DNA technology

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DNA technology
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• Nucleotide? DNA??? ?????
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4
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6
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????(Electrophoresis)? ??.
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Restriction Enzyme

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  ????(cohesive?? sticky end)? ??.
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  ????(blunt end)? ??.

8
Restriction Enzyme ???
9
Restriction Mapping
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Restriction Map??.
10
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??? DNA? ????.
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sticky end? ?? ?? ??.)
11
Plasmid

• Plasmid? ????? ????? ???? ??? ??? DNA??.
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12
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?? ??? ?????.(?? ??? ???)
13
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(lytic cycle)
Vacteriophage? ?? ??(virulent phage)? ??? ??
(temperate phage)? ????. ?? ??? ???? ??? ????
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(lytic cylcle)? ???.
14
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15
Vacteriophage

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• ????? DNA ?? RNA? ??? ???, ????? ??? ???(capsid
  protein or coat protein)? ???? ??.
• ?? ???? DNA??? ?? ??? ??? ????? ?? ?? ??.
• ??? ?? Haid-and tail phage? Filamentous phage?
  ???.

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DNA? ???? ??lt2gt
Southern blotting
17
Southern blotting? ??

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  ??? ??? ?????.

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cDNA synthesis
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??? ??? ? ?? ??.
19
Gene Library

• Genomic library

• cDNA library

20
Polymerase chain reaction(PCR)

• DNA???  ???(Denatuation Step)? ??? DNA? ? ????
  ?? ???.
•  Primer? Annealing(Annealing Step)? ??? ?? ?? ?
  ?? ?? DNA? primer? annealing???.
•   Polymerase? ?? DNA?? ??(Extension step) DNA
  polymerase? ?? ?? DNA? ????  DNA? ?? ???.
•   ?? ? ??? ???? ?????? in vitro ?? DNA? ???? ????
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  ???? DNA??? ?? ??? ?? ??? ?? ? ?? ??? ???? ??
  DNA??? ??? ?? ??? ??? ??? ??.

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PCR ??? ???
22
PCR ??? ??
23
PCR? ???? ?

• HBV DNA PCR Hepatitis B virus? ????? ????
  ????(core region)?? ???? ??  primer? ??
  thermostable DNA polymerase, dNPT, MgCl2 ?
  reaction buffer? ???? PCR? ????. (HBV??? ?? ??
  ??? ????. )
• Hepatitis C Virus RT- PCR HCV RNA PCR? ??? HCV
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  ?? ?? HCV RNA Virus? ?? ??? ?? ? ? ??. (C? ???
  ???? ? 50?? ?????? ??? ? ??? ?? ???? ?????? ???
  ? ??. HCV RT-PCR? C? Virus? ??? ?????? ?? ?????
  ?? ??? ???? ??? ?? ? ? ?? ????.)
• Chlamydia PCR Chlamydia trachomatis? major
  outer membrane protein(MOMP)? ????? ????? ????.
• CMV PCR Herpesvirideae?? ds DNA virus? CMV?
  ????? ?? ??.

24
????

• Essential cell biology
• Biochemistry
• Gene cloning
• Web site
• Etc.
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