LE MILIEU A LA LYSINE DE TAYLOR LDC

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LE MILIEU A LA LYSINE DE TAYLOR (LDC)
Composition
Source N
Source de C, N
Peptone 5 g Extrait de viande 5 g
L-Lysine 10 g Glucose 0,5 g Pyridoxal
phosphate 0,005 g Pourpre de Bromocrésol 0,01
g Rouge de crésol 0,005 g ED qsp 1 L
Acide aminé indispensable à la recherche de la
LDC
Source de C
Vitamine PP , coenzyme des décarboxylases
Indicateurs de pH violet pH basique ou neutre,
jaune pH acide
pH 6,8 à 7
Ensemencement
1- Introduire une goutte de suspension dans le
milieu. 2- Agiter.
3- Si le tube nest pas plein, recouvrir dun peu
dhuile de vaseline. 4- Incuber 24 heures à 37C
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LE MILIEU UREE INDOLE
Acide aminé nécessaire à la recherche de la TDA
et de la tryptophanase
Composition
Molécule azotée nécessaire pour la recherche de
luréase
Tryptophane 0,3 g Urée 2 g Phosphate
monopotassique 0,1 g Phosphate bipotassique 0,1
g Chlorure de sodium 0,5 g Ethanol à 95 1
mL Rouge de phénol à 1 0,25 mL ED qsp 100
mL
Source de P
Sels minéraux
Solubilisation du tryptophane
Indicateurs de pH rouge pH basique ou neutre,
jaune pH acide
pH 7
Ensemencement
1- Introduire 1 ou plusieurs colonies identiques
dans le milieu. 2- Agiter. 3- Incuber 24 heures à
37C.
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Lecture des milieux
Milieu LDC
1ère lecture possible
2nde lecture possible
Alcalinisation du milieu par formation dun
composé basique issu de la décarboxylation de la
lysine par la LDC, la cadavérine LDC
Le milieu est devenu jaune ? le pH est acide par
formation de composés acides issus de la
fermentation du glucose par les bactéries. Il ny
a pas réalcalinisation du milieu LDC -
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Milieu urée-indole
Recherche de luréase lecture directe
1ère lecture possible
2nde lecture possible
Alcalinisation du milieu par formation dun
composé basique issu de lhydrolyse de lurée
UREASE
Le rouge de phénol reste orangé ? pH neutre ?
lurée nest pas hydrolysée, absence de lenzyme
chez les bactéries UREASE -
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Recherche de la TDA et de lindole
2 gouttes de FeCl3
10 gouttes du milieu
Formation dun précipité marron ? présence
dacide indole pyruvique TDA
Pas de modification du milieu TDA -
Reste de la culture
2 gouttes de réactif de Kovacs
Présence dun anneau rouge en surface ? formation
dindole à partir du Trp sous laction de la
tryptophanase INDOLE
Présence dun anneau orangé en surface ? absence
dindole INDOLE -