
AB Adan B antigen None Hanya AB
9
DASAR GENETIK GOL ABO

• Gen yang bertanggung jawab terhadap gol
  ABO-mewarisi 2 gen golongan darah
• Kromosom dari ibu membawa salah satu dari gen
  A,gen B atau gen O
• Kromosom membawa salah satu dari gen A,gen B atau
  gen O

10
DASAR GENETIK GOL ABO

• Genotip
• gen2 yg diturunkan dari masing2 golongan
  darah orang tua yg ada pada kromosom
• Fenotip
• efek yg bisa terlihat dari gen2 yg diwariskan
  misalnya golongan darah itu sendiri

11
DASAR GENETIK GOL ABO

• Gen A dan B bersifat dominan atas gen O
• jadi fenotip A dapat berasal dari salah satu
  genotip AA atau genotip AO
• Fenotip B dapat berasal dari salah satu genotip
  BB atau genotip BO

12
Kombinasi gen2 dan golongan darah yg terbentuk
Genotip Golongan darah (Fenotip)
AA A
AO A
BB B
BO B
AB AB
OO O
13
Genotip AO
BO
Genotip AB AO
BO OO
Fenotip AB A
B O
Pohon keluarga golongan ABO
14
GenABO

• Phenotype gol darah ABO ditentukan oleh alleles
  pada 2 chromosome yaitu chromosome 9 yg mempunyai
  gen ABO allele dan chromosome 19 yg mempunyai gen
  yg menandai pembentukan H antigen yg mana dapat
  atau tidak dapat merubah allele yg ada pada
  chromososme 9.

15
GenABO

• Tidak seperti antigen red cell yg lain kedua gen2
  ini tidak menandai utk antigen yg sebenarnya.Gen2
  ini menandai utk enzyme yg sebenarnya membentuk
  antigen pada struktur precursor pada sel darah
  merah.Enzyme menentukan gol ABO seseorang dg
  mengkatalisa penempelan gol darah yg disebut
  sugar /basa? pada antigen precursor
  carbohydrate.Enzyme diproduksi oleh gen pada
  chromosome 19 menambahkan sugar/basa? Pada
  precursor carbohydrate utk membentuk H antigen
  .Gen ABO bertanggung jawab utk menentukan
  phenotype A,B,O seseorang

16
GenABO

• Gen A dan B masing2 menandai aktiv enzyme yg
  mengenal antigen H dan melekat pada sugar yg
  menetapkan gol darah.Gen O biasanya amorph gene
  berarti tidak memproduksi aktiv enzyme.Sebagai
  akibat gol O tidak dapat memodifikasi antigen H .

17
ANTIGEN
A H
GENES
A
SUBST
BH
GENES
B
SUBST
H
H
ABH
AB
Precursor substance (P.S)
O
H
hh
A,B,AB,O
P.S
Tidak ada apa2
DARAH BOMBAY
18
N-acetyl galactosamine
D-galactose
N-acetylglucosamine
H gen
Le gen
L-fu -cose
Lea substance
Hsubstance
A gen
B gen
Le Se gen
A susbtabce
Leb substance
B substance
19
Antigen sistem ABO

• Gen ABO mempunyai 3 alleles A,B dan O yang
  berlokasi pada lokus ABO pada kromosom 9.
• Gen A dan B memproduksi enzym glycosyl
  transferase yang dipergunakan untuk membentuk
  antigen A dan B

20
Antigen sistem ABO

• Gen O tidak memproduksi enzyme sehingga
• Sel darah merah gol O tidak mempunyai antigen
  A dan B,tetapi mempunyai banyak antigen H yang
  merupakan rantai oligosacharida untuk membentuk
  antigen A atau B.

21
N-acetyl galactosamine
D-galactose
N-acetylglucosamine
H gen
Le gen
L-fu -cose
Lea substance
Hsubstance
A gen
B gen
Le Se gen
A susbtabce
Leb substance
B substance
22
Antigen sistem ABO

• Gen2 Hh dan Se terdapat pada kromosom 19 dan
  keduanya sangat berkaitan.
• Masing2 lokus mempunyai 2 allele.
• Salah satu dari allele tersebut tidak
  menghasilkan produk yang dapat dibuktikan/dilihat
  disebut Amorph.

23
Antigen sistem ABO

• Allele yang aktif pada lokus H,ialah H
  memproduksi enzym glycosyl transferase yang
  bekerja pada tingkat seluler untuk membentuk
  antigen H ,yang akan menjadi antigen A dan B
• Yang amorph disebut h,sangat jarang

24
ANTIGEN
A H
GENES
A
SUBST
BH
GENES
B
SUBST
H
H
ABH
AB
Precursor substance (P.S)
O
H
hh
A,B,AB,O
P.S
Tidak ada apa2
DARAH BOMBAY
25
N-acetyl galactosamine
D-galactose
N-acetylglucosamine
H gen
Le gen
L-fu -cose
Lea substance
Hsubstance
A gen
B gen
Le Se gen
A susbtabce
Leb substance
B substance
26
Antigen sistem ABO

• Gen Se bertanggung jawab terhadap adanya H pada
  glycoprotein pada epithelial sekresi seperti
  saliva.
• 80 populasi adalah sekretor
• Orang yang mempunyai gen Se adalah secretor.
• H akan diubah menjadi antigen A atau B bila
  orang tersebut mempunyai gen A atau gen B.
• Yang amorph disebut se/nonsecretor

27
Antigen sistem ABO

• Perbedaan bayi dan dewasa dalam aktivitas A,B dan
  H mungkin berhubungan dengan jumlah struktur yang
  bercabang yang terdapat pada membran sel pada
  umur2 yg berbeda.

28
Antigen ABO

• Pemeriksaan untuk mendeteksi antigen A dan B
  dengan aglutinasi langsung .Reaksi lebih lemah
  pada bayi daripada orangdewasa.Meskipun demikian
  dapat dideteksi pada embryo umur 5-6 mg
• Antigen A dan B tidak secara penuh berkembang
  pada waktu lahir,kemungkinan karena struktur
  cabang oligoscharida tumbuh bertahap.
• Pada umur 2-4 tahun expresi antigen A dan B telah
  penuh berkembang dan tetap konstan sepanjang
  hidup.

29
Antigen2 sistem ABO

• Glycosphingolipid yang membawa A dan B
  oligosacharida merupakan bagian integral dari
  membrane sel darah merah,sel epithelial dan sel
  endothelial .
• Bila orang tersebut mempunyai gen
  secretor,terdapat juga dalam bentuk larut dalam
  plasma,dalam sekresi cairan tubuh,saliva .

30
(No Transcript)
31
Antigen sistem ABO

• Gen2 terletak pada 3 lokus yang terpisah Gen
  ABO,Gen Hh dan Gen Se (Sekretor) mengontrol
  terjadinya dan lokasi antigen A dan B

32
Subgroups

• Subgroups ialah phenotype ABO yang berbeda dalam
  jumlah antigen yang ada pada sel darah merahnya
  dan pada sekretor,pada saliva ,sebagai akibat
  produk yg kurang effektif dari enzym
  glycosyltransferase.
• Subgroup A lebih sering ditemukan daripada
  subgroup B.

33
Reaksi-reaksi serologi dengan Anti-A,anti-AB Dan
Anti-A1
A1 A2 A1B A2B
Anti-A
Anti-AB
Anti-A1 - -
34
Macam2 Subgroups
Sub-gol A Frekuensi Antibodi Yg selalu ada Antibodi yg Kadang2 ada
A1 80 Anti-B Tidak ada
A2 20 Anti-B Anti A1 dlm 2 kasus
A1B 80 Tidak ada Tidak ada
A2B 20 Tidak ada Anti-A1 dlm 25 kasus
35
Subgroups

• Subgroup A terutama A1 dan A2
• A1 dan A2 bereaksi kuat dengan anti-A pada
  pemeriksaan aglutinasi langsung
• Perbedaan A1 dan A2 ialah dengan pemeriksaan
  dengan reagensia Lectin yg dibuat dari biji2an
  Dolichos Biflorus.

36
Subgroups

• Anti-A1 bereaksi baik pada suhu lt 37oc secara
  klinis tidak begitu penting kecuali bila reaktif
  pada suhu gt 37oc
• Pemeriksaan rutin dengan anti-A1 tidak perlu.

37
ANTIGEN
A H
GENES
A
SUBST
BH
GENES
B
SUBST
H
H
ABH
AB
Precursor substance (P.S)
O
H
hh
A,B,AB,O
P.S
Tidak ada apa2
DARAH BOMBAY
38
Sistem H

• Sistem H mempunyai 2 gen H dan h.
• Antigen H adalah molekul pendahulu antigen A dan
  B, sebelum menjadi antigen A atau B.
• Gol O tidak mempunyai antigen A dan B dan pada
  sel banyak antigen H.
• Banyaknya H antigen pada sel
• OgtA2gtBgtA2BgtA1gtA1B

39
ANTIGEN
A H
GENES
A
SUBST
BH
GENES
B
SUBST
H
H
ABH
AB
Precursor substance (P.S)
O
H
hh
A,B,AB,O
P.S
Tidak ada apa2
DARAH BOMBAY
40
Sistem H

• Seperti antigen A dan B , antigen seperti antigen
  H terdapat dialam.
• Individu dengan Oh,sel darah merah tidak
  mempunyai H,mempunyai anti-A dan anti-B dan
  mempunyai anti-H yang secara klinis berarti
  /berbahaya dan kuat.
• Pada Gol A1 , A1B , dan B ,antigen H yg dirubah
  ke A dan B hanya sedikit dan mempunyai
  anti-H,tetapi anti-H ini lemah,bereaksi pada suhu
  kamar dan secara klinis kurang berarti.

41
Sistem H

• Oh sel tidak punyai H,A dan B ditemukan
  pertamakali di Bombay,India disebut gol darah
  Bombay.
• Pemeriksaan gol darah serupa dengan gol O,akan
  tetapi bila diperiksa dengan gol O maka akan
  terjadi ketidak cocokan yg kuat pada immediate
  spin/sentrifugasi.

42
Sistem H

• Anti-H pada Oh bereaksi sekitar 4-370C semua sel
  darah merah kecuali dengan Oh .
• Pasien harus ditransfusi dengan darah Oh .
• Phenotype Oh akan terlihat reaksi dengan anti-H
  lectin (dari biji Ulex europaeus)
• Oh timbul karena pewarisan dari gen hh

43
Sistem H

• Gol Parabombay dapat phenotype Ah,Bh,atau ABh
• Tidak terdeteksi antigen H,tetapi mempunyai
  sedikit A atau B antigen tergantung dari gen
  individu pada Lokus ABO.
• Pemeriksaan dengan anti-A dan anti-B bisa tidak
  bereaksi atau positip lemah tetapi tidak bereaksi
  dengan anti-H lectin atau dengan anti-H dari Oh.

44
Sistem H

• Serum Ah dan Bh mempunyai anti-H selain anti A
  dan anti-B

45
Antibodi

• Individu mempunyai antibodi terhadap antigen A
  atau B yg tidak ada pada sel darah merahnya.
• Hal ini mengharuskan pemeriksaan ABO pada sel
  dan serum

46
Antibodi

• Waktu timbul
• Anti-A dan anti-B dapat dideteksi dalam serum
  setelah beberapa bulan setelah lahir.
• Hampir tidak pernah, ditemukan antibodi pada
  waktu lahir
• Sebagian besar antibodi yang terdapat dalam
  cord/umbilicus berasal dari ibu.
• Pembentukan meningkat pada umur 5-10 th dan
  menurun pada usia lanjut.

47
Antibodi

• Pada orang tua mempunyai anti-A dan anti-B yang
  lebih sedikit daripada orang muda
• Pemeriksaan anti-A dan anti-B pada bayi2 baru
  lahir atau pada umur lebih muda dari 4-5 bulan
  tidak dapat dianggap valid sebab antibodi bayi
  berasal dari transfer placenta IgG anti-A dan
  anti-B ibu.

48
IgM dan IgG(yg alamiah dan yg immun) anti-A dan
anti-B

• Setiap orang akan membuat ,kecuali gol AB ,IgM
  anti-A atau IgM anti-B sebagai akibat rangsangan
  lingkungan,makanan dll.
• Bila seorang mempunyai IgG anti- B maka
  dipastikan titer IgM anti-Anya akan tinggi.
  Dengan istilah titer anti-A tinggi .
• Pada pemeriksaan serum grouping akan melisiskan
  sel darah merah

49
IgM dan IgG(yg alamiah dan yg immun) anti-A dan
anti-B

• Antibodi yg bertiter tinggi penting pada keadaan
  berikut
• Transfusi whole blood gol O atau plasmanya pada
  orang yang bukan gol O
• Bila plasma gol O mengandung anti-AB yg bertiter
  tinggi ,dapat menyebabkan kerusakan sel darah
  merah atau reaksi transfusi.
• Hindari transfusi Whole Blood gol O pada yg bukan
  O,Atau hilangkan plasma secara aseptik terlebih
  dahulu-menjadi sel darah merah pekat/packed cell.

50
Antibodi

• IgG dapat melewati placenta ,bayi dengan ibu gol
  O merupakan risiko untuk terjadi hemolitik
  disease of the newborn.(HDN)

51
IgM dan IgG(yg alamiah dan yg immun) anti-A dan
anti-B

• Pada kehamilan bila ibu O dan bayinya A atau B
• IgG anti-AB dapat melewati placenta sehingga
  dapat merusak sel darah merah janin.
• Sewaktu lahir bayi dapat menderita anemia serta
  berwarna kuning akibat perusakan sel darah
  merah,( haemolytic disease of the newborn) dan
  bila karena IgG anti-D (Rhesus) maka kelainan
  biasanya lebih berat.

52
IgM dan IgG(yg alamiah dan yg immun) anti-A dan
anti-B

• Bila seorang bayi lahir kuning harus dicari
  penyebabnya.
• Ketidak cocokan gol ABO hanya merupakan salah
  satu penyebab.
• Bila perlu exchange transfusi(transfusi
  tukar),dasar untuk memilih sama ,apapun penyebab
  warna kuning tersebut.
• Periksa Direct antiglobulin test untuk melihat
  apakah sel bayi diselubungi oleh IgG.

53
Pemeriksaan laboratorium sistem ABO

• Penetapan gol darah ABO seseorang sangat
  berkaitan dg transfusi darah yg aman.Ada beberapa
  methode
• Serology Penetapan langsung antigen ABO dan
  naturally occuring antibodynya.Berarti penetapan
  gol darah merupakan upaya utama diUTD bentuk
  pemeriksaan meliputi dua komponen
• 1.Antibody yg specifik pada penetapan antigen ABO
  tertentu pada red cell
• 2.Cells yg diketahui gol ABOnya yg diagglutinasi
  oleh naturally occuring antibody dalam serum
  seseorang.

54
Pemeriksaan laboratorium sistem ABO

• Molecular biologyTermasuk penetapan langsung
  dari mutasi genotype yg sebenarnya yg menentukan
  phenotype seseorang .Proses ini terutama
  digunakan pada forensic medicine ,riset pada
  genetik populasi
• Pengembangan molecular biology merupakan revolusi
  kapasitas utk memeriksa mutasi pada genomic
  DNA.Proses ini disebut Polymerase Chain reaction
  .Proses ini memungkinkan specifik amplifikasi
  dari urutan DNA yg mengandung allele yg
  menentukan mutasi yg dapat dipelajari.

55
Pemeriksaan laboratorium sistem ABO

• PCR tidak cocok pada klinis/lingkungan rumah
  sakit karena peekrjaannya lambat dan labour
  intensive sehingga tidak cocok utk skala besar
  orang yg membutuhkan peemriksaan dg cepat

56
Pemeriksaan laboratorium sistem ABO

• Metode rutin ialah dg cara serology.
• Yg meliputi 2 cara peemriksaan
• 1.Antigen sel darah merah-antigen sel darah merah
  sebagai akibat penambahan enzym dari sugar yg
  menentukan gol darah pada ujung precursor
  oligosacharida.terdapat pada banyak individu
  lebih dari 2 juta ABO antigen perred cell.Yg
  termasuk
• H antigen
• A antigen
• B antigen

57
Pemeriksaan laboratorium sistem ABO

• Serum antibody-seseorang secara normal mempunyai
  naturally occuring antibody pada A,B,H antigen yg
  mereka tidak punya.Mereka timbul karena organisme
  lain(mis bakteria)mengexpresikan A,B,H antigen
  pada dinding sel,Expose yg terus menerus pada
  intestinal flora,food,dllmerangsang immune
  response pada antigen A,B,H yg mereka tidakpunya
• Pembentukan anti-A dan anti-B mulai pada beberapa
  bulan pertama.mencapai puncaknya pembentukan pada
  umur 5-10th.

58
Pemeriksaan laboratorium sistem ABO

• Produksi antibody menurun dg umur.
• AntiA dan anti-B gol B dan A biasanya IgM dan
  bereaksi baik pada suhu kamar
• Anti-A dan anti-B gol O biasanya IgG.Gol O
  memproduksi campuran anti-AB yg mengaglutinasi
  antigen A dan B.

59
Pemeriksaan laboratorium sistem ABO

• Dalam laboratorium pemeriksaan gol ABO antigen
  dan naturally occuring antibodies dapat dilakukan
  dg 2 cara
• Manual serology-biasanyaslide test,micro titer
  plates,dan glass tubes
• Automated methods mesin yg khusus yg serupa dg
  prinsip serology tetapimengauotmatisasi preses2
  tertentu (kadang2 termasuk interpretation.
• Kadang2 ada kondisi atau faktor yg dapat
  memberikan false negative reaction dg peemriksaan
  serology

60
Pemeriksaan rutin gol ABO

• Pemeriksaan dengan menggunakan anti-A dan anti-B
  untuk menentukan ada atau tidak adanya antigen
  disebut Pemeriksaan sel darah merah
  langsung.(Cell testing)
• Pemeriksaan dengan menggunakan sel darah A dan B
  untuk memeriksa anti-A dan anti-B dalam serum
  disebut pemeriksaan serum(serum testing)
• Pemeriksaan pada donor dan pasien harus
  pemeriksaan sel dan serum

61
           
 
62
Pemeriksaan rutin gol ABO

• Pemeriksaan gol ABO dapat dilakukan dengan slide
  test,tube test,microplate test.

63
Pemeriksaan rutin gol ABO

• Dahulu Reagensia untuk pemeriksaan dengan pool
  serum manusia dari orang yg sudah distimulasi
  dengan substance A dan B untuk memproduksi
  antibodi dengan titer tinggi.
• Sekarang reagensia ABO dibuat dari monoclonal
  Antibodies yang didapat dari biakan cell
  (cultured cell lines)

64
Pemeriksaan rutin gol ABO

• Pemeriksaan serum harus dilakukan dengan metode
  yg akan mendeteksi antibodi secara adekwat,tube
  test,microplate atau slide tehnik.
• waspada dengan slide test karena kemungkinan
  kontak dengan darah

65
Pemeriksaan gol ABO yg tidak rutin

• Reagensia anti-AB dipakai untuk cell typing
• Reagensia sel A2 dan O dipakai pada serum typing
• Alasan memakai anti-AB ialah lebih effektif
  daripada hanya anti-A dan anti-B dalam mendeteksi
  antigen yang lemah,tetapi hal ini tidak benar
  bila memakai reagen monoclonal.

66
Pemeriksaan gol ABO yg tidak rutin

• Sel untuk memeriksa serum komersial ada yg
  mempunyai sel A2 disamping A1 dan sel B .
• Hanya untuk menfasilitasi anti-A1 pada sample yg
  memperlihatkan adanya subgroup A.
• Sebagian besar A tidak mempunyai
  anti-A1,pemeriksaan rutin dengan reagensia ini
  tidak diperlukan kecuali bila ditemukan kelainan.
• Penting untuk mengikuti petunjuk dari pabrik
  mengenai reagensia dan pemakaiannya.

67
Perbedaan antara sel Typing Dan Serum Typing

• Pemeriksaan sel typing bila tidak sesuai dengan
  serum typing maka timbul perbedaan.
• Kelainan harus dicatat,penetapan golongan ABO
  harus ditunda sampai perbedaan hasil pemeriksaan
  dapat diselidiki.

68
Perbedaan antara sel Typing Dan Serum Typing

• Bila darah dari donor-darah tidak boleh
  dikeluarkan untuk transfusi .
• Bila darah dari pasien kemungkinan dapat
  diberikan dahulu sel darah merah gol O dan Rhesus
  yg compatible sampai pemeriksaan diselidiki.

69
Perbedaan antara sel Typing Dan Serum Typing

• Kelainan antara sel typing dan serum typing
  kemungkinan karena masalah intrinsic dengan sel
  darah merah atau serum,masalah berkaitan dengan
  pemeriksaan,atau kesalahan tehnik.
• Perbedaan timbul misalnya bila diharapkan hasil
  negatip ternyata keluar hasil positip,atau
  sebaliknya bila diharapkan hasil positip ternyata
  yang keluar hasil negatip.

70
ABO Grouping Tube Test

• Reagensia
• Polyclonal atau monoclonal anti-A
• Polyclonal atau monoclonal anti-B
• Anti-AB(optional)
• Suspensi sel darah merah 5 A,B,O

71
Procedure Cell Grouping

• 1.Siapkan 5 suspensi sel darah merah dalam
  saline
• 2.teteskan 1 drop anti-A ,1 drop anti-B, 1
  drop anti-AB pada 3 tabung yg sudah diberi label
• 3.tambahkan pada masing2 tabung 1 drop suspensi
  5 sel darah merah yg akan diperiksa
• 4.Secara halus campur,dan centrifuge 15-detik
  pada 3400 rpm atau 1 menit pada 1000 rpm
• 5.Secara halus diresuspensi .
• 6.baca,interpretasi dan catat hasil
  pemeriksaan,bandingkan dengan hasil pemeriksaan
  serum.

Anti-B
Anti-A
Anti-AB
Sel darah merah
1 drop Anti-A 1 drop 3-5 Suspensi sel Darah
merah
1 drop Anti-B 1 drop 3-5 Suspensi sel Darah
merah
1 drop Anti-AB 1 drop 3-5 Suspensi sel Darah
merah
72
Procedure Serum Grouping

• 1.siapkan 5 suspensi sel A,B,O dalam saline
• 2.tambah 1 drop sel A ,1 drop sel B,1 drop sel O
  pada tabung yg sudah diberi label
• 3.tambah 2 drop serum pdmasing2 tabung
• 4.Campur dengan perlahan2 dan centrifuge kira2 15
  detik pada 3400 rpm atau 1 menit pada 1000 rpm
• 5.Periksa serum diatas sel untuk melihat adanya
  hemolysis.Secara halus disuspensi sel dan periksa
  ada/tidaknya agglutinasi
• 6 .Baca ,interprete ,catat,bandingkan hasil
  pemeriksaan dengan yg didapat pada pemeriksaan
  sel

2 drops Serum 1 drop 5 suspensi Sel B
2 drops Serum 1 drop 5 suspensi sel O
2 drops Serum 1 drop 5 suspensi Sel A
73
           
 
74
Sistem Rhesus
75
(No Transcript)
76
System Rhesus

• Yg kedua setelah system ABO dalam masalah
  Immunogenecity
• Bukannaturally occuring antibodiesantibodies
  sebagai akibat stimulasi immunologis dg kontak
  langsung dg antigen pada sel darah merah(kecuali
  anti-E )
• 5 antigen utama D C c E e
• Antigen2 lain (sekarang total 56 antigen)

77
Antigen D

• Rh positive dan Rh negative
• Istilah ini tergantung dari ada tidaknya
  antigen D
• Kemungkinan klinis
• Kebalikan dari gol A dan B,seseorang yg tidak
  mempunyai antigen D tidak mempunyai anti-D
• Anti-D ditemukan setelah immunisasi mendapat
  transfusi darah atau kehamilan dengan D pos.

78
Antigen D

• Antigen D mempunyai effek immunogenitas yg lebih
  besar dari antigen2 lainnya,gt 80 orang yangD
  negatip yang mendapat transfusi D positip akan
  membentuk anti-D
• Untuk menghindari hal ini darah resipien dan
  darah donor harus diperiksa antigen Dnya untuk
  meyakinkan bahwa resipien D negatip mendapat
  darah D negatip

79
Antigen D

• Antigen2 lain sistem Rhesus
• 1940 ditemukan antigen2 lain
• C,c,E dan e

80
Rh system

• 2 linked genes yg berdekatan satu menandai utk
  antigan D dan yg lain menandai utk C/c dan E
  ata/e antigens
• Secara historis ada 2 theori
• Fisher race
• Wiener

81
Rh system

• Fisher Race theory
• 3 sets allelic genes
• C atau c,E atau e,D atau d dg d ialah amorph
• Orang tua Cc cc
• Dd Dd
• ee Ee
• AnakCde/cde atau Cde/cDE atau cde/cDE atau
  cde/cde

82
(No Transcript)
83
(No Transcript)
84
Perbandingan ketiga istilah
Wiener Fisher Race Rosenfield
Rho D Rh1
rh C Rh2
rh E Rh3
hr c Rh4
hr e Rh5
hr f(ce) Rh6
rhg G Rh12
85
Istilah2 Rhesus

• Penulisan haplotype
• Penulisan phenotype menyatakan haplotype dengan
  tulisan satu huruf R dan r,untuk haplotype yg
  memproduksi dan yang tidak memproduksi D.
• Subscript atau superscript menunjukan kombinasi
  adanya antigen lain.

86
Istilah2 Rhesus

• Misalnya R1 mempunyai D,C dan e bersama2
• R2 mempunyai D,c dan E
• Ro mempunyai D,c dan e
• dll

87
Pemeriksaan serologis untuk ekspresi Antigen Rh

• Untuk memeriksa apakah seseorang mempunyai gen
  C,c,E dan e, sel darah merah harus diperiksa
  dengan anti-C,-c,-E,-e.
• Bila sel darah menunjukan ada C atau c,E atau e
  maka orang tersebut dapat diperkirakan mempunyai
  gen2 tersebut.
• Bila hanya mempunyai C atau c,E atau e orang
  tersebut diperkirakan homozygos untuk antigen
  tersebut.

88
Penentuan Rh phenotype
C c E e D
- - - cde/cde
- CDe/CDe atau CDe/Cde
89
Anti-D Anti-C Anti-E Anti-c Anti-e Antigen Kemungkn Phenotype
0 D,C,c,e R1 r
0 0 D,C,e R1 R 1
D,C,E,c,e R1 R2
0 0 D,c,e RoRo/Ror
0 D,c,E,e R 2r
0 0 D,c,E, R2 R2
0 D,C,E,e R 1Rz
0 D,C,c,E R 2Rz
0 0 D,C,E Rz Rz
0 0 0 c,e rr
0 0 C,c,e rr
90
D Yang LEMAH/weak D

• Dahulu sel darah merah yg membutuhkan pemeriksaan
  tambahan untuk melihat ada/tidaknya D disebut Du.
• Istilah Du tidak dipakai lagi.
• Sel darah merah yg mempunyai bentuk D yg lemah
  disebut D positip atau D yg lemahweak D

91
Partial D

• Antigen D ialah mosaic misbeberapa bagian dari
  beberapa D yg lemah mewarisi gene yg memproduksi
  sebagian dari mosaic biasanya ditemukan bila D
  positip membuat allo anti-D

92
Partial D

• orang D pos memproduksi alloantibodi D yang
  tidak reaktif dengan selnya sendiri.
• Sel ini bereaksi kuat dengan anti-D
• Sel darah merah yang tidak mempunyai sebagian
  dari antigen D disebut D mosaic atau D varian
• Istilah yg terbaru ialah partial D

93
(No Transcript)
94
(No Transcript)
95
(No Transcript)
96
(No Transcript)
97
(No Transcript)
98
(No Transcript)
99
(No Transcript)
100
D Yang LEMAH/weak D

• Pada donor ,pemeriksaan D lemah perlu dilakukan
  dan diberi label D positip bila hasil pemeriksaan
  positip.
• Resipien tidak perlu dilakukan dengan prosedur2
  lain selain dengan pemeriksaan aglutinasi
  langsung.

101
Antibodi Rh dalam Serum pasien

• Sebagian besar anti-Rh timbul sebagai akibat
  expose dengan sel darah manusia
• setelah transfusi atau kehamilan,kecuali
  anti-E,anti-Cw.
• Yang paling kuat immunogen ialah D disusul oleh c
  dan E.

102
Rh antibodies

• IgG ,beberapa IgM jarang IgA (anti-e) bereaksi
  pada 37oC,secara klinis significant
• Invivo hemolysis-spleen
• Delayed hemolytic transfusion reaction
• Hemolytic disease of the born
• Bereaksi baik dg enzyme,bereaksi dg Indirect
  antihuman globulin
• Secara umum tidak mengikat complement

103
Rh antibodies

• Ada anti-Rh yang bersifat saline aglutinin
  tetapi sebagian besar bereaksi baik pada protein
  tinggi,antiglobulin atau enzym test.
• Anti-D yg reaktif pada saline juga akan bereaksi
  baik pada tehnik antiglobulin,tehnik enzyme

104
Antibodi Rh dalam Serum pasien

• Antibodi yg terdeteksi dapat bertahan sampai
  ber-tahun2.
• Bila kadar antibody menurun maka dengan expose
  transfusi/kehamilan berikutnya dapat dengan
  singkat meningkatkan antibodi sebagai secondary
  imune response.
• Anti-Rh tidak mengikat complement.

105
Pemeriksaan Typing Rhesus

• Pemeriksaan rutin Rhesus pada donor dan pasien
  hanya antigen D.
• Pemeriksaan untuk antigen Rh yang lain hanya
  untuk hal2 tertentu seperti mengidentifikasi
  antibodi mendapatkan darah compatibel pada
  pasien dengan anti-Rh,pada paternity
  testing,membuat panel sel darah merah,dll

106
Immunisasi Rhesus

• Responder
• Non Responder

107
(No Transcript)
108
(No Transcript)
109
Slide and modified tube anti-D

• Slide and modified tube anti-D
•          IgG anti-D in a protein concentration
  22 - 30
•          high concentration of albumin decreases
  zeta potential - direct agglutination
•          Rh ctrl - everything that is present in
  the anti-D except the anti-D itself.
•          Can be used for weak D testing

110
Saline anti-D

• IgM anti-D
• Suspended in 608 albumin
• Is saline reactive
• Often just used when ctrl positive
• Use actrl 6 albumin

111
Rh Grouping- Tube Test

• Reagensia
• 1.Anti-D
• 2.Rh control reagentsbovine albumin 22

112
Rh Grouping Tube Test

• 1.Teteskan 1 drop anti-D pada tabung yg sudah
  diberi tanda
• 2.Teteskan 1 drop Bovine albumin 22 pada tabung
  yg sudah diberi tanda
• 3.Tambahkan pada masing2 tabung1 drop 5
  suspensi sel darah merah yg akan diperiksa
• 4.Campurkan secara halus dan centrifuge kira2
  15detik pada 3400 rpm atau 1 minute pada 1000 rpm
• 5.secara halus diresuspensi sell dan periksa ada
  tidaknya agglutinasi
• 6 Derajat reaksi dan catat hasil pemeriksaan dan
  controlnya .
• 7.Bila negatip,Pemeriksaan dapat diteruskan ke
  pemeriksaan weak D

1 drop Anti-D 1 drop 5 suspensionCells To be
tested
1 drop Bovine albumin 22 1 drop 5
Suspension cells To be tested
113

• Pembacaan
• 1.Pemeriksaan Positip,kontrol negatip Rh positip
• 2.Pemeriksaan negatip ,kontrol negatipRh negatip
• 3.Pemeriksaan Positip ,kontrol positip invalid
  hasil pemeriksaan
• Pemeriksaan weak D diperlukan untuk
• Rh negative donor

114
(No Transcript)
115
Test untuk Weak D atau D yg lemah

• Reagensia
• anti-D
• Antihuman globulin reagent,polyspecific
• IgG coated red cell

116
Test untuk Weak D

• 1.Teteskan 1 drop anti D pada tabung yg sudah
  diberi tanda
• 2.Teteskan 1 drop reagen control(Bovine albumin
  22) pada tabung kedua yg sudah diberi tanda
• 3.Pada masing2 tabung tambahkan 1 drop suspensi
  5 sel darah merah yg akan diperiksa
• 4.Campur dan incubasi kedua tabung kira2 15-30
  minutes pada 37oC
• 5.Centrifuge 15 detik pada 3400 rpm atau1 minute
  pada 1000 rpm
• 6.secara halus diresuspensi sel dan periksa ada
  tidaknya agglutinasi

1 drop Bovine albumin 22 1 drop 5 suspensi
sel darah merah
1 drop Anti-D 1 drop 5 suspensi Sel darah merah
117

• Bila sel darah merah diagglutinasi kuat dengan
  anti-D tetapi tidak pada control,catat hasil
  pemeriksaan D positip jangan meneruskan ke
  antiglobulin test.
• Bila sel darah merah tidak diagglutinasi atau
  meragukan,cuci sel 3 kali dengan saline yg
  banyak,
• Setelah pencucian terakhir ,keluarkan saline
  secara total, tambahkan 2 drops reagensia
  antiglobulin serum.
• Campur secara halus dan centrifuge 15detik pada
  3400 rpm atau pada 1000 rpm 1 menit
• Secara halus dirisuspensi sel darah merah,periksa
  ada tidaknya agglutinasi dan tulis derajat
  agglutinasi dan catat hasil pemeriksaan

118

• Bila hasil pemeriksaan negatip ,tambahkan IgG
  coated sel darah merah dan ulangi sentrifugasi
  dan periksa ada tidaknya agglutinasi
• Agglutinasi pada keadaan ini meyakinkan adanya
  reagen antiglobulin yg aktip pada campuran
  pemeriksaan .
• Bila hasil pemeriksaan negatip pemeriksaan harus
  diulang,

119
Sistem Lewis
120
N-acetyl galactosamine
D-galactose
N-acetylglucosamine
H gen
Le gen
L-fu -cose
Lea substance
Hsubstance
A gen
B gen
Le Se gen
A susbtabce
Leb substance
B substance
121
Phenotype Lewis pada sel darah merah
Anti-Lea Anti-Leb Phenotype Cau-casian Black UTD DKI
- Le(ab-) 22 23 15.3
- Le(a-b) 72 55 62.2
- - Le(a-b-) 1-5 20.2 22.4
Le(ab) jarang jarang
122
Antibodi Lewis

• Terdapat sering pada individu
• Le(a-b-) tanpa ada stimulus sel darah merah.
• Le(a-b) tidak membentuk anti-Lea.
• Le(ab-) tidak membentuk anti-Leb
• Anti-Lea dan anti-Leb dapat bertahan lama pada
  serum Le(a-b-)

123
Antibodi Lewis

• Anti-Le dapat terdapat pada wanita hamil
• Anti-Lewis IgM ,tidak melewati placenta
• Dapat mengikat complemen,serum segar yg ada
  anti-Lewis dapat melisiskan sel dan lebih sering
  dengan yang ditreated dengan enzym
• Dapat mengaglutinasi sel darah merah pada media
  saline.kadang dapat terlihat reaksi pada 37oC
  atau pada antiglobulin test.

124
Antigen Lewis pada Transfusi

• Anti-Lewis pada resipien siap dinetralisasi oleh
  substance Lewis dari plasma donor
• Oleh karenanya jarang terjadi ,anti-Lewis
  menyebabkan lysis pada darah Le (a) atau Le(b)
  yg ditransfusikan.
• Tidak perlu melakukan typing Lewis pada darah
  donor sebelum transfusi atau crossmatching untuk
  pasien yg ada anti-Lewis.tetapi tetap mencari
  darah yg compatible.

125
Sistem P
126
Phenotipe Dan Frekwensi
Anti-P1 Anti-P Anti-Pk Anti-PP1Pk Pheno tipe White Black
- P1 79 94
- - P2 21 6
- - - - P(Tj(a-)
- P1k Sangat jarang Sangat jarang
- - P2k Sangat jarang Sangat jarang
127
Sistem P

• Terdapat pada 80 orang kulit putih
• 20 orang kulit putih yg tidak mempunyai P1
  disebut P2.
• P1 dan P2 mempunyai antigen P pada sel darah
  merahnya.
• Gol p tidak mempunyai antigen P pada sel darah
  merahnya (Dulu disebut gol Tj(a-))
• Orang yg tidak mempunyai P pada sel darah
  merahnya mempunyai antigen Pk

128
Anti- P1

• Kekuatan antigen P1 pada setiap P1 positip
  berbeda2.Antigen akan rusak dengan cepat pada
  penyimpanan dan pemeriksaan P1 memerlukan contoh
  darah yg segar.
• Anti-P1 termasuk antibodi alamiah.
• Dapat ditemukan pada P2.

129
Anti- P1

• Reaksi optimal pada 4oC.Jarang menyebabkan reaksi
  hemolitik.
• Anti-P IgM-tidak melwati placenta tidak
  menyebabkan HDN

130
Anti-PP1Pk

• Orang dengan gol p mempunyai anti
  PP1Pk(anti-Tj(a-)) dalam serumnya,antibodi ini
  bersifat hemolisin dapat sebabkan reaksi
  transfusi hemolitik dan HDN
• Antibodi yg kuat bereaksi pada 4oc,22oC,37oC dan
  dengan Antiglobulin test,saline,albumin dan
  metode enzym.

131
Anti-P

• Gol Pk mempunyai anti-P dalam serumnya bereaksi
  dengan sel P1 dan P2 tapi tidak dengan sel p.
• Bereaksi kuat pada 4oC,22oC,37Oc dan antiglobulin
  test,saline,albumin dan metode enzym.
• Autoantobodi dari Paroxysmal cold hemoglobinuria
  sering mempunyai anti-P.

132
P1 Substance

• P1 substance atau cairan kista hydatid yang
  diperoleh dari pigeon eggs dapat menghambat
  aktivitas anti-P1
• Inhibisi dapat membantu identifikasi antibodi

133
Sistem MNSs
134
Sistem gol MN

• Fenotip gol MN
• Gol N genotip NN
• Gol M genotip MM
• Gol MN genotip MN

135
Sistem MN

• Dosis effek
• Terdapat reaksi lebih kuat titer yang lebih
  tinggi terhadap sel yg homozigot daripada yg
  heterozigot

Sel M Sel N Sel MN
Anti-M -
Anti-N -
136
Anti-M

• Sering ditemukan pada serum manusia pada saline
  agglutinin
• Timbul tanpa adanya stimulasi/natural antibodi
• Bisa bereaksi disuhu dingin dan hangat,reaksi
  diperkuat dengan albumin dan Liss,tidak bereaksi
  dengan enzym treated cell,karena antigen M
  terpotong dari permukaan sel oleh enzym
  proteolytik.
• Terutama IgM,dapat juga IgG
• Secara klinis tidak berbahaya waspada bila
  reaktif pada Indirect coombs test,bahaya HDN
  Reaksi transfusi

137
Anti-N

• Serupa dengan anti-M
• Jarang ditemukan

138
Anti-S,anti-s

• Anti-S,-s,U timbul setelah ada stimulasi
• Anti-S bisa IgM atau IgG,bereaksi baik pada
  37oC,pemeriksaan pada saline atau antiglobulin
  test.
• Anti-s kebanyakan IgG.Pemeriksaan dengan
  antiglobulin test atau dengan tehnik enzym.
• Anti-S dan anti-s dapat menyebabkan HDN dan
  reaksi transfusi hemolitik.

139
SISTIM GOLONGAN DARAH Ii
140
Sistem golongan darah Ii

• Orang dewasa mempunyai antigen I ,
• sedikit /tidak ada sama sekali i
• Kadang2 ada anti-I dalam serum bila phenotype i.
• Bayi mempunyai i
• Setelah umur 2 tahun sel bayi akan bereaksi kuat
  dengan anti-I dan reaksi lemah dengan anti-i

141
Antibodi

• Anti-I IgM
• natural antibody
• Bereaksi kuat pada 4oC
• Tidak bereaksi dengan sel darah merah umbilicus.
• Anti-I dan anti-i dapat ditemukan pada AIHA type
  cold.

142
Sifat serologis anti-I dengan sel darah merah
yang disuspensi dengan saline
Anti-I Anti-i
4oC I dewasa 4 0-1
i cord/umbilicus 0-2 3
i dewasa 0-1 4
22oC I dewasa 2 -
icord - 2-3
idewasa - 3
143
Banyaknya I /I antigen pada sel2 darah merah
manusia yg ber-beda2
Phenotype Antigen
I i
I dewasa Banyak Samar2/sedikit
I umbilicus sedikit Banyak
iumbilicus Samar2/sedikit Banyak
144
Sistem gol. Kell
145
Sistem gol Kell

• Pemeriksaan dengan anti-K dan anti-k
• Terdapat 3 fenotip
• K genotipnya KK-(0,12)
• Kk, genotipnya Kk-( 9)
• k genotipnya kk-(91,8)
• Antigen lain Kpa,Kpb,Jsa,Jsb

146
Sistem gol Kell

• Antigen Kell merupakan antigen yang kuat setelah
  golongan ABO
• Antigen K suatu antigen yang baik,yang tidak
  mempunyai antigen K fenotip K null Homozigot
  Ko/Ko

147
Anti-K

• Anti-K
• Immun antibody
• IgG
• Pemeriksaan dengan Indirek antiglobulin
  test.Tidak memperlihatkan dosis effek
• Reaksi tidak dihambat bila red cell ditreated
  dengan enzym
• Anti-k,-Kpa,Kpb,-Jsa,-Jsb jarang ditemukan

148
Aspek klinis

• Transfusi
• Dapat sebabkan reaksi transfusi,bila donor K
  ditransfusikan pada pasien yang mempunyai anti-K
• Kehamilan
• Dapat sebabkan HDN,bila bayi K dan ibu mempunyai
  anti-K
• Donor digunakan red cellnya

149
Sistem Kidd
150
Antigen Kidd

• Terdapat antigen Jka dan Jkb
• Pemeriksaan dengan anti-Jka dan anti-Jkb
• 4 fenotip Jk (ab-)
• Jk(ab)
• Jk(a-b)
• Jk(a-b-)
• Jk(a-b-) jarang ditemukan,karena silent allel
  pada lokus Kidd

151
Aspek klinis

• Transfusi
• Anti-Jka dan anti-Jkb dapat mengikat
  complement,dapat sebabkan reaksi transfusi
  hemolitik.
• Anti-Jka dan anti-Jkb cenderung untuk mengurang
  kekuatannya pada pasien2 yg mempunyai antibody
  tersebut,oleh karena itu sering kadar dalam serum
  rendah,se-akan2 memberikan hasil pemeriksaan yang
  negatip,dan oleh karena itu sering sebabkan
  reaksi transfusi hemolitik yg lambat.

152
Sistem Duffy
153
Sistem Duffy

• Terdapat 2 allel Fya dan Fyb
• Pemeriksaan dengan anti-Fya dan
• Anti Fyb
• Fy(ab) genotip FyaFyb
• Fy(ab-) FyaFya atau FyaFy
• Fy(a-b) FybFyb atau FybFy
• Fy(a-b-) FyFy

154
Antigen Duffy

• Fy(a-b-) jarang ditemukan pada orang
  Eropa,kebanyakan ditemukan di Afrika tengah
  Barat.
• Fenotyp (a-b-) mempunyai kekebalan terhadap
  infeksi malaria.
• Sel darah merah dari fenotip ini resistant/kebal
  terhadap invasi plasmodium vivax.

155
Antibodi

• Anti-Fya dan anti-Fyb
• Biasanya IgG
• Bereaksi pada indirek antiglobulin test.
• Anti-Fya dapat mengikat complement
• Anti-Fy timbul sebagai akibat rangsangan
  transfusi darah
• 1/3 orang dapat membentuk anti-Fya apabila kena
  rangsangan antigen,tetapi anti-Fya hanya terdapat
  pada beberapa orang saja yang mendapat
  transfusi,Fya merupakan antigen yang lemah.

156
Aspek klinis

• Transfusi darah
• Pernah sebabkan reaksi transfusi hemolitik
• Kehamilan
• Sebabkan HDN
• Donor
• plasma dibuang yang ditransfusikan hanya red
  cellnya saja.

157
(No Transcript)
158
(No Transcript)
159
(No Transcript)
160
TERIMAKASIH