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MISE AU POINT DU DOSAGE PLASMATIQUE DE
LEFAVIRENZ PRISE EN COMPTE DES CONTRAINTES
DES TECHNIQUES LOCALES CHOU M1, BARRAIL-TRAN A2,
LE TIEC C2, FURLAN V2, CARAYON A1, BABIN FX1,
TABURET AM2 1Laboratoire R. MERIEUX, Faculté de
Pharmacie, Université des sciences de la santé,
Phnom Penh, Cambodge, 2Pharmacie
Clinique, Hôpital Bicêtre, Assistance Publique
Hôpitaux de Paris, France
N418
OBJECTIFS
RESULTATS
Les inhibiteurs non nucléosidiques de la
transcriptase inverse (INNTI), associés à deux
analogues nucléosidiques sont prescrits en
première intention chez les patients infectés par
le VIH au Cambodge. La mise en place du dosage
plasmatique de léfavirenz dans un laboratoire au
Cambodge, permet dévaluer dans le cadre de
protocole de recherche lexposition à ces
médicaments chez des patients dont les
caractéristiques démographiques et génétiques
sont différentes des patients occidentaux. Une
méthode de chromatographie liquide avec détection
UV à 248 nm (CLHP) a été mise au point, en tenant
compte des contraintes du laboratoire.

• Exemples de chromatogrammes
• Caractéristiques de la méthode
• - temps de rétention
• éfavirenz 10,5 min
• étalon interne 13,5 min
• - limite de quantification 50 ng/mL
• - linéarité 0 - 5000 ng/mL
• Sélectivité et spécificité

plasma vierge
plasma 2500 ng/mL
Gamme détalonnage
MATERIEL

• Réactifs
• - éfavirenz, étalon interne A86093.0 (Abbott)
• - méthanol, acétonitrile (VWR international
  Prolabo)
• Matrice biologique plasmas
• - fournis par létablissement français du sang
  (CHU de Bicêtre)
• - testés pour vérifier labsence dinterférences
  avec lefavirenz et létalon interne
• Système chromatographique (Waters)
• - injecteur automatique
• - pompe
• - colonne type phase inversée (Lichrospher
  100- RP15 125x4mm, particules 5µm)
• - détecteur UV-visible
• - logiciel dacquisition des données (Millenium)
• Conditions chromatographiques
• - détection 208 nm
• - phase mobile acétonitrile/eau (450/550 v/v),
  
• débit 1,5 mL/min

Répétabilité
Fidélité intermédiaire

METHODES

• Préparation des solutions mère (SM) et filles
  (SF) défavirenz dans du méthanol
• - SM éfavirenz 1 mg/mL
• - SF éfavirenz SF1 20 µg/mL, SF2 5000
  ng/mL, SF3 500 ng/mL
• Préparation de la gamme détalonnage
• Traitement de léchantillon

Test de corrélation entre la technique de
référence extraction et la nouvelle technique
précipitation
EFV extraction 0,88 x EFV précipitation
25,78 r2 0,998016
Test des différences
CONCLUSION
Cette méthode est simple, rapide, peu
consommatrice de solvants et de consommable.
Elle est donc bien adaptée pour être utilisée au
Cambodge.
Remerciements
4ème congres francophone VIH/SIDA 29-31 mars
2007 Paris, Cité des sciences et de lindustrie
Fondation Rodolphe Mérieux Laboratoire Pharmacie
Clinique, hôpital Bicêtre