Scrapie Eradication

1
Controllo della Scrapie
Selezione genetica Un nuovo strumento per
lallevatore
Maggio 2005
2
Di che cosa parleremo

• Scrapie
• Storia e distribuzione
• concetti base della malattia

• Genetica della Scrapie
• Come usare la genotipizzazione per la selezione
  genetica alla resistenza
• Le vostre domande

3
Storia e Distribuzione della Scrapie

• Descritta per la prima volta in Inghilterra nel
  XVIII secolo
• Diffusa in tutto il mondo, solamente lAustralia
  e la Nuova Zelanda vengono considerate Scrapie
  Free

4
Concetti Base della malattia

• Trasmissione e periodo dincubazione
• Gli ovini e i caprini che sono suscettibili alla
  scrapie in genere si infettano da agnelli
  attrraverso il contatto con placente e liquidi
  fetali di pecore/capre infette non
  necessariamente dalla propria madre
• In genere il periodo dincubazione va da 2 a 5
  anni
• Sempre mortale non esistono cure o vaccini

5
La Scrapie e i montoni

• I montoni prendono la scrapie
• I montoni infetti non sembrano in grado di
  trasmettere la scrapie
• La genetica del montone influenza la
  suscettibilità alla scrapie dei propri figli

6
Capre

• Ad oggi non sono stati identificati genotipi
  resistenti nelle capre.
• Pertanto, tutte le capre devono essere
  considerate suscettibili.

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I segni clinici (variabili) sono

• Modificazioni del comportamento
• Iperreattività ai rumori
• Prurito e grattamento
• Problemi neurologici
• Perdita della coordinazione
• Sbattimento delle labbra (nibble)
• alterazione dellandatura (Bunny hopping/walking
  on eggshells)

• Perdita di peso
• Debolezza, incapacità ad alzarsi
• Morte, talvolta improvvisa

8
Diagnosi

• Animali morti
• Cervello (SNC) e tessuti linfatici
• Animali vivi
• Tessuti linfatici della terza palpebra (o
  tonsille)

9
Di che cosa tratteremo

• La Scrapie
• Storia e Distribuzione
• Concetti base della Malattia

• Genetica della Scrapie

• Come si può usare la tipizzazione genetica negli
  allevamenti infetti e aderenti al piano
• Le vostre Domande

10

• I genotipi che controllano la suscettibilità e la
  resistenza alla malattia sono LA cosa più
  importante che un allevatore deve sapere sulla
  genetica della scrapie!

11
La Genetica della Scrapie

• Obiettivo di questa presentazione è
• Aiutare gli allevatori a capire come usare la
  genetica per proteggere i loro allevamenti
  dallinfezione da scrapie.
• Non vogliamo farvi diventare dei genetisti

12
La Scienza dietro la Genetica della Scrapie ci
dice

• Alcune pecore si ammalano più facilmente di altre
• La Genotipizzazione è usata per identificare i
  geni che controllano la suscettibilità o la
  resistenza alla scrapie

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13
Cosè la Genotipizzazione?

• La Genotipizzazione è un test del DNA
• Un semplice esame del sangue o di tessuti
  permette di determinare il genotipo degli ovini
• il genotipo non cambia mai. Un solo esame basta
  per tutta la vita.
• Può essere definito a qualsiasi età

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Genotipizzazione

• E preferibile usare un sistema di
  identificazione permanente (microchip o 2 marche)
  sui capi da esaminare
• Il prelievo deve essere eseguito sotto il
  controllo di un veterinario riconosciuto
• Usare provette con EDTA e farle arrivare al
  Laboratorio prima possibile
• Il Genotipo rimane lo stesso per tutta la vita
  dellanimale

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Genotipizzazione

• Una genotipizzazione viene riconosciuta
  ufficialmente se
• il sangue è prelevato da un veterinario AUSL o
  riconosciuto
• Il capo è identificato ufficialmente
• Il campione è inviato al lab accompagnato
  dallallegato IV del DM 17/12/2004
• Il lab è stato riconosciuto dal Min.Salute

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Laboratori che effettuano le genotipizzazioni

• Laboratorio Gruppi sanguigni di Cremona
• solo per allevamenti iscritti a libro genealogico
• IZSLER - Sezione di Modena
• Ovini della Regione Emilia-Romagna

17
Cosè la Genotipizzazione? (cont.)

• Può capitare che un ovino già genotipizzato debba
  essere ricampionato
• Problemi di identificazione dellanimale o del
  campione
• Campione non idoneo per lesame (degradato)
• Errori nellidentificazione dellanimale
• Verifica sul genotipo effettuata per sorveglianza
  da parte della A.USL
• Il test del genotipo misura solo la
  suscettibilità e non se lanimale ha la scrapie

18
Dettagli di Genetica

• Gli ovini hanno un paio di geni che influenzano
  la suscettibilità alla scrapie
• Questi geni sono conosciuti come geni PRNP (PrioN
  Protein)
• Ogni ovino ha due copie (un paio) di geni PRNP
  Una copia da ciascun genitore

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Dettagli di Genetica (cont.)

• Negli ovini, il gene PRNP produce
• Una proteina prionica normale PrPc
• Negli ovini infetti da scrapie la PrPc viene
  modificata in
• PrPsc, proteina prionica scrapie, la forma
  patologica e infettiva della proteina prionica

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La teoria del prione

• La PrPc esiste in tutti gli animali con piccole
  differenze di specie
• PrPsc produce più copie di sé stessa, provocando
  una modificazione strutturale della proteina
  prionica normale.

21
Dettagli sul Gene PRNP

• Tutti i geni, PRNP compreso, sono composti da
  codoni
• Ciascun codone dice alla cellula di mettere uno
  specifico aminoacido in un punto particolare di
  una proteina che sta costruendo
• La proteina prionica PrPc (prodotta dal gene
  PRNP) ha 254 aminoacidi
• I punti dei 254 aminoacidi sono numerati da 1 a
  254

22
Geni e Scrapie

• Nel gene PRNP, tre codoni influenzano la
  suscettibilità alla scrapie
• Codone 171
• Codone 154
• Codone 136

23
Genetica Suscettibilità alla Scrapie

• Codone 136Influenza la suscettibilità negli
  ovini esposti ad alcuni ceppi di scrapie
• Codone 154 Gioca un ruolo minore
• Codone 171 E il maggiore determinante della
  suscettibilità alla scrapie

24
Codoni 136 171 e i loro specifici aminoacidi

• Il Codone 136 codifica per laminoacido Valina
  (V) o Alanina (A)
• Il Codone 171 codifica per laminoacido Glutamina
  (Q), Arginina (R), Istidina (H), o Lisina (K)
• Si considera che Q, H, K abbiano la stessa
  suscettibilità e vengono refertati come Q dalla
  maggior parte dei laboratori

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Come si scrivono i Genotipi

• I genotipi ovini possono essere scritti in due
  modi
• Lettere degli aminoacidi ARQ/ARR, ARR/VRQ, etc.
  (lordine delle lettere è quello numerico dei
  codon 136, 154 e 171), oppure
• Il numero del Codone seguito dall amino acido
  corrispondente 171QR, 171RR, etc.

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Geni Ovini Uno da ciascun genitore

• Ogni genitore dà una copia del gene allagnello.
  Il gene è in genere uno di questi tre ARQ, VRQ,
  ARR,
• Quindi, ogni agnello porta due copie del gene.
  Le combinazioni possibili sono ARQ/ARQ, ARR/ARQ,
  ARR/ARR, ARQ/VRQ, ARR/VRQ, VRQ/VRQ.
• I genotipi rari AHQ, ARH, ARK, ecc. sono
  considerati equivalenti all ARQ.

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Combinazioni dei genotipi e suscettibilità alla
scrapie

• ARR/ARR sono resistenti (Classe I)
• ARR/ARQ sono semi-resistenti (Classe II)
• ARQ/ARQ sono suscettibili (Classe III)
• ARQ/VRQ sono molto suscettibili (divieto di
  impiego come riproduttori)
• VRQ/VRQ sono molto suscettibili (divieto di
  impiego come riproduttori)
• ARR/VRQ sono poco suscettibili (divieto di
  impiego come riproduttori)

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Tabella di suscettibilità degli agnelli
Pecora (136/154/171) Montone (136/154/171) Montone (136/154/171) Montone (136/154/171)
Pecora (136/154/171) ARQ VRQ ARR
ARQ ARQ ARQ VRQ ARQ ARR ARQ
VRQ ARQ VRQ VRQ VRQ ARR VRQ
ARR ARQ ARR VRQ ARR ARR ARR
Molto Suscettibile
Semi- Resistente
Resistente
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La ricerca ha dimostrato che

• la Scrapie si diffonde alle pecore suscettibili
  (171QQ) e alle capre attraverso il contatto con
  la placenta ed i liquidi fetali infetti.

• Tutte le placente 171QR di pecore infette 171QQ
  esami-nate sono risultate negative per scrapie,
  mentre le placente 171QQ di pecore infette 171QQ
  sono risultate positive.
• Pertanto, le placente ed i liquidi fetali 171QR
  di pecore infette non dovrebbero essere in grado
  di trasmettere la scrapie alle altre pecore
  suscettibili.

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30
Limportanza del genotipo della placenta nella
trasmissione della scrapie

• Gli agnelli hanno una combinazione del DNA della
  pecora e del montone
• una pecora 171QQ accoppiata ad un montone 171RR
  produrrà un agnello 171QR con fluidi e placenta
  171QR.
• una pecora 171QQ accoppiata ad un montone 171QQ
  produrrà un agnello 171QQ con fluidi e placenta
  171QQ.

31
feto 171QQ placenta infetta da Scrapie
SCRAPIE
32
I genotipi che controllano la suscettibilità e la
resistenza alla malattia sono LA cosa più
importante che un allevatore deve sapere sulla
genetica della scrapie!
33
Come lallevatore può usare la Genotipizzazione
per prevenire la Scrapie

• Selezionando montoni resistenti (171RR / I
  Classe) o semi-resistenti (171QR / II Classe)
• Ogni individuo riceve un gene da ciascun
  genitore.
• Montoni resistenti produrranno solamente agnelli
  resistenti (171RR) o semi-resistenti (171QR).
• Montoni semi-resistenti (171QR) produrranno
  agnelli resistenti, semi-resistenti o
  suscettibili a seconda del genotipo della pecora
  coperta.

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Come lallevatore può usare la Genotipiz-zazione
per prevenire la Scrapie (cont.)

• Selezionando pecore resistenti (171RR / I Classe)
  o semi-resistenti (171QR / II Classe)
• Una pecora trasmetterà i suoi caratteri di
  resistenza/suscettibilità allo stesso modo del
  montone, ma solamente al suo agnello.
• La genotipizzazione delle pecore ha un basso
  costo/efficacia rispetto a quella del montone.
• In pratica è utile solo per le madri di montoni o
  quando si vuole accelerare al massimo la
  selezione (allevamento infetto).

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Tabella di suscettibilità degli agnelli
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Come lallevatore può usare la Genotipiz-zazione
per prevenire la Scrapie (cont.)

• La Genotipizzazione deve essere considerata come
  uno strumento non come unico strumento di
  prevenzione
• Il metodo più efficace per evitare lintroduzione
  della scrapie è quello di non comprare pecore
• Se il tuo sistema di allevamento richiede
  lacquisto di pecore, compra pecore resistenti
  (classe I - 171RR) o semi-resistenti (classe II -
  171QR).

37
Come lallevatore può usare la Genotipiz-zazione
per prevenire la Scrapie (cont.)

• Se pensi che il tuo allevamento sia a rischio di
  scrapie perché negli anni hai comprato pecore da
  diversi greggi con stato sanitario sconosciuto e
  in particolare pecore di razze ad alta prevalenza
  (massesi, bergamasche, langhe)
• Considera di aderire al piano di selezione
  genetica per aumentare la resistenza del tuo
  gregge e inizia a comprare pecore di classe I o
  II e/o
• a ridurre il rischio di trasmissione delle
  pecore con genotipo ignoto usando montoni di
  classe I.

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Il Piano regionale di selezione genetica per la
resistenza alle EST negli ovini

• Il piano è obbligatorio per gli allevamenti
  iscritti ai Libri genealogici e per i greggi ad
  alto merito genetico.
• Tutti gli altri allevamenti ovini possono aderire
  volontariamente.

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Obiettivi del piano

• Obiettivo generale del Piano è quello di
  in-crementare la frequenza dei caratteri di
  resistenza genetica alle TSE nella popolazio-ne
  ovina al fine di
• a) contribuire alla tutela della salute umana ed
  animale
• b) concorrere al controllo delle TSE degli ovini
• c) concorrere alla creazione di aziende ovine a
  basso rischio di TSE.

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Obiettivi del piano

• Obiettivi specifici del piano sono
• a) eliminazione dellallele VRQ dagli allevamenti
  aderenti al piano
• b) incremento della frequenza dellallele ARR
  negli allevamenti aderenti al Piano.
• c) aumento della disponibilità di montoni con
  genotipo resistente (ARR/ARR), utili anche per il
  ripopolamento degli allevamenti infetti
• d) progressiva diminuzione della frequenza
  dellallele ARQ negli allevamenti aderenti al
  piano.

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Come funziona il piano

• Selezione genetica per linea maschile tutti i
  montoni vengono tipizzati.
• I montoni con genotipo non idoneo (VRQ) vengono
  macellati con indennizzo.
• Limitazioni nellintroduzione (solo da allev.
  aderenti e per i primi 5 anni) e nellutilizzo
  nel tempo (per i primi 7 anni) di montoni di
  classe III.
• Stesse regole per le pecore genotipizzate.

42
Schema di selezioneClassificazione dei
riproduttori

• La selezione avviene per linea maschile
• per accelerare la selezione possono essere
  testate anche le femmine (gruppi di monta).

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Come funziona il piano (cont.)

• Tutti i riproduttori del gregge devono essere
  identificati in modo permanente (microchip)
• Tutti gli allevatori devono usufruire della
  consulenza di un veterinario riconosciuto

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Schema di selezioneUtilizzo dei riproduttori

• La Regione, su parere della Commissione,
  definisce se una razza ha frequenza di ARR
  superiore al 40.

• Montoni di 3 classe
• introdotti solo nei primi 5 anni del piano
• utilizzabili solo nei primi 7 anni del piano

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Compiti dellallevatore

• Allevare e gestire i gruppi di monta
• Identificare (ID permanente) tutti i riproduttori
  ovini e caprini di età gt6 mesi
• Segnalare alla AUSL i capi con sintomi sospetti e
  i morti
• Segnalare alla AUSL le introduzioni
• Introdurre ed utilizzare solamente montoni di
  genotipi ammessi dal piano

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Compiti dellallevatore

• Macellare i riproduttori dichiarati non idonei
  (indennizzo)
• Pulizia, disinfezione e raccolta delle placente
• Mantenere aggiornato il registro di stalla
• Aiutare il Servizio Veterinario A.USL nelle
  operazioni di verifica del piano
• Eseguire test del DNA aggiuntivi

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Compiti della AUSL

• Identificare gli allevamenti aderenti al piano,
  raccogliere le domande.
• Effettuare i prelievi per la tipizzazione
  genetica dei montoni (veterinario riconosciuto).
• Assegnare le qualifiche sanitarie agli
  allevamenti aderenti al piano.
• Eseguire ispezioni semestrali per la verifica
  dell andamento del piano. Controlli a campione
  annuali.
• Predisporre le pratiche per lindennizzo dei
  riproduttori non idonei macellati

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Schema di selezioneQualifica degli allevamenti

• La AUSL sulla base della situazione genetica
  rilevata e sugli esiti delle ispezioni periodiche
  assegna una qualifica di resistenza
  allallevamento.

49
Costi del piano

• Il SSN copre le spese relative alle analisi
  genetiche effettuate nelle aziende aderenti al
  piano.
• Il SSN indennizza (L.218/1988) i riproduttori
  (portatori dellallele VRQ) delle aziende
  aderenti al piano macellati ai sensi del piano
  nazionale (DM 17/12/04).

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Punti critici

• La formazione e linformazione di allevatori e
  veterinari
• La motivazione e la collaborazione degli
  allevatori
• Lidentificazione degli animali
• Il ruolo del veterinario aziendale.

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Conclusioni

• Alla tipizzazione genetica non consegue una
  diagnosi di scrapie
• Il successo del piano deriverà dal numero di
  adesioni da parte di allevatori motivati
• Risultati apprezzabili in tempi medio-lunghi (5-7
  anni).

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Di che cosa abbiamo parlato

• la Scrapie
• Storia e diffusione
• Concetti base sulla malattia
• Genetica della Scrapie

• Come usare la genotipizzazione per la selezione
  genetica verso la resistenza alle EST

Di cosa parleremo ora

• Le vostre domande più frequenti

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53
Cosa succede se la scrapie viene diagnosticata
nel mio gregge? - 1

• In caso di diagnosi di scrapie su capi con
  sintomi sospetti, morti in stalla o macellati
  viene applicato il Regolamento CE 999/2001, come
  modificato dal Reg.CE 1492/2004, e dal DM
  08/04/1999. Essi prevedono
• sequestro dellazienda e blocco delle
  movimentazioni
• sequestro e distruzione del latte prodotto (con
  indennizzo) fino al completamento delle
  operazioni di abbattimento

54
Cosa succede se la scrapie viene diagnosticata
nel mio gregge? - 2

• poi
• Abbattimento e distruzione (con indennizzo) di
  tutti i caprini presenti in azienda
• genotipizzazione di tutti gli ovini presenti in
  azienda
• abbattimento e distruzione (con indennizzo) di
  tutti i montoni, esclusi quelli di Classe I
• abbattimento e distruzione (con indennizzo) di
  tutte le pecore, escluse quelle di classe I e II

55
Cosa succede se la scrapie viene diagnosticata
nel mio gregge? - 3

• Dopo labbattimento, il ripopolamento potrà
  avvenire
• solo con montoni di Classe I
• solo con pecore di Classe I o di Classe II
• le pecore di Classe II potranno lasciare
  lazienda solo con destinazione macello
• indagini per le EST a campione su animali
  macellati e test di tutti i morti in azienda
• Restrizioni mantenute per tre anni.

56
Cosa succede se la scrapie viene diagnosticata
nel mio gregge?

• Negli allevamenti aderenti al piano, soprattutto
  in quelli che hanno da tempo eliminato i montoni
  di Classe III gli abbattimenti in caso di scrapie
  riguarderanno una percentuale di animali
  decisamente inferiore a quella che dovrebbe
  essere abbattuta in un allevamento non aderente.
• In un allevamento di Livello I o II non verrebbe
  abbattuto neanche un ovino (solamente gli
  eventuali caprini presenti).

57
Riassumendo

• Domanda
• Abbiamo capito che la scrapie è una malattia
  del sistema nervoso sempre mortale e che la
  probabilità di ammalarsi è controllata dalla
  genetica, ma vengono denunciati solamente poche
  decine di casi allanno in Italia, perché tanta
  enfasi sulla sua eradicazione?

58
Riassumendo

• Risposta
• La Scrapie costa diversi milioni di Euro agli
  allevatori a causa di mancate vendite, degli
  aumentati costi e mortalità legata alla malattia.
• La Scrapie è una Encefalopatia Spongiforme
  Trasmissibile (EST). I consumatori si aspettano
  leradicazione di tutte le TSE.
• Molti casi di scrapie non vengono diagnosticati.
  E provato che un piano di selezione genetica è
  un modo efficace per controllare questa malattia.

59
Riassumendo

• Domanda
• Qual è la cosa più importante che dobbiamo
  conoscere sulla genetica della scrapie?
• Risposta
• La suscettibilità dei diversi genotipi
• ARR/ARR (Classe I) sono resistenti
• ARR/ARQ (Classe II) sono semi-resistenti
• ARQ/ARQ (Classe III) sono molto suscettibili
  ARQAHQARHARK
• I portatori di VRQ sono talmente suscettibili
  che ne è vietato limpiego come riproduttori

60
Riassumendo

• Domanda
• Se il mio gregge è a rischio di scrapie perché
  ho comprato delle pecore, che cosa dovrei fare?
• Risposta
• Se si considera il proprio gregge a rischio,
  diventa opportuno limpiego di montoni di Classe
  I per aumentare la percentuale di agnelli
  geneticamente più resistenti alla scrapie.

61
Riassumendo
Domanda Se le mie pecore non hanno la scrapie
devo comunque pensare di aderire al piano di
selezione genetica?

• Risposta
• Sì, soprattuto se
• il tuo gregge è a rischio di scrapie perché
• allevi una razza nella quale la scrapie si
  manifesta e hai comprato pecore da allevamenti
  con stato sanitario sconosciuto
• Hai comprato pecore da un allevamento infetto
• Hai osservato in passato segni clinici di scrapie
  nel tuo allevamento
• Gli altri allevatori richiedono riproduttori di
  genotipi resistenti alla scrapie.

62
62
Riassumendo
Domanda Se non ho la scrapie in allevamento,
devo comunque aderire al piano di selezione
genetica per la resistenza alla scrapie?

• Risposta
• Sì, se sei iscritto a libro genealogico.

• No, se non sei iscritto a libro e non ti
  interessa vendere riproduttori ad altri
  allevamenti. Oppure i vantaggi legati alla
  selezione per altri tratti genetici superano
  quelli legati alla resistenza alla scrapie.
• Ad ogni modo prendi in considerazione di
  applicare tutte le pratiche per prevenire
  lintroduzione della scrapie nel tuo allevamento
  attraverso lacquisto di riproduttori di classe I
  o classe II.

63
63
????Altre domande--????

• For maggiori informazioni visita questi siti web
• http//www.bs.izs.it/cerev/
• http//www.izsto.it/ceaindice.htm

64
Produced by the National Scrapie Education
Initiative.
Tradotto a cura della Commissione regionale
dellEmilia-Romagna.
Fine