??(virus)?????????????????,???????????????????????????????

1
??? ????
2
??????

• ??(virus)?????????????????,???????????????????????
  ????????
• ???????????????
• 1.?????????????,?????
• 2.?????,???????????????
• ???????,?????????????(Plant virus)????????????????
  ??????

3
??????????

• ?????????????????????????????????????????????????
  ???????????????????????????????,??????????????????
  
• ??????????????????????????????????????????
• ????????????,???????????????????????,?????????

4
?????????

• 1886????(Mayer)???????????????
• 1892???????(Ivanowski)????????????????????
• 1898?????(Beijeincku)???????????,????????? (
  contagium vivum fluidum ),???Virus?????
• 1935?,????????(Stanley)??????????????,????????????
  ????(1946??Nobel Prize in Chemistry)?

5
?????????

• 1936????????(Bawden)?????TMV?????
• l939?Kausch?????????????????
• 1956?Gierrer ????????RNA??????????
• 1971?Diener ??????RNA(250-400bps)?????(viroid)
• 1982?????????????

6
?????????

• 1981?,A.Lwoff???????????????,?????????????.??,???
  ?????,??????
• ????? ???? ??????
  ??
• ? ? ? ?
  
• ? ? - -
  
• ??????? - -
  -
• ? -
  - -
• ????????? - - -
  -
• ? ? - - -
  -
• ????,????????,??????

7
??? ?????????????
8
?????????

• ?????????,???????(nm)?
• ????????????????????
• ??????????20?35nm,??????70-80nm,?????????????????(
  icosahedral particle)???
• ??????20-80nm100-250nm,??????????,??????1113nm
  750nm,??????2000nm???
• ?????????????,???????????????????,???????(?????)?
  ????,??????????????,??????

9
?????????

• ????,???????,??????????,????????????????????
  ???????????
• TMV???,CMV????
• ????20??,??????60??60???,?????????????????,
  ?????,???????????????????

10
?????????

• ???????????????,?????,????????,????,???
  ?????????????????
• ?????????5--40,???60-95,??????????
• ????????????,?????????,????????????

11
??? ??????????

• DNA---RNA---???,???????,????????,??,???
  ??????????????,??????
• ???????,??????????,???????????????????,????
  ???????DNA,????mRNA,?????????,??????????
• ????????????????,???????????????????
  ?????????????????,X??,???,??,???????????

12
?????????????

• ??????(Symptom)
• ????????????????,????????,?????????,???????
• ????(mosaic),??(yellow)?
• ??(negrosis)???????,?TMV????????????,???Y???
  ???????????????
• ???????(dwarf),??(leafroll)
  ,??(rugose),??(fernleaf)?
• ?????(rosette),??(tumor)?

13
?????????????

• ??????????????
• 1. ????
• ???????????TMV,??????????????,??????????????,
  ????????????????????????????????????????????????
• ?????????,??????????,????,?????

14
?????????????

• 2. ?????
• ?????????????????????
• ???(inclussion)??????????,??????????????,??
  ?????????,???????????????????X-??????
• ??????????????????,???????,????,???????????
  ?????????????

15
?????????????

• X-??????,???,???????,???????????????
• ??????
• ??????????,??,???????????
• ????????????????,??????????????,?
  ????????????????,??,????????????????

16
?????????????

• ???????????
• ??? ?????????????,???? ???????????
  ????????????? ???????????????????,???????????
  ????,?????????? ?????????????,?????

17
?????????????

• ??????
• ????????????????????????????? 1.????
• ??????(Strain)??????????????,??????????,????????
  ??????,?????????(??????,????)????(??????)?
  ?TMV(???) ?? ?????
  
• TMV??????(???) ??,??
• TMV?????????????,???????????

18
?????????????

• ???????(cross protection)???????????????,????????
  ???????????,????????????????????????????????
• ?????????????????????

19
?????????????

• ??????????
• ???????????????,?????????????????????????????
  ????????Y?????????
• ?????????????????,??????????????,?????
• ??????? ???? gt ?? ??
• ???X?? ????

20
?????????????

• 2. ???? ???????????????????
• ? TMV ???--???????
• ???--???????
• ????????????????,??????????????
  ?????????????????????????? ??????????????????????
  
• a.?????????????TMV--????
• b.?????????????????????????
• c.??????????????,????????,??????????

21
?????????????

• 3. ????????????????????
• (1)??gt35??lt10???????,????????,???????TMV?
• ??????????????,????????,??????????????????????
  ?????
• ??????? ?????????
• (2)????????????????????????????????,??????

22
??? ??????????

• ?? ???????
• ?????????????????????????,??????????????????????
• ???????????,?????????????????
• ?????????????????,???????????????????????????????
  ?
• ?????????????????????????,???????????????????????
  ???????????????????????????
• ??????????????,??????????????????????????,??????,?
  ???????,??,???????????????????

23
???????????

• ???????????????,?????????????????????
• ??????????????,????????????,??????????????????,???
  ????????????????????

24
??????

• ???????????,??????????????????????????????
• ???????????400??,???200??????,130????????
• ??????,?????????,??70?????????????,????????????,?
  ?????????????????

25
????????????

• ?????????????????????????????????
• ?????????????????????,?????????????,??????????????
  ???(circulative),????????????,??????????
• ???????????????????????????(propagative)?????(nonp
  ropagative)??????????????????????(nonc?ulative)?
• ???????????????????(nonpersistent)?????(semipersis
  tent)????(persistent)?????????????????????????????
  ?????????????????

26
(No Transcript)
27
3.???????????????

• ?????(probe)????????????????????????????,????????
  ??????????????????????????????,???????????,???????
  ?????????????
• ????????????????????????????????????????????????
  ?????????????,???????????????,???????????????????
  ????????????
• ????(Helper component,??HC) ?????????????????,???
  ???????????????,????,?????????????????????????,???
  ???Y??????????,???????????????

28
(?)????

• 1.?? ??????,???200??????160??????,???????23?
  ??,??????40?50???(?????????),????????100?????????1
  60???????,??????????,??????????,???????????75?????
  ?
• ?????????????????,?????Y??????????????????????
  ?????????????????????????????????????????????????,
  ????????????????????,??????????

29
2.?????

• ???(1eaf hopper)??(Cicadellidae)??2000??15000????,
  ??21????49???????????????20??,???????(Delphacidae)
  ???????????????????????,??????????????????????????
  ?
• ?????(Plant hopper)??????????????,????????????
  ??????????????????????????????????????,???????????
  ??,??????????,???????????????????,???????????????
• ????????????????????,???????????????????????

30
(?)??????

• ?????????????,??????TMV??????????,????????,???????
  ??????????????5??38???????80????????????,?????????
  ?????????????,???????????????,???????,????30?50cm?
  ?????????????????????????,????????????????????????
  
• ?????????????????,??????(Olpidium)?????(Polymy
  xa)?????(Spongospora)??5?????20?????

31
???????

• (?)???? ????(Mechanical transmission)???????????
  ?????????????????????
• ?????????????????????????????????????
  ????????????,????????(Tobamovirus)????X???(Potexvi
  rus)??????????????(Nepovirus)???????????????????
  ?????,???????(CMV)??????????????????
• ??????????????????????????,??????????
  ??????????????????,???????????????????????????????
  

32
(?)???????????

• ???????????,?????????????????,????????????????????
  ??,????????????????,?????????????????????????,????
  ???????
• ?????????????????,?????????????????????????????
  ?????????????????

33
(?)???????

• ?1/5??????????????????????????????????????????????
  ??,????????,???????(TRSV)?????????(BCMV)??????????
  5??????????????????,?CMV????????????
• ?????????????????????,?????????
• ?????????????????,??????????????????????,???????
  ????????
• ??????????,?????????(BSMV)??90?100??????(CMV)??
  1?50,??????
• ???????????,????????????????????????????,????????
  ????????????,??????????

34
????????????

• ????????????????,???????????
• ????????? ??????????????????
• ???????? ??????????????????????(phloem),?????????
  ?????(xylem)???
• ????????,????????????????????,????????????????
• TMV????????????,???????????????????,?
  ?13?,???????????35???????????????????????????2
  5?????????????

35
??????????????

• 1.?????????
• (1)??????????????
• (2)????,51-53?????10???
• (3)?????????????
• 2.????,???????
• 3.??????????
• 4.????????????,???????????,?????

36
??? ??????????

• ???????????????????(Interrnational Committee on
  Taxonomy of viruses,ICTV)?????????
• ????????????,?????(?)????,????????????????????????
  ??????20??????????,?1995?,ICTV???????????????,??
  ?????,????????????????????????????
• ??????????????????????????????????,???RNA???DNA?
  ?????
• ???????,???????????????????????????????

37
?????????

• (?)???? ???????????????????????????????????
  (DNA?RNA)??????(single strand, ss)????(double
  strand,ds)??????????????????????????(??????)??
• ????????,???????9??47???(???????????),??(?)??
  ???????43,??(?)?????????411?

38
?????

• ?????????,?????????????????????????????????
• ??????????????????,????(satellite),?????????????(h
  eIper virus)?????????????????,???????????????????
  ?????????,?????????????????????????????RNA,?????RN
  A(satellite RNA,sRNA)?
• ????????RNA??????????????(viroid)?????????RNA????
  ??(virusoid)???????????????????(prion)?
• ????????,???????????(subviruses),?????????????????
  (euviruses)?

39
(?)?????

• ??(strain)????????,??????????????????,????????????
  ????????,???????????(isolate)?

40
?????????

• ??????????????????,???????????????,????????Tobacco
  mosaic virus,???TMV???????Cucumber mosaic
  virus,???CMV?
• ?????????,??????????(??????)?????????(??????)???vi
  rus?????????????????Cucumovirus????????Tobamo
  virus????????????virus,???????????,??????????????
  
• ???(viroid)??????????????,??????????,?????????????
  ?Vd,???????????(Potato spindle tuber
  viroid)???PSTVd?

41
??? ?????????

• ????????????????????????????????,??????,??????
• ???????????????????????????,??????????,????,??????
  ??,???????,????,??????????
• ???????????????????????,?????????????????????????
  ???????????????????????
• ???????????????????????????

42
???????

• ?????????????????,???????????????????
• ?????????????????,????????????????????????????????
  ??,????????????????????????????????????,??????????
  ???????????
• ????????????????,??????????????????????
• ???????????????????????????????????
• ??????????????????????????????????????????????????
  ????????????????????????????,???44??????

43
?????????

• ????????,??????????????(???????),??????????(9.9l
  0-11m,???????????)???????????,???????10100nm?????
  ???????????????,?????????????
• ?????????????????????????,????????????????????
  ????????,?????????,?????????????????(???)????,????
  ????,??????,??????????????????????????????????????
  ?????????????????,??????????????????????? ????

44
???????

• ??????????????????(antigen)??,?????????????(a
  ntiserum)???????????????(?????????),???????,??????
  ?????????????,????????????????????????????????????
  ??,?????????????????????????????????????????????

45

• ?????????????????,?????????,????????????????????
  ???????????412(1)????????,??????????(2)????????
  ??????,??????(3)????????,??????????
• ??????(Enzyme Linked Immuno Sorbent
  Assay,ELISA)?????????????,???????????????????????
  ?,ELISA????????????,??????1-10ng/m1????,????????
  ????????,???????????,??????????,????????????????
  ,??????????????????????,????????,??????,?????????
  ??????????????ELISA??????????????????????4l 3

46
???????PCR??

• ???????????????????,????????????????????,?????????
  ??????????????,????????????????????,??????????????
  ?(PCR)???????
• ???????DNA?RNA????,???RNA????DNA??????????????????
  ??,RNA--DNA???????????????????????????????????????
  ?(Probe),?????????????RNA,??????DNA(complementary
  DNA,cDNA),???cDNA???
• ??????????????????,????????????(???)???????

47

• ???????(PCR)?????????????????,???????????????DNA
  ????????????????????????,???????DNA???????????????
  ???DNA?????????,???????????4?dNTP??????DNA????????
  ??????????????????????????????????????A???????????
  ????????????DNA??????????????,???????DNA????1?,???
  ?????,?2530????????????
• PCR???????????????????RNA??cDNA???????DNA????????
  ??????????????????

48
?????????

• ???????????,????????????????????,???????????????
  ??????????????????????,???????????????????????????
  
• 1.????(Dilution End Point,DEP)
  ?????????????,?10-1,10-2,10-3??,????????????????
  ?,????????????
• 2.????(Thermal Inactivation Point,TIP)
  ????????????????????????TIP????????????,???45????
  ???????,?97??????????5570???
• 3.?????(Longevity in vitro,LIV)
  ???(2022?)?,????????????????????????????????

49

• 4 .???????? ????S???????20????1??(1/981g)????????
  ??,?????????,???????,????????,?Svedberg????????S20
  ???50S???S???????????????????,????????????????????
  ?????????????????
• 5.?????? ???????????????,?????????280nm??,???
  260nm?????260/280????????????????,?????????,??????
  ????,???????????????????,??????????????,????????2
  60/280??????????,???????.?????E0.11cm260nm?,?????
  ?0.1??,???1cm?????260nm??????
• 6.????????? ?????????????????????????????????
  ????????????????????????????

50
?4-4 ????????????????????????

• ???? ?????? ?????? ??????
• ?? ???
  ??,??? ???
• ?? ???
  ? ??
• ?? ??
  ?? ???

51
??? ????????????

• ??????????TMV
• ?????????CMV
• ?????Y????PVY

52
??????????TMV

• ???????( Tobamovirus )??13???2????,??????????(TMV)
  ?
• ????????,??18nm,?300nm
• ????????????????????,??????????????????,?????????
  
• ????????????????????????????????????50???????l0-4
  ?10-7,????90????
• ?????????????????????,???????
• TMV??????????,????????????????????????????????????
  ?????,??????????????????????????????,?????????????
  ???????????

53
?????????CMV

• ???????(Cucumovirus )?3???,???????(CMV)???????(ToA
  V)???????(PnSV)?
• ??????????(Cucumber mosaic virus, CMV)
  ????,??28nm?
• CMV?????????????????,?????????,????????????,??????
  ??????????
• ?????????????,?????67??470????
• ???????????55 - 70?,????? l0-3 - l0-6,?????
  110??
• ??CMV?????????????,???75?????????????????????,????
  ?????????????????.?????
• ?????????????????????,?????????????????????

54
?????Y????PVY

• ???Y???(Potyvirus)????????????,??75???93?????
• ???????750nm,???11?15nm?
• ?????????????,????????????,???????
• ??????????????????????,?????????????????
• ???????????????????,?PVY????,MDMV(???????)?????,??
  ????(SMV)??????????????????
• ?????24?,????50?65?,?????10-2?l0-6(?????)????????
  ???????????????,
• ?????,PVY???????????????

55
??? ?????

• ???????????????????????,?????????????,????????????
  ???????,??????????????????????

56
???????????

• ?????????????,????1105?????????????????????RNA,?
  ??????????,????????????,?????????
• ???(viroid)????????????????????????????????????(PS
  TVd)?
• ??????????????????????,???????????????????????????
  ??
• ???????30?????,??23???????????????

57
???????????????

• 1.??????????????100?????
• 2.??????50?100???????????????,?????100???????
• 3.??????? ??????????????.
• 4.???????? G/C???,55?58
• 5.????? ?????????????????????
• 6.?????? ?????????????????,???????????,????????
  ?20?.

58
???????

• 1.????,1984,?????(???),?????
• 2.????????,?????(????),???????
• 3.?????????,1994,?????(??????????),?????
• 4.Kurstak, E. 1981, Handbook of Plant Virus
  Infections, Comparative Diagnosis.
  Elsevier/North-Holland Biomedical Press
• 5.Matthews, REF. 1992, Fundamentals of Plant
  Virology. Academic Press